煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（Nicotinamide adenine dinucleotide, NAD）是生命體內(nèi)200多種氧化還原反應(yīng)的輔酶,在很多細(xì)胞生理過程中如Ca2+動員、基因穩(wěn)定、凋亡、代謝、應(yīng)激、老化等起著至關(guān)重要的作用。Nampt是哺乳動物NAD合成途徑的限速酶,調(diào)節(jié)著細(xì)胞內(nèi)總的NAD水平和線粒體中的NAD水平。此外,Nampt通過控制NAD的合成維持細(xì)胞的能量供應(yīng),對細(xì)胞生存起到了關(guān)鍵性作用。大量研究表明,Nampt在促進細(xì)胞分化成熟、參與機體免疫反應(yīng)和炎癥應(yīng)答、抗細(xì)胞凋亡等方面有諸多有益的生理功能,在心腦血管疾病、糖尿病、自身免疫性疾病中有潛在保護作用。在癌癥中,腫瘤細(xì)胞為了快速增殖,對細(xì)胞內(nèi)NAD水平的依賴比正常細(xì)胞更強。研究表明Nampt有促血管生成活性,支持著一些腫瘤細(xì)胞的生長,抑制Nampt酶活性可起到很好抗腫瘤作用。這使得Nampt成為近年來藥物研究中一個非常有吸引力的靶標(biāo)。特別是2005年新發(fā)現(xiàn)的脂肪細(xì)胞因子visfatin具有Nampt的酶活性,使得visfatin/Nampt成為全世界生物學(xué)功能研究的熱點分子。目前有研究報道的Nampt抑制劑只有4個,尚無... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
英文縮略詞表
第一節(jié) 前言
第二節(jié) 總體實驗設(shè)計
第三節(jié) 實驗材料與方法
    一、Nampt 重組蛋白的表達(dá)、純化
    二、以Nampt 為靶標(biāo)的活性化合物篩選
    三、細(xì)胞水平驗證化合物活性
第四節(jié) 實驗結(jié)果
    一、Nampt 重組蛋白的表達(dá)、純化
    二、以Nampt 為靶標(biāo)的活性化合物篩選
        （一） 化合物初篩
        （二） 信噪比的計算統(tǒng)計
        （三） 變異系數(shù)的計算統(tǒng)計
        （四） Z′因子的計算統(tǒng)計
        （五） 化合物復(fù)篩
    三、化合物酶水平半數(shù)有效濃度EC50值測定
        （一） 化合物酶水平半數(shù)有效濃度EC50值測定預(yù)實驗
        （二） 化合物酶水平半數(shù)抑制濃度IC50值測定
    四、細(xì)胞水平上驗證化合物活性
        （一） 細(xì)胞內(nèi)NAD 水平測定
        （二） 化合物細(xì)胞水平半數(shù)抑制濃度IC50值測定
        （三） 化合物細(xì)胞毒性
第五節(jié) 討論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表文章、獲獎情況及參加工作情況
致謝



本文編號：2911457