研究背景急性移植排斥是導致移植器官或組織功能喪失及衰竭的主要原因之一。急性排斥反應(yīng)主要是以T細胞介導的細胞免疫為主。作為對外周T細胞分化發(fā)育以及功能都很重要的Notch信號途徑,具有潛在的調(diào)節(jié)急性移植排斥反應(yīng)的可能。但是其再同種異基因免疫應(yīng)答中的作用,目前還不甚清楚。方法及結(jié)果:通過應(yīng)用同種異基因移植模型,即皮片移植和異位頸部心臟移植,以及T細胞中特異性RBP-J缺失小鼠,本實驗研究了Notch/ RBP-J通路在體內(nèi)同種異基因應(yīng)答中的作用。同野生型C57BL/6小鼠相比,T細胞中特異性剔除轉(zhuǎn)錄因子RBP-J的轉(zhuǎn)基因小鼠所表現(xiàn)出的急性排斥反應(yīng)明顯加劇,其移植物存活時間及存活率也相對降低。移植物存活的降低與RBP-J缺失的轉(zhuǎn)基因小鼠受體中抗原特異性T細胞增殖的增強,以及輔助性Th1、Th2、Th17細胞數(shù)目的增多有關(guān)。此外,雖然條件性基因剔除小鼠受體中CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺調(diào)節(jié)性T細胞的比率未發(fā)生明顯變化,但是在體外實驗中,其抑制效應(yīng)性T細胞（Teff）免疫應(yīng)答的作用有一定減弱。結(jié)論:這些研究結(jié)果,提示Notch/... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻回顧
    T細胞和移植排斥反應(yīng)
    Notch 信號途徑
    Notch 對造血干細胞發(fā)育和維持內(nèi)穩(wěn)態(tài)作用
    Notch與T細胞發(fā)育
    Notch對外周T細胞的分化和功能的影響
    Notch信號與Th1細胞
    Notch與Th2細胞
    Notch信號和Th17細胞以及調(diào)節(jié)性T細胞
    小結(jié)
實驗一 在同種異體移植免疫中外周T細胞NOTCH信號分析
    1 材料
        1.1 實驗動物
        1.2 試劑
        1.3 主要儀器
        1.4.Real-time PCR引物
    2 方法
        2.1 實驗分組
        2.2 皮片移·植
        2.3 分離受體小鼠脾臟T 淋巴細胞
        2.4 Q-PCR 檢測Notch 信號上下游分子
    3 結(jié)果
    4 討論
實驗二 RBP-J 條件性基因小鼠的培育鑒定及其外周淋巴細胞分析
    A. 材料
        1.1 實驗動物
        1.2 試劑
        1.3 儀器
        1.4 引物
    2. 方法
        2.1 培育并鑒定小鼠基因型
        2.2 外周淋巴細胞分析
    3. 結(jié)果
        3.1 小鼠基因型鑒定結(jié)果
        3.2 外周淋巴細胞分析
    4. 討論
實驗三 受體條件性阻斷T 細胞NOTCH 信號對移植物及T 淋巴細·胞
    1. 材料
        1.1 實驗動物
        1.2 試劑
        1.3 儀器
    2. 方法
        2.1 實驗分組
        2.2 皮片移植
        2.3 心臟移植
        2.4 受體外周T 淋巴細胞亞群增殖的檢測
        2.5 外周血液中Th 細胞亞群動態(tài)監(jiān)測
        2.6 脾臟及淋巴T 細胞分析
        2.7 胞內(nèi)細胞因子染色
        2.8 HE 染色
    3. 結(jié)果
        3.1 存活時間
        3.2 移植物病理切片HE 染色
        3.3 脾臟和引流淋巴結(jié)細胞分析
        3.4 BrdU檢測細胞增殖情況
        3.5 輔助性T 細胞（Th）檢測
    4. 討論
實驗四 體外混合淋巴細胞培養(yǎng)分析NOTCH 信號對T 細胞增殖及TREG 功能影響
    1. 材料
        1.1 實驗動物
        1.2 試劑
        1.3 儀器
    2. 方法
        2.1 混合淋巴細胞培養(yǎng)（MLR）
            2.1.1 stimulator 細胞制備
            2.1.2 效應(yīng)T 細胞獲取
            2.1.3 調(diào)節(jié)性T 細胞分離
            2.1.4 效應(yīng)性T細胞CFSE標記
            2.1.5 混合淋巴細胞培養(yǎng)
        2.2 體外增殖實驗
    3. 結(jié)果
        3.1 Tregs 的抑制功能實驗
        3.2 Teff 的增殖實驗
    4. 討論
小結(jié)
展望
參考文獻
附錄
個人簡歷和研究成果
致謝



本文編號：2912021