目的檢測腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)mRNA和蛋白在慢性不可預(yù)知應(yīng)激(CUS)小鼠中縫背核腦區(qū)的表達(dá)情況。方法將20只C57小鼠隨機(jī)分為對照組(Control,n=10)和CUS組(n=10)兩組,CUS組給予21 d應(yīng)激,對照組每天抓取1次。分別采用糖水偏好實(shí)驗(yàn)(SPT)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)(FST)對2組小鼠進(jìn)行抑郁樣行為檢測;免疫熒光雙標(biāo)法檢測小鼠中縫背核腦區(qū)5-羥色胺(5-HT)神經(jīng)元和BDNF蛋白的共定位;采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Q-PCR)和Western blot方法檢測小鼠中縫背核腦區(qū)組織中總BDNF mRNA、BDNF外顯子(Exons) mRNA及蛋白表達(dá)水平,并進(jìn)行CUS所致小鼠抑郁樣行為與總BDNF mRNA之間的相關(guān)性分析。結(jié)果 CUS能導(dǎo)致小鼠糖水偏好值明顯降低(P0.05),強(qiáng)迫游泳不動時(shí)間明顯增加(P0.05)。BDNF與中縫背核5-HT神經(jīng)元存在共定位。CUS能導(dǎo)致小鼠中縫背核腦區(qū)總BDNF mRNA和蛋白表達(dá)量顯著降低(P0.05)。相關(guān)性分析結(jié)果顯示CUS組小鼠糖水偏好值與總BDNF mRNA存在顯著正相關(guān)性(P0.05);CUS組小鼠FST不動時(shí)間與總BDNF mRNA存在顯著負(fù)相關(guān)性(P0.05)。BDNF Exons mRNA檢測結(jié)果顯示CUS能導(dǎo)致小鼠中縫背核腦區(qū)BDNF Exon IV(P0.05)和VI(P0.05)mRNA表達(dá)降低,而Exon I(P0.05)和Exon II mRNA(P0.05)表達(dá)則沒有顯著變化。結(jié)論 CUS能誘導(dǎo)產(chǎn)生抑郁樣行為,并能導(dǎo)致中縫背核腦區(qū)5-HT神經(jīng)元中BDNF表達(dá)的降低。
【部分圖文】：

CUS組和對照組小鼠糖水偏好和強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)結(jié)果

與Control組比較,CUS組BDNF Exon I mRNA表達(dá)量沒有顯著變化(t=0.509,P>0.05),見圖5A; Exon II mRNA表達(dá)量沒有顯著變化(t=0.916,P>0.05),見圖5B; Exon IV mRNA表達(dá)量明顯降低(t=2.798,P<0.05);Exon VI mRNA表達(dá)量明顯降低(t=2.419,P<0.05)。Shapiro-Wilk檢驗(yàn)各組數(shù)據(jù)均符合正態(tài)分布(P>0.05)。圖3 CUS組和對照組小鼠中縫背核BDNF mRNA和蛋白表達(dá)水平

CUS組和對照組小鼠中縫背核BDNF mRNA和蛋白表達(dá)水平
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