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I-A d /IgG2b Fc二聚體融合蛋白的構(gòu)建表達及鑒定

發(fā)布時間:2021-02-20 02:00
  目的:構(gòu)建I-Ad/IgG2b Fc桿狀病毒表達載體,使其在Sf9昆蟲細胞內(nèi)表達。方法:利用RT-PCR從BALB/c小鼠淋巴細胞中擴增出I-Adα、I-Adβ和IgG2b Fc目的基因序列,運用重疊PCR將I-Adα和I-Adβ分別與Fos和Jun的亮氨酸拉鏈序列相連,形成I-Adα-Fos和I-Adβ-Jun;利用酶切位點XbaⅠ將I-Adα-Fos與IgG2b Fc段相連,形成I-Adα-Fos-IgG2b Fc重組序列;分別將I-Adα-Fos-IgG2b Fc和I-Adβ-Jun插入桿狀病毒表達載體pFastBacTMDual的PPH和PP10兩個啟動子的下游,構(gòu)建出重組載體pFastBacTMDual+[I-Ad/IgG2b F... 

【文章來源】:中國免疫學(xué)雜志. 2017,33(04)北大核心

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 質(zhì)粒、菌株與細胞系
        1.1.2 試劑
    1.2 方法
        1.2.1 重組載體的構(gòu)建
        1.2.2 重組載體的鑒定
        1.2.3 融合蛋白的表達、濃縮及檢測
2 結(jié)果
    2.1 目的基因片段的獲取
    2.2 I-Ad重組載體PCR及酶切鑒定
    2.3 融合蛋白的檢測及鑒定
3 討論



本文編號:3042051

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