動物細(xì)胞培養(yǎng)起始于上世紀(jì)60年代初，由于動物細(xì)胞體系十分適合表達(dá)有生物活性的生物大分子，具有重要醫(yī)用價值的疫苗、基因工程藥物、抗體藥物、蛋白藥物等生物制品都可應(yīng)用動物細(xì)胞表達(dá)。按照動物細(xì)胞不同的培養(yǎng)方式可分為懸浮培養(yǎng)、貼壁培養(yǎng)。本論文分兩部分研究內(nèi)容，第一部分為應(yīng)用WAVE反應(yīng)器懸浮培養(yǎng)昆蟲細(xì)胞表達(dá)人乳頭瘤病毒預(yù)防性疫苗的研究；第二部分為應(yīng)用一次性填充床生物反應(yīng)器貼壁培養(yǎng)MDCK細(xì)胞表達(dá)H1N1流感病毒的研究。一、人乳頭瘤病毒預(yù)防性疫苗研究人類多種癌癥，特別是子宮頸癌經(jīng)相關(guān)的分子流行病學(xué)資料證明與HPV有著密切的關(guān)系。HPV的型別眾多，人們不斷地在皮膚癌癥、疣狀表皮等病理組織中發(fā)現(xiàn)新的HPV型別。目前為止已知型別已經(jīng)突破200種。根據(jù)中國大陸地區(qū)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果，選用在大陸地區(qū)的第三大優(yōu)勢型別-HPV58型作為疫苗的組分之一，確定以HPV16、18、58、6、11型為主要疫苗型別的五價疫苗。期望此疫苗可以保護(hù)75%以上的由HPV16、18、58引起子宮頸癌，還可預(yù)防由HPV6、11引起的低度癌前病變和生殖器疣。主要內(nèi)容如下：HPV各型VLP的構(gòu)建表達(dá)：通過PCR合成HPV16型、18型... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

189種乳頭瘤亞型分類進(jìn)化樹

圖 1.1.189 種乳頭瘤亞型分類進(jìn)化樹[9]PV 唯一的宿主，在人類不同上皮組織中已分離出 1際病毒學(xué)分類委員會規(guī)定的病毒分類標(biāo)準(zhǔn)，omavirus 、 Betapapillomavirus 和 Gammapapil

HPV 基因產(chǎn)物及其主要功能見表 1.2。其中晚期區(qū)含有 2 個 ORF，分別編碼病毒的主要衣殼蛋白(L1)及次要衣殼蛋白(L2)。HPV 病毒顆粒由 72 個 L1 五聚體組成（圖 1.5）[13-15]。L1 約有 530 個氨基酸，分子量約為 52-55kD。L2 含有470 個氨基酸，分子量為 70Kd 左右。L1 和 L2 的比例大概為 30:1。次要衣殼蛋白在病毒顆粒包裝過程中，N 端與病毒基因組 DNA 相結(jié)合，因此次要衣殼蛋白L2 可以促進(jìn)病毒顆粒的形成（如圖 1.4）[15,16]。表 1.2 HPV 基因產(chǎn)物及其主要功能圖1.3.HPV病毒基因組示意圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人乳頭瘤病毒18型L1蛋白在畢赤酵母中的表達(dá)及其病毒樣顆粒的免疫原性[J]. 沈瓊,雷建強(qiáng),周朝明,張高峽.  中國生物制品學(xué)雜志. 2012(02)
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博士論文
[1]預(yù)防性人乳頭瘤病毒病毒樣顆粒疫苗的研究[D]. 劉大維.吉林大學(xué) 2008
[2]封閉連續(xù)細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)流感病毒工藝過程關(guān)鍵技術(shù)的研究[D]. 羅鳳山.上海交通大學(xué) 2008

碩士論文
[1]人乳頭瘤病毒18型類病毒顆粒疫苗研制、中和抗體篩選及冷凍電鏡三維結(jié)構(gòu)重建[D]. 謝明輝.廈門大學(xué) 2008
[2]人乳頭瘤病毒11型L1蛋白的突變分析及其類病毒顆粒疫苗的研制[D]. 王晉.廈門大學(xué) 2007



本文編號：3005631