發(fā)布時間：2020-11-07 07:47

　　 目的:在研究皮膚疾病如銀屑病、皮膚腫瘤、傷口愈合及皮膚遺傳病時,常通過構建小鼠疾病模型,如銀屑病小鼠、小鼠鱗癌模型等進行研究。然而小鼠和人之間遺傳背景差別較大,這些模型并不能很好地代表皮膚疾病的發(fā)生、發(fā)展等過程。本研究探討如何構建較成功的人皮膚異種移植及基因導入的小鼠模型,以期為人類皮膚疾病如皮膚腫瘤、傷口愈合、皮膚遺傳病等提供人源化的小鼠研究模型。方法:1收集的新生小黑鼠的皮膚將其依次浸沒于10%的消毒水,75%的乙醇及無菌的生理鹽水中進行處理,用眼科剪和組織鑷進行修剪呈約大小為1-1.5cm(盡量去掉脂肪),使真皮側平鋪并緊貼于培養(yǎng)皿蓋內側,腹腔注射濃度為4ul/g的水合氯醛麻醉裸鼠,用眼科剪在小鼠兩側腰部制造全層皮膚缺損創(chuàng)面約為1.5㎝×1㎝大小的傷口(即移植床),將新生小鼠的皮膚移于移植床中,并用繃帶包扎,約第14天后將開繃帶。2若裸鼠移植同種異基因移植的皮膚存活較好,說明該模型構建成功,則把人的包皮依次浸沒于10%的消毒水,75%的乙醇及無菌的生理鹽水中進行處理,用眼科剪和組織鑷進行修剪呈約大小為1-1.5cm(盡量去掉脂肪),使真皮側平鋪并緊貼于培養(yǎng)皿蓋內側,腹腔注射濃度為4ul/g的水合氯醛麻醉裸鼠及NOD-scid小鼠,用眼科剪在小鼠兩側腰部制造全層皮膚缺損創(chuàng)面約為1.5㎝×1㎝大小的傷口(即移植床),將新生小鼠的皮膚移于移植床中,并用繃帶包扎,約第14天后將開繃帶。3若人的包皮存活較成功,大約第3周時通過皮內注射帶有報告蛋白(GFP)的病毒的方式,建立人皮膚異種移植及基因導入模型。結果:2周后可觀察到1移植于裸鼠腰部的新生黑鼠的皮膚存活較好,毛發(fā)稠密,部分區(qū)域可見色素脫失見,該結果表明同種異基因模型構建較成功,為構建人皮膚異種移植小鼠模型提供了有力的依據。2移植于裸鼠的人的包皮存活較差,呈暗紅色,可見收縮及脫落現(xiàn)象3移植于裸鼠的包皮在NOD-scid小鼠腰部可以看到皮片成活較好,具有正常的皮膚組織結構,并在移植的包皮中檢測到報告蛋白(GFP)。結論:移植于裸鼠和NOD-scid小鼠后的人皮膚都保留了正常的組織結構,而移植于NOD-scid小鼠的皮瓣存活更好,并能夠感染上帶有報告蛋白的病毒,這為皮膚腫瘤、傷口愈合、皮膚遺傳病等提供了較好的研究模型。
【學位單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R-332;R622.1
【部分圖文】：

17圖 7 移植后第 4 周可見人的皮膚成功移植到 NOD-scid 小鼠上，并成功感染上病毒（紅光代表的時 involcrin，它是一種由人角質細胞合成的蛋白，對角質細胞具有保護作用，分布在細胞質，可通過谷氨酰胺酶的作用，分泌到細胞外。）

圖 3 圖 4 4X10圖 3 移植后第 3 周，皮膚存活尚可，呈暗紅色，部分區(qū)域可見收縮及脫落現(xiàn)象圖 4 移植后第 3 周，圖片左側棘層較薄，真皮內見大量毛囊結構，交界處表皮完好，未見壞死，右側棘層較厚，真皮未見毛囊結構3 皮膚異種移植的 NOD-scid 小鼠模型的構建移植后第 3 周可見移植于 NOD-scid 小鼠的人的包皮存活較好，色澤鮮艷，未見明顯收縮及脫落現(xiàn)象（如圖 5）。病理結果可見視野左側棘層較厚，真皮未見毛囊結構，交界處表皮完好，未見壞死，圖片右側棘層較薄，真皮內見大量毛囊結構（如圖 6）。
【參考文獻】

相關期刊論文 前2條

1 叢文銘;;肝移植術后抗體介導性排異的病理診斷[J];實用器官移植電子雜志;2014年02期

2 李振宇,徐開林,潘秀英,鹿群先,何徐彭,孫海英,主鴻鵠;HIV-1慢病毒載體的構建及結構改造[J];中華血液學雜志;2004年09期

本文編號：2873654