發(fā)布時(shí)間：2017-03-22 02:01

  本文關(guān)鍵詞：人巨細(xì)胞病毒利用干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白促進(jìn)病毒組裝中心形成，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白(interferon-induced transmembrane proteins,IFITMs)已經(jīng)被鑒定為宿主I型干擾素防御系統(tǒng)中的關(guān)鍵效應(yīng)分子。大多數(shù)RNA病毒對(duì)宿主細(xì)胞的入侵階段被IFITMs所抑制。然而,在DNA病毒感染過(guò)程中IFITMs所發(fā)揮的作用尚待深入研究。在本論文中,我們發(fā)現(xiàn)人巨細(xì)胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV),一類(lèi)大分子雙鏈DNA病毒,在感染人成纖維細(xì)胞過(guò)程中利用IFITMs以促進(jìn)病毒組裝中心(virion assembly compartment,v AC)的形成。實(shí)驗(yàn)表明IFITMs在人胚肺成纖維細(xì)胞系(MRC5)中組成型表達(dá),而HCMV感染晚期抑制了IFITM蛋白的累積;在MRC5細(xì)胞中過(guò)表達(dá)IFITM蛋白能夠促進(jìn)HCMV復(fù)制3-5倍,而利用RNA干擾(RNAi)抑制IFITM蛋白的表達(dá)后,巨細(xì)胞病毒的復(fù)制在第8天降低約100倍;RNA干擾下調(diào)IFITMs并未影響到巨細(xì)胞病毒DNA復(fù)制和基因表達(dá),但病毒組裝中心(v AC)的典型球狀結(jié)構(gòu)卻不能形成,我們同時(shí)利用電鏡驗(yàn)證了在IFITM敲低的細(xì)胞中病毒病毒顆粒組裝缺陷,并產(chǎn)生感染性較弱的病毒顆粒。有趣的是,單純皰疹病毒,一種與HCMV密切相關(guān)的人類(lèi)皰疹病毒,其在MRC5細(xì)胞中的復(fù)制在IFITMs蛋白下調(diào)后卻不受影響。這些結(jié)果表明IFITMs特異地參與了HCMV復(fù)制所必需的信號(hào)通路。
【關(guān)鍵詞】：HCMV HSV-1 成纖維細(xì)胞 IFITMs RNAi vAC
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R373.11
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 前言8-10
• 第一部分 IFITMS在人巨細(xì)胞病毒感染中的作用10-24
• 一、材料與方法10-15
• 1.1 質(zhì)粒和試劑10
• 1.2 病毒和細(xì)胞系10-11
• 1.3 SHRNA敲低11
• 1.4 病毒生長(zhǎng)分析11
• 1.5 WESTERN印跡11-13
• 1.6 免疫熒光13
• 1.7 DNA和RNA的分析13-15
• 二、結(jié)果15-22
• 2.1 HCMV感染抑制IFITM基因表達(dá)15-19
• 2.2 人體成纖維細(xì)胞IFITM過(guò)表達(dá)無(wú)法抑制HCMV復(fù)制19-20
• 2.3 IFITMS的RNAI敲低抑制HCMV復(fù)制但不抑制HSV復(fù)制20-22
• 三、討論22-24
• 第二部分 IFITMS促進(jìn)HCMV病毒組裝中心的形成24-37
• 一、材料與方法24-26
• 1.1 質(zhì)粒和試劑24
• 1.2 HCMV病毒純化24-25
• 1.3 電鏡分析25-26
• 二、結(jié)果26-34
• 2.1 下調(diào)IFITMs蛋白不影響HCMV基因表達(dá)和DNA的合成，但降低了病毒感染性26-28
• 2.2 IFITM是病毒正確形成vAC所必需28-31
• 2.3 通過(guò)電子顯微鏡超微結(jié)構(gòu)分析揭示IFITM敲低后病毒組裝發(fā)生缺陷31-34
• 三、討論34-37
• 參考文獻(xiàn)37-44
• 綜述44-56
• 參考文獻(xiàn)51-56
• 附錄56-57
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章57-58
• 致謝58-59

