【摘要】：過敏性疾病是一個全球性健康問題,流行病學(xué)調(diào)查顯示過敏性疾病的發(fā)病率高達(dá)15-30%,被世界衛(wèi)生組織列為本世紀(jì)重點(diǎn)預(yù)防的三大疾病之一。過敏性疾病的發(fā)病率高且病因復(fù)雜,臨床表現(xiàn)多樣且診斷易混淆,至今仍是臨床診斷和治療的難點(diǎn)。此外,關(guān)于過敏性疾病的發(fā)病機(jī)理及治療靶標(biāo)的研究還非常少。肥大細(xì)胞是過敏反應(yīng)發(fā)生過程所涉及的最后一種免疫細(xì)胞,是過敏反應(yīng)發(fā)生的最直接效應(yīng)細(xì)胞。研究表明,Septin11參與肥大細(xì)胞的活化過程并能在肥大細(xì)胞的細(xì)胞膜富集。然而,Septin11如何調(diào)控肥大細(xì)胞的活化過程還不清楚。本研究中,我們采用P815肥大細(xì)胞系為研究對象,利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)在P815肥大細(xì)胞中敲除Sept11(Septin11蛋白),成功構(gòu)建P815-PX459-Septin11-KO穩(wěn)定細(xì)胞系(簡稱KO細(xì)胞系)。用Compound48/80刺激KO及WT肥大細(xì)胞活化,成功構(gòu)建肥大細(xì)胞活化模型。進(jìn)一步體外實驗研發(fā)現(xiàn)Septin11促進(jìn)肥大細(xì)胞增殖和遷移、促進(jìn)肥大細(xì)胞活化和炎癥因子的釋放。研究表明,Septin11通過Ca~(2+)—ERK信號通路調(diào)控肥大細(xì)胞活化過程,Septin11調(diào)控Ca~(2+)—ERK信號通路的分子機(jī)制并不清楚。目前我們提出假說:當(dāng)C48/80刺激肥大后,Septin11富集到細(xì)胞膜,通過某種分子機(jī)制關(guān)閉鈣離子通道,進(jìn)而抑制鈣離子內(nèi)流過程。鈣離子內(nèi)流被抑制激活了下游的ERK信號通路,進(jìn)而激活肥大細(xì)胞活化,促進(jìn)肥大細(xì)胞脫顆粒。
【圖文】：

有學(xué)者認(rèn)為引起肥大細(xì)胞脫顆粒的因素可分為選擇性因素和非選擇性因素兩類：選擇性因素中有一部分物質(zhì)（如致敏的抗原抗體復(fù)合物，堿性多肽等）是直接作用于肥大細(xì)胞膜上，，使細(xì)胞內(nèi) cAMP 下降而引起脫顆粒；另一部分物質(zhì)（如變應(yīng)原、A 蛋白等）則主要作用于肥大細(xì)胞膜上的 IgE。非選擇性因素如機(jī)械性損傷、熱作用、放射作用及化學(xué)物質(zhì)則主要是造成肥大細(xì)胞膜的損傷或破裂進(jìn)而引起肥大細(xì)胞脫顆粒。也有學(xué)者[16]認(rèn)為肥大細(xì)胞脫顆�？赏ㄟ^免疫機(jī)制和多種非免疫機(jī)制被啟動，并且由于啟動刺激物的不同，可造成肥大細(xì)胞釋放介質(zhì)在動力學(xué)和數(shù)量上的差異。關(guān)于肥大細(xì)胞脫顆粒的機(jī)制目前有信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑假說和膜融合機(jī)制假說兩種。引起肥大細(xì)胞脫顆粒的因素有[17]：（a）高溫、機(jī)械損傷、離子輻射造成的物理損傷；（b）化學(xué)物質(zhì)作用：如毒素、蛇毒、蛋白酶；（c）內(nèi)源性介質(zhì)：包括組織蛋白酶、嗜酸粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞產(chǎn)生的陽離子蛋白；（d）IgE 依賴或 IgE 非依賴的免疫學(xué)機(jī)制；（e）延長 1 型傳入神經(jīng)纖維的高敏感反應(yīng)。

圖 1. 2 肥大細(xì)胞參與Ⅰ型超敏反應(yīng)的機(jī)理[20]Fig. 1.2 The mechanism of mast cells involved in type I hypersensitivity機(jī)體暴露于過敏原中激活Th2細(xì)胞并且刺激B細(xì)胞形成分泌IgE的漿細(xì)胞。在肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞膜上釋放的 IgE 分子與 IgE 特異性 Fc 受體（FcRI）結(jié)合。當(dāng)機(jī)體再次暴露于過敏原時，引起 IgE 交聯(lián)，進(jìn)一步引起肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞釋放活性介質(zhì)（血管活性胺）。這些介質(zhì)引起血管平滑肌收縮，血管通透性增加和血管舒張。表 1. 2 參與Ⅰ型超敏反應(yīng)的主要介質(zhì)介質(zhì) 作用初級過敏組胺、肝素 血管通透性增加；平滑肌收縮5-羥色胺（嚙齒類） 血管通透性增加；平滑肌收縮嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子嗜酸性粒細(xì)胞的趨化作用
【學(xué)位授予單位】：昆明理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R329.2

【參考文獻(xiàn)】

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