研究目的:探究彌可保對(duì)缺氧狀態(tài)下神經(jīng)干細(xì)胞存活、增殖、凋亡、分化的影響,并探討其作用機(jī)制,以找到一種新生兒缺血缺氧性腦病的治療或輔助治療藥物。研究方法:利用原代神經(jīng)干細(xì)胞,對(duì)其進(jìn)行缺氧處理,缺氧條件為90%N2,5%C02,5%空氣。通過MTT法檢測(cè)藥物對(duì)于神經(jīng)干細(xì)胞活性的影響,并探究在缺氧狀態(tài)下彌可保對(duì)于神經(jīng)干細(xì)胞活性是否具有挽救作用。通過EdU試劑染色,在熒光顯微鏡下觀察神經(jīng)干細(xì)胞在缺氧時(shí)增殖能力的變化,同時(shí)利用實(shí)時(shí)定量qPCR檢測(cè)干性基因Sox2的mRNA在處理前后變化的水平,在蛋白分子水平上利用蛋白印記法觀察干性基因Sox2在處理前后的水平的變化。通過免疫熒光進(jìn)行cleaved-caspase3的染色,檢測(cè)凋亡比率變化。神經(jīng)干細(xì)胞本身具有獨(dú)特的干細(xì)胞特性,然而對(duì)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)來(lái)說(shuō),神經(jīng)干細(xì)胞的主要功能是維持自身數(shù)量的穩(wěn)定以及保持神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目的穩(wěn)態(tài),通過利用免疫熒光標(biāo)記神經(jīng)元的標(biāo)記與星形膠質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)記,以確定這兩種成熟細(xì)胞在細(xì)胞總數(shù)中比率的變化情況,蛋白印記法檢測(cè)Tuj1與GFAP在蛋白水平的變化以確認(rèn)現(xiàn)象,同時(shí)運(yùn)用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)其Tuj1上游包括ngn1,Neu... 

【文章來(lái)源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１不同濃度彌可保對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞活性的影響??

圖２彌可保對(duì)缺氧狀態(tài)下神經(jīng)干細(xì)胞活性的影響??

圖３彌可保對(duì)缺氧狀態(tài)下神經(jīng)干細(xì)胞凋亡的影響??


本文編號(hào)：2922797