采用紙片擴(kuò)散法(K-B法)測(cè)定鮑曼不動(dòng)桿菌(AB)菌株對(duì)臨床常用9大類22種抗生素的耐藥性,應(yīng)用PCR檢測(cè)耐藥基因,將耐藥基因adeB轉(zhuǎn)化至敏感菌株AB43中,熒光定量PCR檢測(cè)AdeB mRNA的轉(zhuǎn)錄,藥敏試驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)化后菌株的耐藥性變化。結(jié)果表明:收集的68株AB對(duì)亞胺培南和美羅培南耐藥率分別高達(dá)51.47%和50.00%。耐藥基因adeR、adeS、adeA、adeB、adeC、OXA-23、OXA-51、TEM-1、VIM-1在碳青霉烯類耐藥、中介及敏感株中的分布差異不大;adeB基因在耐藥株和敏感株中的序列存在較大差異,二者同源區(qū)也存在3個(gè)氨基酸殘基的變異;耐藥菌株來(lái)源的adeB基因在敏感菌株中表達(dá)后可導(dǎo)致AB的耐藥性顯著增強(qiáng)。這一研究提示AdeB基因變異可導(dǎo)致AB多藥耐藥性顯著增加。
【部分圖文】：

2.1 AB耐藥菌株中存在多種耐藥基因?qū)?8株AB進(jìn)行耐藥基因的PCR篩查, 圖1為 AB1菌株的篩查結(jié)果, 其余菌株擴(kuò)增結(jié)果略。68株AB中篩查到adeR基因的有62株, adeS有1株, adeA有58株, adeB有63株, adeC有60株, TEM-1有41株, OXA-23有61株, OXA-51有65株, VIM-1沒(méi)有發(fā)現(xiàn)。

2.4 RadeB導(dǎo)致AB的多藥耐藥將RadeB和SadeB分別與原核表達(dá)載體pET-GFP連接, 并將重組載體分別轉(zhuǎn)入敏感株AB43中。熒光定量PCR檢測(cè)AB43、AB43∷SadeB、AB24和AB43∷RadeB菌株中adeB轉(zhuǎn)錄的mRNA(圖2)。AB43∷SadeB重組株與AB43野生株相比, SadeB基因mRNA轉(zhuǎn)錄量明顯升高,差異極顯著(P=0.000 5<0.001)。而AB43∷RadeB重組株與RadeB來(lái)源的AB24野生株相比, RadeB基因mRNA轉(zhuǎn)錄量基本不變(P=0.21>0.05)。但9大類22種臨床常用抗生素的藥敏試驗(yàn)結(jié)果(表3)表明, 與敏感的野生株AB43相比, AB43∷SadeB重組株仍然敏感, 而AB43∷RadeB重組株卻變異為對(duì)除米諾環(huán)素、氨芐西林/舒巴坦、多黏菌素B、加替沙星外的18種抗生素均耐藥。
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2 李方去;楊愛(ài)平;蔣偉燕;劉洋;王金文;楊錦紅;李向陽(yáng);;外排泵adeB基因高表達(dá)在鮑氏不動(dòng)桿菌臨床分離株產(chǎn)生泛耐藥中的作用[J];中華醫(yī)院感染學(xué)雜志;2010年19期

3 黃瑞玉;穆小萍;柏彩英;張德純;鄧文喻;;連翹對(duì)多藥耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌主動(dòng)外排泵編碼基因adeB的影響[J];中國(guó)病原生物學(xué)雜志;2011年02期

4 孫靜娜;劉青松;劉澤世;趙帥;王國(guó)欣;張征;;多重耐藥及泛耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌外排泵基因adeB的研究[J];河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2014年10期

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1 吳春陽(yáng);鮑曼不動(dòng)桿菌泛耐藥性與外排泵基因和外膜蛋白基因相關(guān)性的研究[D];蘇州大學(xué);2013年

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