目的:利用2型登革病毒（Dengue Virus 2 Type,DENV-2）感染的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（primary human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）與免疫細(xì)胞相互作用,并受S1P1受體特異性激動(dòng)劑（CYM-5442）干預(yù)后,對(duì)細(xì)胞因子產(chǎn)生的影響。2、利用CYM-5442處理DENV-2感染的Balb/c小鼠,分析不同器官免疫細(xì)胞的分布特點(diǎn),血清細(xì)胞因子的動(dòng)態(tài)變化,探討其可能發(fā)生的免疫機(jī)制。方法:1.登革Ⅱ型病毒（DENV-2）感染HUVECs后,觀察HUVECs的超微結(jié)構(gòu);2.密度梯度離心PBMC,采用磁珠分選Treg、單核細(xì)胞,利用巨噬細(xì)胞集落刺激因子將單核細(xì)胞誘導(dǎo)分化為巨噬細(xì)胞。3.采用Transwell法,HUVEC分別與Treg、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞共培養(yǎng),并設(shè)S1P1受體特異性激動(dòng)劑干預(yù)組,檢測(cè)各組HUVECs分泌炎性細(xì)胞因子的水平,檢測(cè)各組Treg分泌抑炎性細(xì)胞因子的水平。4.皮下多點(diǎn)注射Balb/c小鼠,建立DENV感染模型,72h收集外周血,分離血清,接種C6/36細(xì)胞,觀察細(xì)胞病變;qPCR檢測(cè)DENV-2N... 

【文章來(lái)源】：貴州醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁(yè)數(shù)】：102 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１?．?ＨＵＶＥＣｓ的細(xì)胞形態(tài)（丨０〇ｘ?）??Ｆｉｇ．?１?Ｃｅｌｌｕｌａｒ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ＨＵＶＥＣｓ?（１０〇ｘ）??

△?＾?Ｖ�！瑁В桑樱�??—?０ｍ：－，，－?■?■??－２感染Ｃ６／３６細(xì)胞后第５天病變細(xì)胞出現(xiàn)融合，空泡及拉絲狀ｔｏｐａｔｈｉｃ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?Ｃ６／３６?ｃｅｌｌ?ｗｉｔｈ?ＤＥＮＶ－２?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｏｎ?５ｔｈ?ｄａｙ?（ｘ對(duì)照組，Ｂ－Ｄ依次為ＤＥＮＶ２感染第３、５、７天的細(xì)胞病變??和ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＤ１２７＋Ｔｒｅｇ、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞表面分胞儀測(cè)定ＨＵＶＥＣｓ表面ＣＤ３１的表達(dá)（９９．９２％），達(dá)到、?ＣＤ３１?＇ｔｉ??

?貴州醫(yī)科大學(xué)２０１８屆科學(xué)學(xué)位博上研究生學(xué)位論義???２．３．２免疫組化法檢測(cè)Ｖ１Ｄ因子相關(guān)抗原??ＨＵＶＥＣ的ＶＨＩ因子相關(guān)抗原在免疫組化法染色后，與ＢＨＫ細(xì)胞和空白對(duì)照??相比，細(xì)胞包漿內(nèi)可見(jiàn)明顯的棕黃色顆粒，證實(shí)為內(nèi)皮細(xì)胞（圖４）。??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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