[目的]季節(jié)性流感的年度流行和大流感的潛在威脅給人類健康和社會(huì)穩(wěn)定帶來極大挑戰(zhàn)。流感病毒具有高發(fā)的突變率和基因重配特點(diǎn),使廣譜流感疫苗的開發(fā)和抗病毒藥物的研制受到限制,目前使用的流感裂解疫苗主要以病毒蛋白HA、NA為疫苗的主要組成抗原,但HA、NA易發(fā)生抗原漂移和轉(zhuǎn)換的特性使現(xiàn)有的季節(jié)性流感疫苗毒株每年都需要根據(jù)WHO預(yù)測的流行株而進(jìn)行更換和生產(chǎn)。這種毒株篩選和制備工藝的滯后性無法滿足各國衛(wèi)生部門對流感防控的快速反應(yīng)和廣譜性要求。因此篩選和開發(fā)具有流感病毒保守抗原的亞單位疫苗,通過結(jié)構(gòu)生物學(xué)、納米技術(shù)進(jìn)行抗原呈遞的技術(shù)平臺(tái)成為了流感通用疫苗的重要研究方向。在這個(gè)領(lǐng)域,病毒基質(zhì)蛋白M2胞外部分具有在甲型流感病毒中的良好保守性和較好抗原性,成為通用流感疫苗的候選抗原之一。同時(shí),來源于幽門螺桿菌（Helicobacter pylori）鐵蛋白（Ferritin）可以自我折疊成24個(gè)亞單位組成的八面體球形納米顆粒,融合表達(dá)特定病原體基因片段后具備良好的抗原性和免疫原性。這為本課題使用流感病毒跨膜蛋白M2胞外部分,在ferritin蛋白的引導(dǎo)下進(jìn)行融合表達(dá),并自組裝納米顆粒,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)性疫苗的探索... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１：流感結(jié)構(gòu)示意圖??７??

蛋白外殼是由２４個(gè)鐵蛋白亞基自組裝而成球形空心納米籠狀結(jié)構(gòu)，??其中每３個(gè)亞基組成一個(gè)三聚體亞單位，８個(gè)三聚體再組裝成一個(gè)外徑１２?ｎｍ，??內(nèi)徑８?ｎｍ的外殼（圖２）。鐵核則位于納米籠狀結(jié)構(gòu)之中，其主要成分為水鐵??礦，主要為起抗氧化劑作用的氧化結(jié)合位點(diǎn)［２７］。??Ｅｘｔｅｒｉｏｒ?ｓｕｒｆａｃｅ?Ｉｎｔｅｒｉｏｒ?ｃａｖｉｔｙ??＿暴??圖２：鐵蛋白鐵蛋白內(nèi)表面和外表面剖面圖??１１??

Ａ?Ｂ??圖１：雙酶切，并進(jìn)行ＰＣＲ鑒定??２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ，?６Ｈｉｓ－Ｍ２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ，ｐｃＤＮＡＴＭ３．１（＋）載體雙酶切電２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ?，?ＳＮＡＰ?表達(dá)載體雙酶切電泳鑒定。Ｍ：ＤＬ?５０００?ＤＮ為?Ｍ２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ?，?６Ｈ】ｓ－?Ｍ２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ?，?ｐｃ?ＤＮＡ？３．］（＋）空載體，ＳＮＡＰ表達(dá)載體。??Ｍ２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ納米組裝顆粒表達(dá)及驗(yàn)證??跡??疫印跡試驗(yàn)方法來分析Ｍ２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ自組裝納米顆粒ｃ?ＤＮＡＴＭ３．１－Ｍ２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ，ＳＮＡＰ－?Ｍ２ｅ－ｆｅｒｒｉｔｉｎ?重組質(zhì)于４８?ｈ后對細(xì)胞進(jìn)行變性蛋白提取，通過變性膠用

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3014853