采用紙片擴散法(K-B法)測定鮑曼不動桿菌(AB)菌株對臨床常用9大類22種抗生素的耐藥性,應用PCR檢測耐藥基因,將耐藥基因adeB轉化至敏感菌株AB43中,熒光定量PCR檢測AdeB mRNA的轉錄,藥敏試驗檢測轉化后菌株的耐藥性變化。結果表明:收集的68株AB對亞胺培南和美羅培南耐藥率分別高達51.47%和50.00%。耐藥基因adeR、adeS、adeA、adeB、adeC、OXA-23、OXA-51、TEM-1、VIM-1在碳青霉烯類耐藥、中介及敏感株中的分布差異不大;adeB基因在耐藥株和敏感株中的序列存在較大差異,二者同源區(qū)也存在3個氨基酸殘基的變異;耐藥菌株來源的adeB基因在敏感菌株中表達后可導致AB的耐藥性顯著增強。這一研究提示AdeB基因變異可導致AB多藥耐藥性顯著增加。
【部分圖文】：

2.1 AB耐藥菌株中存在多種耐藥基因將68株AB進行耐藥基因的PCR篩查, 圖1為 AB1菌株的篩查結果, 其余菌株擴增結果略。68株AB中篩查到adeR基因的有62株, adeS有1株, adeA有58株, adeB有63株, adeC有60株, TEM-1有41株, OXA-23有61株, OXA-51有65株, VIM-1沒有發(fā)現(xiàn)。

2.4 RadeB導致AB的多藥耐藥將RadeB和SadeB分別與原核表達載體pET-GFP連接, 并將重組載體分別轉入敏感株AB43中。熒光定量PCR檢測AB43、AB43∷SadeB、AB24和AB43∷RadeB菌株中adeB轉錄的mRNA(圖2)。AB43∷SadeB重組株與AB43野生株相比, SadeB基因mRNA轉錄量明顯升高,差異極顯著(P=0.000 5<0.001)。而AB43∷RadeB重組株與RadeB來源的AB24野生株相比, RadeB基因mRNA轉錄量基本不變(P=0.21>0.05)。但9大類22種臨床常用抗生素的藥敏試驗結果(表3)表明, 與敏感的野生株AB43相比, AB43∷SadeB重組株仍然敏感, 而AB43∷RadeB重組株卻變異為對除米諾環(huán)素、氨芐西林/舒巴坦、多黏菌素B、加替沙星外的18種抗生素均耐藥。
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