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應(yīng)用昆蟲(chóng)細(xì)胞表達(dá)預(yù)防性人乳頭瘤病毒疫苗和應(yīng)用填充床生物反應(yīng)器表達(dá)H1N1流感病毒疫苗的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-01-28 20:22
  動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)起始于上世紀(jì)60年代初,由于動(dòng)物細(xì)胞體系十分適合表達(dá)有生物活性的生物大分子,具有重要醫(yī)用價(jià)值的疫苗、基因工程藥物、抗體藥物、蛋白藥物等生物制品都可應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)。按照動(dòng)物細(xì)胞不同的培養(yǎng)方式可分為懸浮培養(yǎng)、貼壁培養(yǎng)。本論文分兩部分研究?jī)?nèi)容,第一部分為應(yīng)用WAVE反應(yīng)器懸浮培養(yǎng)昆蟲(chóng)細(xì)胞表達(dá)人乳頭瘤病毒預(yù)防性疫苗的研究;第二部分為應(yīng)用一次性填充床生物反應(yīng)器貼壁培養(yǎng)MDCK細(xì)胞表達(dá)H1N1流感病毒的研究。一、人乳頭瘤病毒預(yù)防性疫苗研究人類(lèi)多種癌癥,特別是子宮頸癌經(jīng)相關(guān)的分子流行病學(xué)資料證明與HPV有著密切的關(guān)系。HPV的型別眾多,人們不斷地在皮膚癌癥、疣狀表皮等病理組織中發(fā)現(xiàn)新的HPV型別。目前為止已知型別已經(jīng)突破200種。根據(jù)中國(guó)大陸地區(qū)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果,選用在大陸地區(qū)的第三大優(yōu)勢(shì)型別-HPV58型作為疫苗的組分之一,確定以HPV16、18、58、6、11型為主要疫苗型別的五價(jià)疫苗。期望此疫苗可以保護(hù)75%以上的由HPV16、18、58引起子宮頸癌,還可預(yù)防由HPV6、11引起的低度癌前病變和生殖器疣。主要內(nèi)容如下:HPV各型VLP的構(gòu)建表達(dá):通過(guò)PCR合成HPV16型、18型... 

【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:148 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

應(yīng)用昆蟲(chóng)細(xì)胞表達(dá)預(yù)防性人乳頭瘤病毒疫苗和應(yīng)用填充床生物反應(yīng)器表達(dá)H1N1流感病毒疫苗的研究


189種乳頭瘤亞型分類(lèi)進(jìn)化樹(shù)

人乳頭狀瘤病毒,亞型分類(lèi)


圖 1.1.189 種乳頭瘤亞型分類(lèi)進(jìn)化樹(shù)[9]PV 唯一的宿主,在人類(lèi)不同上皮組織中已分離出 1際病毒學(xué)分類(lèi)委員會(huì)規(guī)定的病毒分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn),omavirus 、 Betapapillomavirus 和 Gammapapil

示意圖,病毒基因組,示意圖,衣殼蛋白


HPV 基因產(chǎn)物及其主要功能見(jiàn)表 1.2。其中晚期區(qū)含有 2 個(gè) ORF,分別編碼病毒的主要衣殼蛋白(L1)及次要衣殼蛋白(L2)。HPV 病毒顆粒由 72 個(gè) L1 五聚體組成(圖 1.5)[13-15]。L1 約有 530 個(gè)氨基酸,分子量約為 52-55kD。L2 含有470 個(gè)氨基酸,分子量為 70Kd 左右。L1 和 L2 的比例大概為 30:1。次要衣殼蛋白在病毒顆粒包裝過(guò)程中,N 端與病毒基因組 DNA 相結(jié)合,因此次要衣殼蛋白L2 可以促進(jìn)病毒顆粒的形成(如圖 1.4)[15,16]。表 1.2 HPV 基因產(chǎn)物及其主要功能圖1.3.HPV病毒基因組示意圖

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]人乳頭瘤病毒18型L1蛋白在畢赤酵母中的表達(dá)及其病毒樣顆粒的免疫原性[J]. 沈瓊,雷建強(qiáng),周朝明,張高峽.  中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2012(02)
[2]重組人乳頭瘤病毒雙價(jià)(16/18型)疫苗免疫原性評(píng)價(jià)方法的研究[J]. 周朝明,馬新興,周婧怡,劉佳驊,王洪芳,雷建強(qiáng).  藥物分析雜志. 2011(09)
[3]人乳頭瘤病毒16型病毒樣顆粒的制備及其免疫原性研究[J]. 魏旻希,李少偉,黃博,沈文通,蘇永在,張春華,顧穎,杜海蓮,張軍,夏寧邵.  病毒學(xué)報(bào). 2009(04)
[4]Predicting the Nuclear Localization Signals of 107 Types of HPV L1 Proteins by Bioinformatic Analysis[J]. Jun Yang1,2, Yi-Li Wang1, and L-Sheng Si1* 1 The Key Laboratory of the Ministry of Education for Biomedical Information Engineering, Institute for Cancer Research, School of Life Science and Technology, Xi’an Jiaotong University, Xi’an 710061, China; 2 Department of Pathology, Second Hospital of Medical College, Xi’an Jiaotong University, Xi’an 710004, China..  Genomics Proteomics & Bioinformatics. 2006(01)
[5]共表達(dá)HPV16L1、L2、E6、E7蛋白的重組非復(fù)制型痘苗病毒構(gòu)建及鑒定[J]. 黃薇,田厚文,任皎,范江濤,趙莉,邊濤,陸振華,阮力.  中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志. 2005(03)

博士論文
[1]預(yù)防性人乳頭瘤病毒病毒樣顆粒疫苗的研究[D]. 劉大維.吉林大學(xué) 2008
[2]封閉連續(xù)細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)流感病毒工藝過(guò)程關(guān)鍵技術(shù)的研究[D]. 羅鳳山.上海交通大學(xué) 2008

碩士論文
[1]人乳頭瘤病毒18型類(lèi)病毒顆粒疫苗研制、中和抗體篩選及冷凍電鏡三維結(jié)構(gòu)重建[D]. 謝明輝.廈門(mén)大學(xué) 2008
[2]人乳頭瘤病毒11型L1蛋白的突變分析及其類(lèi)病毒顆粒疫苗的研制[D]. 王晉.廈門(mén)大學(xué) 2007



本文編號(hào):3005631

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