獲得性免疫缺陷綜合癥(Acquired immunodeficiency syndrome,AIDS),也稱艾滋病,是感染人類免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)而引起的一種全身免疫系統(tǒng)嚴(yán)重?fù)p害的傳染性疾病。目前,臨床上運(yùn)用的HARRT療法,因?yàn)闈摲《編?kù)的存在,使其不能徹底地清除體內(nèi)的HIV病毒。“Shock and Kill”策略旨在先通過(guò)潛伏激活劑活化隱藏于潛伏庫(kù)中的HIV,再結(jié)合HARRT療法,實(shí)現(xiàn)HIV感染者的徹底治愈。針對(duì)已發(fā)現(xiàn)的HIV潛伏形成機(jī)制,作用于不同途徑和不同靶點(diǎn)的潛伏激活劑(Latency reversing agents,LRAs)正在被逐漸地發(fā)現(xiàn)與研究,例如組蛋白去乙�；敢种苿㏒AHA、蛋白激酶C調(diào)節(jié)劑Prostratin和含溴結(jié)構(gòu)域蛋白抑制劑JQ1等化合物。本課題發(fā)現(xiàn)在含溴結(jié)構(gòu)域蛋白抑制劑JQ1誘導(dǎo)潛伏HIV轉(zhuǎn)錄激活過(guò)程中,HSP90-CDC37-CDK9復(fù)合物發(fā)揮重要的調(diào)控功能。其中主要的研究?jī)?nèi)容包括以下幾點(diǎn):(1)通過(guò)定量蛋白質(zhì)組學(xué)SILAC技術(shù)發(fā)現(xiàn)JQ1處理會(huì)使得更多的HSP90-CDC37復(fù)合物與CDK9結(jié)合;(2)使用不同濃度和不同時(shí)間的JQ1處理后,再結(jié)合免疫共沉淀等實(shí)驗(yàn)方法,驗(yàn)證HSP90-CDC37復(fù)合物與CDK9結(jié)合增加具有時(shí)間和濃度依賴性特征;(3)使用不同結(jié)構(gòu)的含溴結(jié)構(gòu)域蛋白抑制劑iBET-151同樣地促進(jìn)CDK9募集更多的HSP90-CDC37復(fù)合物;(4)抑制CDK9活性、HSP90活性、敲低HSP90以及敲低CDC37后,下調(diào)JQ1誘導(dǎo)的潛伏HIV基因表達(dá);(5)HSP90-CDC37-CDK9復(fù)合物結(jié)合的穩(wěn)定性為JQ1刺激潛伏HIV基因轉(zhuǎn)錄作用所需;(6)抑制HSP90活性以及降低CDC37表達(dá)量后,通過(guò)非活化狀態(tài)7SKsnRNP復(fù)合物的重新組裝,使更多的CDK9處于無(wú)活性狀態(tài),從而降低JQ1激活潛伏HIV基因表達(dá)的活性;(7)JQ1促進(jìn)熱休克因子HSF1與HIV-LTR區(qū)域結(jié)合,并使HSF1募集更多的HSP90-CDK9復(fù)合物參與其逆轉(zhuǎn)潛伏HIV病毒轉(zhuǎn)錄的作用。本課題研究JQ1通過(guò)HSP90-CDC37-CDK9復(fù)合物調(diào)控潛伏HIV基因轉(zhuǎn)錄的過(guò)程,不僅為JQ1作用機(jī)制的完整性提供了強(qiáng)有力地證據(jù),而且為潛伏激活劑通過(guò)多途徑多靶點(diǎn)發(fā)揮作用提供理論基礎(chǔ),從而對(duì)臨床研究具有重要的科學(xué)意義和應(yīng)用價(jià)值。
【學(xué)位單位】：廈門大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R373
【部分圖文】：

