目的:研究使用小干擾RNA（siRNA）特異性沉默體外血腦屏障模型中小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞系b. End3細胞中Epsin2的表達后對血腦屏障模型的功能及VEGFR2、ZO1、occludin表達的影響。方法:使用化學(xué)合成的siRNA特異性干擾b. End3細胞Epsin2的表達,免疫熒光、Western Blot檢測轉(zhuǎn)染后細胞Epsin2、VEGFR2、ZO1、occludin的表達。體外血腦屏障模型分為對照組（control）和Epsin2-siRNA干擾組（Epsin2-siRNA）,Control組使用正常b. End3細胞建立體外血腦屏障模型,Epsin2-siRNA組使用Epsin2-siRNA轉(zhuǎn)染后b. End3細胞建立體外血腦屏障模型,分別于建模24、48、72 h后進行跨內(nèi)皮電阻測定,48 h辣根過氧化物酶（HRP）滲透試驗測定血腦屏障模型功能。結(jié)果:轉(zhuǎn)染后b. End3細胞Epsin2免疫熒光和Western Bolt結(jié)果均提示表達下降（P <0. 05）。隨著Epsin2的表達下降,VEGFR2表達隨之下降,ZO1、occludin表達上升（P <0. ... 

【文章來源】：神經(jīng)解剖學(xué)雜志. 2019,35(06)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
材料和方法
    1 材料
        1.1 實驗細胞
        1.2主要試劑及儀器
2 方法
    2.1 細胞培養(yǎng)
    2.2 siRNA轉(zhuǎn)染
    2.3免疫熒光染色
    2.4 Western Blot
    2.5 建立體外血腦屏障模型
    2.6 HRP通透性試驗測定BBBM通透性
    2.7 統(tǒng)計學(xué)分析
結(jié)果
    1 Epsin2-siRNA抑制b.End3細胞中Epsin2的表達
    2 Epsin2沉默對b.End3細胞中VEGFR2、ZO1和occludin的表達的影響
3 Epsin2沉默后TEER值測
    4 Epsin2沉默降低體外血腦屏障模型的HRP通透性
討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞與周細胞、星形膠質(zhì)細胞共培養(yǎng)建立體外血腦屏障模型[J]. 查雨鋒,傅曉鐘,張順,羅敏,歐瑜,董永喜,王愛民,王永林.  中國藥理學(xué)通報. 2015(05)
[2]血管內(nèi)皮生長因子受體-2所介導(dǎo)信號通路的研究進展[J]. 康從民,王大偉,呂英濤,張媛媛.  生物化學(xué)與生物物理進展. 2009(10)



本文編號：2993630