本文關鍵詞：六味地黃丸對兔椎間盤退變模型椎間盤細胞外基質(zhì)組分的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：通過觀察六味地黃丸對兔椎間盤退變模型椎間盤細胞外基質(zhì)組分的影響,探討六味地黃丸防治椎間盤退變的療效。 方法：將80只6月齡清潔級新西蘭兔隨機分為六味地黃丸組(A組)、模型組(B組)、假手術組(C組)、空白對照組(D組),每組20只。模型組、六味地黃丸組予建立椎間盤退變動物模型,全麻后消毒鋪巾,經(jīng)左腹前外側(cè)入路依次切開皮膚、腹外斜肌、腹內(nèi)斜肌、腹橫肌,沿腰大肌肌間隙推開后腹膜和大血管,暴露L4/5和L5/6椎間隙,用10μ l的微量注射器隨機選擇椎間盤注射入10ng/μl TNF-α溶液1u l,注射后標記好實驗動物的椎體并予生理鹽水沖洗,依層次縫合,放回籠中。假手術組行相同手術入路進入腰椎,再依次縫合組織。切口予絡合碘涂擦消毒。術后給予青霉素400萬單位肌注防感染,每天1次,連續(xù)使用3天。將六味地黃丸膠囊溶于生理鹽水后,六味地黃丸組給予六味地黃膠囊溶液10mg/kg灌胃,每天1次；模型組、假手術組、空白對照組灌予等量生理鹽水,每天1次,自然喂養(yǎng)。于最后一次灌胃后4小時分2周、4周、6周、8周分批次處死動物,留取椎間盤標本。酶聯(lián)免疫法測定椎間盤終板糖胺多糖(glycosaminoglycan, GAG)總量、硫酸軟骨素(chondroitin sulfate, CS)和硫酸角質(zhì)素(keratan sulfate, KS)比值,放射免疫法測定透明質(zhì)酸(hyaluronic acid,HA)含量。RT-PCR檢測蛋白多糖、Ⅰ型膠原、Ⅱ型膠原的mRNA含量,Western Blot檢測蛋白多糖、Ⅰ型膠原、Ⅱ型膠原的表達。 結(jié)果：假手術組新西蘭兔與模型組相比較,模型組兔蛋白多糖的表達及mRNA含量、糖胺多糖含量、硫酸軟骨素和硫酸角質(zhì)素的比值、透明質(zhì)酸含量、Ⅱ型膠原的表達及mRNA含量均明顯低于假手術組,亦低于空白對照組,工型膠原含量及mRNA表達明顯高于假手術組,亦高于空白對照組,P0.05,其差異有統(tǒng)計學意義,說明兔椎間盤模型成功建立。 模型組新西蘭兔與六味地黃丸組相比較,模型組兔蛋白多糖的表達及mRNA含量、糖胺多糖含量、硫酸軟骨素和硫酸角質(zhì)素的比值、透明質(zhì)酸含量、Ⅱ型膠原的表達及mRNA含量均明顯低于六味地黃丸組,Ⅰ型膠原含量及mRNA表達明顯高于六味地黃丸組,P0.05,其差異有統(tǒng)計學意義。說明經(jīng)六味地黃丸混懸液灌胃后,有一定的治療效果。 六味地黃丸組內(nèi),手術后2周與4周、4周與6周、6周與8周相比較,蛋白多糖的表達及mRNA含量、糖胺多糖含量、硫酸軟骨素和硫酸角質(zhì)素的比值、透明質(zhì)酸含量、Ⅱ型膠原的表達及mRNA含量逐漸降低,但與模型組比較,趨勢較�。虎裥湍z原的表達及mRNA含量逐漸升高,但與模型組比較,趨勢較小,P0.05,差異有統(tǒng)計學意義,表明六味地黃丸能有效延緩椎間盤的退變； 模型組內(nèi),2周與4周、4周與6周、6周與8周相比較,蛋白多糖的表達及mRNA含量、糖胺多糖含量、硫酸軟骨素和硫酸角質(zhì)素的比值、透明質(zhì)酸含量、Ⅱ型膠原的表達及mRNA含量下降,Ⅰ型膠原的表達及mRNA含量升高,P0.05,差異有統(tǒng)計學意義,也說明椎間盤退變模型成功建立。 結(jié)論：六味地黃丸能上調(diào)椎間盤退變模型中糖胺多糖含量、硫酸軟骨素／硫酸角質(zhì)素比值、透明質(zhì)酸含量,適度下調(diào)椎間盤退變模型中Ⅰ型膠原的表達,上調(diào)Ⅱ型膠原的表達,穩(wěn)定了蛋白多糖含量,在一定程度上延緩了椎間盤的退變。
【關鍵詞】：六味地黃丸 椎間盤退變 細胞外基質(zhì) 蛋白多糖 糖胺多糖 硫酸軟骨素 硫酸角質(zhì)素 透明質(zhì)酸 Ⅰ型膠原 Ⅱ型膠原
【學位授予單位】：湖南中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R285.5;R-332
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 引言10-11
• 第一部分 材料與方法11-16
• 1. 實驗材料11-12
• 1.1 實驗動物11
• 1.2 實驗用藥11
• 1.3 主要試劑11
• 1.4 實驗儀器11-12
• 2. 實驗方法12-13
• 2.1 動物分組12
• 2.2 動物造模12
• 2.3 治療(干預)方法12-13
• 2.4 標本采集13
• 3. 指標檢測13-15
• 3.1 RT-PCR檢測13-14
• 3.2 Western-blot檢測14-15
• 3.3 酶聯(lián)免疫法檢測15
• 3.4 放射免疫法檢測15
• 4. 統(tǒng)計處理15-16
• 第二部分 結(jié)果16-25
• 1. 各組兔基本情況16
• 2. 兔蛋白多糖16-17
• 3. 兔Ⅰ型膠原17
• 4. 兔Ⅱ型膠原17-18
• 5. 糖胺多糖18-19
• 6. 硫酸軟骨素/硫酸角質(zhì)素比值19-20
• 7. 透明質(zhì)酸20-21
• 8. 蛋白多糖mRNA21
• 9. Ⅰ型膠原mRNA21-22
• 10. Ⅱ型膠原mRNA22-25
• 第三部分 分析與討論25-30
• 1. 蛋白多糖(proteoglycans,PGs)與椎間盤退變(intervertebral discdegeneration,IDD)25
• 2. 膠原蛋白(collagen)與椎間盤退變(IDD)25-26
• 3. 動物模型的選擇26-27
• 4. 中醫(yī)對椎間盤退變的認識與研究27-28
• 4.1 椎間盤退變的病因病機27
• 4.2 中醫(yī)治療椎間盤退變的進展27-28
• 5. 六味地黃丸與椎間盤退變28-29
• 6. 本研究存在的問題與展望29-30
• 結(jié)論30-31
• 致謝31-32
• 參考文獻32-35
• 附錄35-47
• 附錄1：攻讀學位期間主要研究成果及發(fā)表論文35-36
• 附錄2：文獻綜述36-46
• 參考文獻42-46
• 附錄3：劑量換算46-47
• 附錄4：相關實驗實物圖47

