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MicroRNA-31在體外負調(diào)控白細胞介素-34表達

發(fā)布時間:2020-12-17 02:50
  研究背景及目的白細胞介素-34(Interleukin-34,IL-34)是近年來新發(fā)現(xiàn)的白介素家族成員,它有兩個受體,CSF-1R和RPTP-ζ。IL-34與多種疾病的炎性反應和免疫反應有關。IL-34由多種細胞產(chǎn)生,并在人體多種組織中表達。目前,已知IL-34具有多種生物學功能,例如,增強單核細胞活力、加速破骨細胞形成等。Micro RNA-31(mi R-31)是一個重要的基因調(diào)節(jié)分子,參與腫瘤細胞的增殖分化、遷移和轉(zhuǎn)移等過程。通過Target Scan和Mi Randa軟件,我們預測IL-34基因的3’端非編碼區(qū)(UTR)中存在mi R-31的結合位點。我們假設mi R-31可能在調(diào)控IL-34的表達中發(fā)揮重要作用。首先,我們檢測了IL-34和mi R-31在多種細胞系中的表達水平。接著我們研究mi R-31是否可以結合到IL-34基因的3’UTR,以及mi R-31對IL-34表達的調(diào)控作用,以闡明mi R-31是否調(diào)控IL-34基因表達。方法1.利用Western blotting方法檢測在多種細胞(Hep G2,GES-1,SGC-7901,HGC-27,MGC-803,... 

【文章來源】:安徽醫(yī)科大學安徽省

【文章頁數(shù)】:73 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
中英文縮略詞表
摘要
abstract
1.引言
2.實驗假設及流程
    2.1 實驗假設:推測miR-31可以與IL-343’UTR結合并調(diào)控IL-34的表達
    2.2 實驗流程
3.實驗材料
    3.1 細胞系
    3.2 表達載體和RNAi
    3.3 主要試劑
    3.4 主要溶液的配制
    3.5 主要儀器和設備
4.實驗方法
    4.1 細胞培養(yǎng)
    4.2 WesternBlot
    4.3 qRT-PCR
    4.4 分子克隆
    4.5 共轉(zhuǎn)染和Dual-LuciferaseReporterAssaySystem
    4.6 RIP(RNA結合蛋白免疫共沉淀)
    4.7 數(shù)據(jù)處理
5.結果
    5.1 在不同的細胞系中IL-34有不同的表達
    5.2 miR-31在不同細胞系中的表達水平
    5.3 MiR-31可以直接作用于IL-34mRNA3'UTR
    5.4 miR-31調(diào)控IL-34的表達
6.討論
7.結論
8.參考文獻
附錄
致謝
綜述
    參考文獻


【參考文獻】:
期刊論文
[1]miR-203真核表達載體的構建和重組慢病毒的制備及其對人臍靜脈內(nèi)皮細胞增殖和遷移的影響[J]. 朱華宇,張翔,張曉,張瑞,楊安鋼.  細胞與分子免疫學雜志. 2013(06)
[2]miRNA在肝細胞癌中的研究進展[J]. 張志成,肖影群.  中國誤診學雜志. 2011(32)
[3]miR-34a調(diào)控內(nèi)皮祖細胞介導的血管新生[J]. 黎健.  中國動脈硬化雜志. 2011(03)



本文編號:2921273

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