處于活化的狀態(tài)，并且與作為通用轉(zhuǎn)錄因子的含溴結(jié)構(gòu)域蛋白Ｂｒｄ４??（Ｂｒｏｍｏｄｏｍａｉｎｐｒｏｔｅｉｎ４）相結(jié)合，之后被Ｂｒｄ４上調(diào)轉(zhuǎn)錄活性，増強(qiáng)其對(duì)ＲＮＡ??聚合酶ＩＩ?ＣＴＤ的識(shí)別與結(jié)合（見(jiàn)圖１．１）。Ｂｒｄ４是與ＣＤＫ９的第１７５位絲氨酸、??ＣｙｃｌｉｎＴｌ的４２６？５１６的氨基酸直接結(jié)合，募集Ｐ－ＴＥＦｂ到轉(zhuǎn)錄復(fù)合體中，從而調(diào)??節(jié)轉(zhuǎn)錄延伸［４７］。當(dāng)敲低Ｂｒｄ４的表達(dá)量后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)ＲＮＡ聚合酶ＩＩ?ＣＴＤ的第??二位絲氨酸磷酸化程度降低，以及７ＳＫｓｎＲＮＰ中結(jié)合的Ｐ－ＴＥＦｂ增加，而運(yùn)用一??些外界的刺激因素處理細(xì)胞后，ＨＥＸＩＭ１、ＬＡＲＰ７等負(fù)性因子和Ｐ－ＴＥＦｂ從非活??性的７ＳＫｓｎＲＮＰ復(fù)合物中解離出來(lái)，同時(shí)使Ｐ－ＴＥＦｂ與Ｂｒｄ４的結(jié)合增加，刺激??轉(zhuǎn)錄的延伸［４８］。??ｔｅ＾ＣＤＫ９?Ｏ?Ｏ?？?Ｔａｔ：Ｐ－ＴＥＦｂ??，Ｔ，?Ｃｅｌｌｕｌａｒ?Ｉｆ?｜ｊ?▲?ＣｙｃＴＩ?ｉｆＳ｜ＣＤＫ９?ｃｏｍｐｌｅｘ??＾ｃＴ１?ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ?＋?ＣＤＫ９?Ｗ??＋?參??ＭｅＰＣＢ?ＬＡＲＰ７?ｗ??ＣｙｃＴ１?ＢＲＤ４：Ｐ－ＴＥＦｂ??７ＳＫｓｎＲＮＰ?＼?＾?＾?ｂｒ〇４ＣＤＫ９?ｃｏｍｐｌｅｘ??ｃｏｍｐｌｅｘ?ｎ??Ｐ－ＴＥＦｂ、ＣＤＫＳ??ＣｙｃＴ１??圖１．１非活化型和

錄（Ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ）、整合（Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ）、轉(zhuǎn)錄與翻譯（Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ?ａｎｄ??ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ）、組裝（Ａｓｓｅｍｂｌｙ）、出芽（Ｂｕｄｄｉｎｇ）和成熟（Ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ）．等過(guò)程完??成復(fù)制周期及侵染（見(jiàn)圖１．２）?首先ＨＩＶ－１利用表面糖蛋白ｇｐｌ２０與宿主淋??巴細(xì)胞表面上的受體ＣＤ４、ＣＣＲ５結(jié)合，導(dǎo)致病毒的包膜和細(xì)胞膜發(fā)生融合，釋??放出病毒顆粒進(jìn)入到宿主細(xì)胞中。接著病毒脫去核外殼和釋放病毒基因組ＲＮＡ，??在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，被逆轉(zhuǎn)錄成雙鏈的ＤＮＡ并進(jìn)入到細(xì)胞核中。隨后經(jīng)過(guò)整??合酶的催化，將其整合到宿主的染色體中，使其成為潛伏的病毒庫(kù)，形成了?ＨＩＶ??無(wú)法治愈的極大障礙。在病毒的ＤＮＡ被整合進(jìn)宿主的基因組中后，利用宿主細(xì)??胞中的ＲＮＡ聚合酶ＩＩ、細(xì)胞器等物質(zhì)的功能產(chǎn)生病毒的ＲＮＡ并介導(dǎo)其出核和??翻譯病毒蛋白，組裝出成新的病毒顆粒體。然后，ＨＩＶ病毒再利用宿主細(xì)胞膜的??９??

發(fā)現(xiàn)的ＨＩＶ潛伏激活劑主要有組蛋白去乙�；敢种苿ǎ龋椋螅簦铮睿�?ｄｅａｃｅｔｙｌａｓｅ．??ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，?ＨＤＡＣｉ）、蛋白激酶?Ｃ?（Ｐｒｏｔｅｉｎ?ｋｉｎａｓｅ?Ｃ，ＰＫＣ）激活劑、甲基化抑制??劑、Ｐ－ＴＥＦｂ激活劑以及細(xì)胞因子免疫功能調(diào)節(jié)劑等（見(jiàn)圖１．３）?＠，６９］。??１１??
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 趙名;于曉?shī)l;;輔助伴侶分子Cdc37蛋白的研究進(jìn)展[J];生物技術(shù)通訊;2009年03期

本文編號(hào)：2843198