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小鼠NLRP3基因腺病毒干擾載體的構建及功能鑒定

發(fā)布時間:2020-12-23 13:29
  目的構建針對小鼠NLRP3基因的腺病毒干擾載體(Ad-NLRP3-shRNA),并在Min6和RAW264.7細胞中驗證其基因沉默效率。方法針對小鼠NLRP3基因設計、合成3對NLRP3 shRNA 1-3干擾序列,重組至pHBAd-U6-CMV質粒載體。在HEK293T細胞內包裝Ad-NLRP3-shRNA。感染Min6和RAW264.7細胞后,采用實時定量-聚合酶鏈式反應(RTQ-PCR)檢測NLRP3基因表達。結果 Ad-NLRP3-shRNA 1-3在Min6和RAW264.7細胞的干擾效率分別達到44.38%、46.61%和82.83%以及47.23%、49.59%和78.64%。結論成功構建出Ad-NLRP3-shRNA載體,為研究NLRP3基因的功能提供有效工具。 

【文章來源】:右江民族醫(yī)學院學報. 2019年05期

【文章頁數】:4 頁

【文章目錄】:
1 資料與方法
    1.1 主要菌株和試劑
    1.2 實驗方法
        1.2.1 Ad-NLRP3-shRNA的構建
        1.2.2 Ad-NLRP3-shRNA包裝、收毒、擴增及滴度測定
        1.2.3 Ad-NLRP3-shRNA功能驗證
    1.3 統計學方法
2 結果
    2.1 NLRP3 shRNA干擾質粒鑒定
    2.2 Ad-NLRP3-shRNA包裝、收毒、擴增及滴度測定結果
    2.3 Ad-NLRP3-shRNA對Min6和RAW264.7細胞中NLRP3基因表達的影響
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
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[3]NLRP3炎癥小體與糖尿病慢性并發(fā)癥的關系及中藥干預作用[J]. 孫青,梁曉春.  中國醫(yī)學科學院學報. 2018(01)
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本文編號:2933797

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