研究目的全世界大約有3.5億人攜帶乙肝病毒,乙肝病毒不僅引起急性和慢性肝炎,也是肝硬化和肝細(xì)胞癌主要的原因之一。在感染乙肝病毒后,約有十分之一的患者會(huì)發(fā)展成慢性感染,病毒的持續(xù)性復(fù)制逐漸造成肝細(xì)胞的損傷甚至壞死,并有可能進(jìn)一步發(fā)展成肝硬化和肝癌。據(jù)估計(jì),每年約有一百萬人因患乙型肝炎病毒導(dǎo)致的嚴(yán)重的肝臟疾病而死亡,慢性乙肝病毒感染對(duì)人類的健康產(chǎn)生嚴(yán)重影響。目前為止,干擾素和核苷類似物是乙肝病毒陽(yáng)性患者的的主要治療物,但它們不能清除所感染細(xì)胞的核內(nèi)HBV基因組共價(jià)閉合環(huán)狀DNA。另外,使用這些抗病毒藥物長(zhǎng)期治療也可能存在抗藥性變異和副作用等缺點(diǎn)。因此,研究HBV復(fù)制和表達(dá)的相關(guān)分子機(jī)制及治療途徑具有重要意義。本研究初步探究ADAR1基因通過對(duì)機(jī)體基因進(jìn)行RNA編輯,影響下游基因及病毒的表達(dá)從而對(duì)乙肝病毒的復(fù)制發(fā)揮影響。研究方法前期研究基于RNA-Seq等實(shí)驗(yàn)方法篩查出生育酚轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-α（TTPA）和鋅指蛋白655（ZNF655）基因的3’UTR可能存在ADAR1介導(dǎo)的A-to-G編輯位點(diǎn),通過PCR擴(kuò)增和測(cè)序分析進(jìn)行驗(yàn)證;構(gòu)建TTPA和ZNF655基因3’UTR等位基因雙熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒,... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖４－１－１．?ＴＴＰＡ及ＺＮＦ６５５基因３’?ＵＴＲ上的編輯位點(diǎn)區(qū)域測(cè)序結(jié)果??圖Ａ和圖Ｂ分別為將包含ＴＴＰＡ基因和ＺＮＦ６５５基因編輯位點(diǎn)的３’?ＵＴＲ區(qū)域片段擴(kuò)增后??

酶活性顯著升高（ｉ５?＜０．００１），在Ｈｅｐ３Ｂ細(xì)胞中進(jìn)行相同實(shí)驗(yàn)，得到一致的結(jié)論??（Ｐ?＜０．?０１），說明ＡＤＡＲｌ通過對(duì)ＺＮＦ６５５基因３’?ＵＴＲ位點(diǎn)進(jìn)行ＲＮＡ編輯后促進(jìn)??了?ＺＮＦ６５５的表達(dá)。如

-3ADARl對(duì)TTPA穩(wěn)點(diǎn)性影響檢測(cè)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Molecular mechanism of hepatitis B virus-induced hepatocarcinogenesis[J]. Mirko Tarocchi,Simone Polvani,Giada Marroncini,Andrea Galli.  World Journal of Gastroenterology. 2014(33)
[2]鋅指蛋白結(jié)構(gòu)及功能研究進(jìn)展[J]. 趙楠,趙飛,李玉花.  生物技術(shù)通訊. 2009(01)



本文編號(hào)：2897874