目前,利用血管生成抑制類(lèi)藥物來(lái)抑制血管新生已經(jīng)成為治療腫瘤等血管新生類(lèi)疾病的重要思路和方向。在目前所發(fā)現(xiàn)的血管生成抑制類(lèi)因子中,人纖溶酶原的第五個(gè)環(huán)餅區(qū),即Kringle5,是目前發(fā)現(xiàn)的抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖作用特異性較高,毒副作用較小,且活性較強(qiáng)的抑制血管新生類(lèi)物質(zhì),因此,Kringle5在腫瘤等血管新生類(lèi)疾病的臨床治療方面具有巨大的潛力和應(yīng)用價(jià)值。本工作將光譜法、親和色譜法等實(shí)驗(yàn)方法以及分子對(duì)接、熱力學(xué)和動(dòng)力學(xué)模擬等理論預(yù)測(cè)方法相結(jié)合,研究了變性劑誘導(dǎo)的基因重組血管生長(zhǎng)抑制劑Kringle5的結(jié)構(gòu)變化過(guò)程以及一些小分子配體與血管生長(zhǎng)抑制劑Kringle5之間的相互作用,為闡明血管生長(zhǎng)抑制劑Kringle5的作用機(jī)理以及進(jìn)一步對(duì)其藥理藥效的調(diào)控提供了一些新的視野。1.綜合利用內(nèi)源熒光光譜法、熒光相圖分析、熒光探針以及熒光猝滅等方法監(jiān)測(cè)表征了血管生長(zhǎng)抑制劑Kringle5在鹽酸胍和脲誘導(dǎo)下的展開(kāi)-重折疊過(guò)程中的結(jié)構(gòu)變化特征。結(jié)果顯示,在鹽酸胍和脲誘導(dǎo)的Kringle5的去折疊和重折疊過(guò)程中均不存在折疊中間態(tài),即]Kringle5的去折疊和重折疊過(guò)程均符合“二態(tài)模型”。在鹽酸胍和脲誘導(dǎo)的去... 

【文章來(lái)源】：西北大學(xué)陜西省 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 引言
    1.1 研究背景
    1.2 主要研究?jī)?nèi)容
        1.2.1 血管生長(zhǎng)抑制劑Kringle 5與變性劑的相互作用研究
        1.2.2 血管生長(zhǎng)抑制劑Kringle 5與小分子配體的相互作用研究
    1.3 主要研究方法
        1.3.1 熒光光譜分析法
        1.3.2 分子模擬對(duì)接技術(shù)
        1.3.3 親和色譜分析法
    1.4 研究意義
第二章 變性劑誘導(dǎo)的血管生長(zhǎng)抑制劑Kringle 5的去折疊和重折疊過(guò)程
    2.1 引言
    2.2 所用儀器及試劑
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 鹽酸胍誘導(dǎo)的Kringle 5的去折疊過(guò)程
        2.3.2 鹽酸胍誘導(dǎo)的Kringle 5的重折疊過(guò)程
        2.3.3 脲誘導(dǎo)的Kringle 5的去折疊過(guò)程
        2.3.4 脲誘導(dǎo)的Kringle 5的重折疊過(guò)程
        2.3.5 內(nèi)源熒光光譜的測(cè)定以及熒光相圖
        2.3.6 ANS表征Kringle 5 的去/重折疊過(guò)程
        2.3.7 熒光猝滅法研究Kringle 5的去/重折疊過(guò)程
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.4.1 鹽酸胍誘導(dǎo)的Kringle 5去折疊過(guò)程的內(nèi)源熒光譜及熒光相圖分析
        2.4.2 鹽酸胍誘導(dǎo)的Kringle 5重折疊過(guò)程的內(nèi)源熒光譜及熒光相圖分析
        2.4.3 脲誘導(dǎo)的Kringle 5去折疊過(guò)程的內(nèi)源熒光譜及熒光相圖分析
        2.4.4 脲誘導(dǎo)的Kringle 5重折疊過(guò)程的內(nèi)源熒光譜及熒光相圖分析
        2.4.5 ANS表征Kringle 5的去/重折疊過(guò)程
        2.4.6 熒光猝滅法研究鹽酸胍誘導(dǎo)的Kringle 5的去/重折疊過(guò)程
        2.4.7 熒光猝滅法研究脲誘導(dǎo)的Kringle 5的去/重折疊過(guò)程
    2.5 本章小結(jié)
第三章 血管生長(zhǎng)抑制劑Kringle 5與小分子配體相互作用的光譜法研究與分子對(duì)接
    3.1 Kringle 5與L-lysine的相互作用研究
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器及所用試劑
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.1.4 小結(jié)
    3.2 Kringle 5與EACA的相互作用研究
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器及所用試劑
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.2.4 小結(jié)
    3.3 Kringle 5與7-AHA的相互作用研究
        3.3.1 實(shí)驗(yàn)儀器及所用試劑
        3.3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.3.4 小結(jié)
    3.4 Kringle 5與AMCHA的相互作用研究
        3.4.1 實(shí)驗(yàn)儀器及所用試劑
        3.4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.4.4 小結(jié)
    3.5 Kringle 5與Benzylamine的相互作用研究
        3.5.1 實(shí)驗(yàn)儀器及所用試劑
        3.5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.5.4 小結(jié)
    3.6 Kringle 5與五種小分子配體結(jié)合體系的比較及討論
第四章 親和色譜法研究Kringle 5與小分子配體的相互作用——方法的初步建立
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)儀器及所用試劑
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 定向固定化Kringle 5填料的制備
        4.3.2 定向固定化Kringle 5色譜柱的表征
        4.3.3 前沿色譜分析
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        4.4.1 定向固定化Kringle 5親和色譜柱活性表征
        4.4.2 前沿色譜分析
        4.4.3 朗格繆爾等溫吸附模型
        4.4.4 結(jié)合常數(shù)的測(cè)定
    4.5 小結(jié)
全文總結(jié)
    1. 本工作的主要研究?jī)?nèi)容與研究結(jié)果
    2. 未來(lái)工作展望
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號(hào)：3046356