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳學武;徐宏光;;椎間盤退變生物學治療研究進展[J];國際骨科學雜志;2006年04期

2 郭健行;黃桂成;;椎間盤退變影響因素研究進展[J];國際骨科學雜志;2008年01期

3 周紅海,韋堅,施杞,沈培芝;益氣化瘀補腎法對頸椎病動物椎間盤病理變化與Ⅱ型膠原mRNA表達的影響[J];廣西中醫(yī)藥;2003年02期

4 楊勇;姜建元;呂飛舟;馬曉生;夏新雷;王立勛;王洪立;;骨髓間充質(zhì)干細胞治療椎間盤退變研究進展[J];國際骨科學雜志;2012年03期

5 許理忠;王擁軍;施杞;;中藥益氣化瘀方對體外培養(yǎng)的大鼠頸椎間盤軟骨細胞基質(zhì)金屬蛋白酶mRNA表達的影響[J];遼寧中醫(yī)雜志;2008年11期

6 黃娟;六味地黃湯治療腎虛腰痛116例[J];河南科技大學學報(醫(yī)學版);2004年03期

7 錢祝民;;金匱腎氣丸和六味地黃丸交替久服治療慢性腰痛體會[J];山東中醫(yī)雜志;2006年09期

8 段曉麗;;六味地黃丸的藥理作用與臨床應用[J];山西醫(yī)藥雜志;2009年12期

9 王擁軍,孫鵬,周泉,劉梅,胡志俊,周重建,施杞;益氣化瘀中藥對大鼠椎間盤軟骨細胞基因表達的影響[J];中西醫(yī)結(jié)合學報;2005年02期

10 孫鵬;王擁軍;施杞;周泉;劉梅;周重建;錢雪華;;益氣化瘀方對椎間盤軟骨細胞凋亡相關因子的作用[J];中國骨傷;2006年08期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 權學民;益氣化瘀中藥結(jié)合BMSCs移植干預腰椎間盤退變的實驗研究[D];北京中醫(yī)藥大學;2011年

  本文關鍵詞：六味地黃丸對兔椎間盤退變模型椎間盤細胞外基質(zhì)組分的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：267203