背景在肥胖和2型糖尿病等代謝性疾病中,糖、脂代謝發(fā)生紊亂,在肝臟、脂肪和骨骼肌等組織中會出現(xiàn)糖酵解和脂質(zhì)合成異常。脂肪和肝臟是人重要的代謝器官,是機體代謝平衡的重要組成部分。代謝性疾病可以引起肝組織損傷,肝代償性修復異常調(diào)節(jié)后導致肝纖維化（liver fibrosis）。哺乳動物Sirtuin家族中的一個重要成員,Sirtuin6（SIRT6）,參與調(diào)控了包括代謝,炎癥、衰老等許多重要生理功能。它在脂肪組織代謝平衡和肝臟疾病發(fā)生發(fā)展過程中的作用還不是很清楚。目的本研究擬使用廣泛應用于基因敲出的Cre-loxp系統(tǒng)建立兩種SIRT6基因在脂肪細胞中敲除的小鼠模型,研究SIRT6在脂肪細胞中的功能;利用肝星狀細胞的細胞系-LX2細胞以及SIRT6過表達（全身性）的轉(zhuǎn)基因小鼠（TgSIRT6）為研究對象,研究SIRT6在肝星狀細胞中的的作用。方法1.研究SIRT6在脂肪細胞中的作用（1）利用正常飼料和60%高脂飼料喂養(yǎng)野生型小鼠（wild-type,WT）,建立肥胖小鼠模型,通過Western blot檢測SIRT6在脂肪組織中的表達。（2）利用SIRT6 floxed(Sirt6^... 

【文章來源】：新鄉(xiāng)醫(yī)學院河南省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

SIRT6FKO小鼠和對照小鼠BAT組織中，UCP1，PGC1α和PPARγ熱基因的表達（n=3只/組）

42理 LX2 細胞降低 SIRT6 的表達。（A）10ng/mL 的 TGFβ1 處理 LX2 mRNA 水平；（B）10ng/mL 的 TGFβ1 處理 LX2 細胞 24 h，Wester表達以及 H3K9，H3K56 的乙酰基化水平。數(shù)據(jù)表示均數(shù)±平均標準誤 Western blotting 檢測腺病毒 SIRT6 和腺病毒 shSIRT6 在 L（knockdown）SIRT6 的效率和 Western blotting 結(jié)果顯示（圖 2-1，A 和 B）：腺病毒 SIRT

SIRT6 的敲低都導致纖維化相關基因的表達上升（圖2-2，B）。圖 2-2：LX2 細胞中 SIRT6 對纖維化相關基因的調(diào)控。（A）SIRT6 和對照 GFP 的腺病毒感染 LX2細胞 24 h 后，不使用或者使用 10ng/mL 的 TGFβ1 再誘導 24 h，纖維化相關基因的表達；（B）shSIRT6 和對照 shGFP 的腺病毒感染 LX2 細胞 24 h 后，不使用或者使用 10ng/mL 的 TGFβ1 再誘導 24 h，纖維化相關基因的表達。數(shù)據(jù)表示均數(shù)±平均標準誤差（S.E.M）。*P< 0.05。AB

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Cellular and molecular mechanisms in the pathogenesis of liver fibrosis:An update[J]. Gülsüm ?zlem Elpek.  World Journal of Gastroenterology. 2014(23)



本文編號：2896304