目的:利用2型登革病毒（Dengue Virus 2 Type,DENV-2）感染的人臍靜脈內皮細胞（primary human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）與免疫細胞相互作用,并受S1P1受體特異性激動劑（CYM-5442）干預后,對細胞因子產生的影響。2、利用CYM-5442處理DENV-2感染的Balb/c小鼠,分析不同器官免疫細胞的分布特點,血清細胞因子的動態(tài)變化,探討其可能發(fā)生的免疫機制。方法:1.登革Ⅱ型病毒（DENV-2）感染HUVECs后,觀察HUVECs的超微結構;2.密度梯度離心PBMC,采用磁珠分選Treg、單核細胞,利用巨噬細胞集落刺激因子將單核細胞誘導分化為巨噬細胞。3.采用Transwell法,HUVEC分別與Treg、單核細胞、巨噬細胞共培養(yǎng),并設S1P1受體特異性激動劑干預組,檢測各組HUVECs分泌炎性細胞因子的水平,檢測各組Treg分泌抑炎性細胞因子的水平。4.皮下多點注射Balb/c小鼠,建立DENV感染模型,72h收集外周血,分離血清,接種C6/36細胞,觀察細胞病變;qPCR檢測DENV-2N... 

【文章來源】：貴州醫(yī)科大學貴州省

【文章頁數(shù)】：102 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１?．?ＨＵＶＥＣｓ的細胞形態(tài)（丨０〇ｘ?）??Ｆｉｇ．?１?Ｃｅｌｌｕｌａｒ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ＨＵＶＥＣｓ?（１０〇ｘ）??

△?＾?Ｖ�！瑁В桑樱�??—?０ｍ：－，，－?■?■??－２感染Ｃ６／３６細胞后第５天病變細胞出現(xiàn)融合，空泡及拉絲狀ｔｏｐａｔｈｉｃ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?Ｃ６／３６?ｃｅｌｌ?ｗｉｔｈ?ＤＥＮＶ－２?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｏｎ?５ｔｈ?ｄａｙ?（ｘ對照組，Ｂ－Ｄ依次為ＤＥＮＶ２感染第３、５、７天的細胞病變??和ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＤ１２７＋Ｔｒｅｇ、單核細胞、巨噬細胞表面分胞儀測定ＨＵＶＥＣｓ表面ＣＤ３１的表達（９９．９２％），達到、?ＣＤ３１?＇ｔｉ??

?貴州醫(yī)科大學２０１８屆科學學位博上研究生學位論義???２．３．２免疫組化法檢測Ｖ１Ｄ因子相關抗原??ＨＵＶＥＣ的ＶＨＩ因子相關抗原在免疫組化法染色后，與ＢＨＫ細胞和空白對照??相比，細胞包漿內可見明顯的棕黃色顆粒，證實為內皮細胞（圖４）。??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]DENV-2感染的HUVECs與CD4+T細胞相互作用對炎性細胞因子產生的影響[J]. 張妮,左麗,王克,袁靜.  中國免疫學雜志. 2017(06)
[2]Progress towards understanding the pathogenesis of dengue hemorrhagic fever[J]. Xiaojing Pang,Rudian Zhang,Gong Cheng.  Virologica Sinica. 2017(01)
[3]Protective effects of paeoniflorin and albiflorin on chemotherapy-induced myelosuppression in mice[J]. ZHU Ying-Li,WANG Lin-Yuan,WANG Jing-Xia,WANG Chun,WANG Cheng-Long,ZHAO Dan-Ping,WANG Zi-Chen,ZHANG Jian-Jun.  Chinese Journal of Natural Medicines. 2016(08)
[4]PAIgG and PAIgM levels in secondary dengue virus infections lead to thrombocytopenia in patients from KP, Pakistan[J]. Ibrar Alam,Said Hassan,Iftikhar Alam,Rahmat Gul,Farhad Ali,Ijaz Ali,Sana Ullah,Imtiaz Ali Khan,Aasif Awan.  Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine. 2015 (10)
[5]Isolation and characterization of dengue virus serotype 2 from the large dengue outbreak in Guangdong, China in 2014[J]. ZHAO Hui,ZHAO Ling Zhai,JIANG Tao,LI Xiao Feng,FAN Hang,HONG Wen Xin,ZHANG Yu,ZHU Qin,YE Qing,TONG Yi Gang,CAO Wu Chun,ZHANG Fu Chun,QIN Cheng Feng.  Science China(Life Sciences). 2014(12)



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