流感是由流感病毒引起的急性呼吸系統(tǒng)傳染病,嚴(yán)重危害人類(lèi)健康,接種疫苗可以預(yù)防和控制流感的感染和流行。目前流感疫苗的種類(lèi)主要有滅活疫苗、減毒活疫苗、亞單位疫苗和DNA疫苗。針對(duì)流感病毒不斷變異,特別是甲型流感病毒高度變異的情況,世界各國(guó)研究人員也在積極研制能夠應(yīng)對(duì)流感病毒變異的通用型流感疫苗。但是,在目前各種獲批的和正在研制的流感疫苗中,疫苗制劑都難以在常溫條件下儲(chǔ)存和運(yùn)輸,需要額外添加佐劑,并以注射方式接種,這是疫苗在生產(chǎn)、保存、運(yùn)輸和使用環(huán)節(jié)經(jīng)常遇到的問(wèn)題,而這些問(wèn)題的存在主要是由疫苗形式?jīng)Q定的。枯草桿菌芽孢形式的疫苗是解決上述疫苗問(wèn)題的理想選擇。枯草桿菌是一種益生菌,安全性高、遺傳背景清楚、基因操作便捷,其芽孢耐熱穩(wěn)定、口服安全、本身具有佐劑活性、能誘導(dǎo)粘膜免疫反應(yīng)。以重組枯草桿菌芽孢作為外源抗原呈遞載體,發(fā)展枯草桿菌芽孢呈遞型疫苗更能滿足疫苗在生產(chǎn)和使用上的實(shí)際需要。疫苗研究的另一關(guān)鍵問(wèn)題是抗原的選擇。由于病毒的高變異性,很大程度上影響了疫苗的廣泛免疫保護(hù)作用,因此選擇病毒的保守序列作為疫苗抗原是近幾年研究的熱點(diǎn)。流感病毒血凝素融合序列（HA-FP）和M2蛋白胞外區(qū)（M2e）在流... 

【文章來(lái)源】：軍事科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：99 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

多表位串聯(lián)序列的性狀分析

2、M2e-FP1、M2e-FP2 在原核系統(tǒng)的表達(dá)及鑒定2.1 M2e-FP1 及 M2e-FP2 重組質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定圖 1.3 多表位串聯(lián)序列蛋白三維結(jié)構(gòu)的預(yù)測(cè)分析M2e-FP1:M2e-FP1:H5N1 M2e: MSLLTEVETPTRNEWECRCSDSSDGGGGSH7N1 M2e: MSLLTEVETPTRTGWECNCSGSSEH5N1 FP: GLFGAIAGFIEGGWQGMVDGWYGYHHSNH7N1 FP: GLFGAIAGFIENGWEGLIDGWYGFRHQN圖 1.4 兩種多表位串聯(lián)序列設(shè)計(jì)模式圖

按時(shí)間點(diǎn)采集血清并利用 ELISA 檢測(cè)免疫小鼠中產(chǎn)生的抗體 IgG、IgG1及 IgG2a滴度。結(jié)果顯示（圖1.7A），與 PBS 對(duì)照組相比，M2e-FP1 及 M2e-FP2 均能誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生高滴度的特異性抗體 IgG（p<0.001），具有良好的免疫原性。為了進(jìn)一步分析抗體的亞類(lèi)，本研究檢測(cè)了免疫小鼠血清中 IgG 抗體亞類(lèi)IgG1 和 IgG2a 的滴度。結(jié)果顯示（圖 1.7B，圖 1.7C），重組蛋白免疫小鼠后血清中 IgG1、IgG2a抗體效價(jià)與 PBS 對(duì)照組相比均有顯著的升高。圖1.6 融合蛋白構(gòu)建示意圖M2e-FP1、M2e-Fp2的SDS-PAGE及WB鑒定1: 未誘導(dǎo)M2e-FP1蛋白；2: 未誘導(dǎo)M2e-FP2蛋白；3: 誘導(dǎo)后M2e-FP1蛋白；4: 誘導(dǎo)后M2e-FP2蛋白；M: BlusPlus portein Marker

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]基于甲型流感病毒血凝素莖部區(qū)的流感通用疫苗的研究進(jìn)展[J]. 譚偉,謝芝勛.  畜牧與獸醫(yī). 2015(03)
[2]Specific siRNA Downregulated TLR9 and Altered Cytokine Expression Pattern in Macrophage after CpG DNA Stimulation[J]. Bin Qiao~1 Baohua Li~1 Xiuli Yang~1 Hongyong Zhang~1 Yiwei Chu~1 Ying Wang~1 Sidong Xiong~(1,2) ~1Department of Immunology and Key Laboratory of Molecular Medicine of the Ministry of Education,Shanghai Medical College of Fudan University,Shanghai 200032,China;.  Cellular & Molecular Immunology. 2005(02)

碩士論文
[1]禽流感病毒HA2合成肽與M2e重組蛋白免疫保護(hù)作用的初步研究[D]. 何雯雯.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013



本文編號(hào)：2979520