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳敏;李怡芳;何蓉蓉;栗原博;;干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白抗甲型流感病毒的研究進(jìn)展[J];國(guó)際藥學(xué)研究雜志;2013年06期

2 邢晶晶;劉海嬌;范路生;宋凱;陳彤;林金星;;植物細(xì)胞胞吞途徑及其研究方法[J];電子顯微學(xué)報(bào);2014年05期

3 胡澤波;馬坤嶺;;亞細(xì)胞器在膽固醇代謝紊亂中的作用[J];國(guó)際心血管病雜志;2014年06期

4 周勇;鄔林泉;;干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白3在人類(lèi)惡性腫瘤中作用的研究進(jìn)展[J];廣東醫(yī)學(xué);2015年09期

5 趙志敏;鄭威楠;李洪濤;潘澤民;;IFITM蛋白研究進(jìn)展[J];農(nóng)墾醫(yī)學(xué);2013年06期

6 王九令;孫佳姝;施興華;;納米顆粒與細(xì)胞的交互作用[J];科學(xué)通報(bào);2015年21期

7 楊玉東;劉公召;李冬至;徐菁華;楊林梅;;金納米棒的偏光特性及其作為方向探針在單分子水平成像上的應(yīng)用[J];中國(guó)科學(xué):化學(xué);2015年10期

8 劉中洋;劉艷;襲榮剛;王曉波;;細(xì)胞內(nèi)吞和自噬的新標(biāo)志物VCP/p97[J];生物技術(shù)通訊;2014年03期

9 李奇志;;哺乳動(dòng)物細(xì)胞的胞吞作用實(shí)驗(yàn)教學(xué)設(shè)計(jì)和探討[J];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2015年05期

10 姜穎越;杜壽文;曹婷婷;趙飛;王茂鵬;譚鵬;辛舒;朱羿龍;李文杰;李艷茹;李太元;李昌;金寧一;;穩(wěn)定表達(dá)人IFITM3的A549細(xì)胞株建立及其對(duì)禽流感病毒感染的抑制作用[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;2016年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 Liqian Mo;Lianbing Hou;Dan Guo;Xiaoyan Xiao;Ping Mao;Xixiao Yang;;Preparation and Characterization of Teniposide PLGA Nanoparticles and Their Uptake in Human Glioblastoma U87MG Cells[A];2013年廣東省藥師周大會(huì)論文集[C];2013年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊辰;~(125)I-UdR-殼聚糖納米微粒的研制及其治療兔肝癌的研究[D];蘇州大學(xué);2013年

2 蔣麗琴;膽固醇基普魯蘭自組裝納米粒與肝癌細(xì)胞相互作用的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

3 楊飛飛;基于細(xì)胞穿膜肽修飾的新型非病毒載體的構(gòu)建、篩選及遞送功能siRNA治療惡性腫瘤的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

4 魏琳;功能金納米材料的合成、應(yīng)用及光學(xué)顯微成像技術(shù)的開(kāi)發(fā)[D];湖南大學(xué);2013年

5 崔蕾;HAP1在肌萎縮側(cè)索硬化患者外周血淋巴細(xì)胞的表達(dá)及意義[D];中南大學(xué);2013年

6 洪小栩;1、甲型H1N1流感病毒致病機(jī)理的研究2、PAMAM納米材料毒性機(jī)理的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

7 鄭超;含苯硼酸基生物粘附性材料作為胰島素跨鼻粘膜轉(zhuǎn)運(yùn)載體的研究[D];南開(kāi)大學(xué);2013年

8 肖達(dá);赤擬谷盜dsRNA吸收機(jī)制及相關(guān)基因功能的研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

9 段虎;紅螯螯蝦（Cherax quadricarinatus）血細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞免疫學(xué)研究[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2014年

10 許東;金納米棒的合成、加工及作為方向探針在單分子成像上的應(yīng)用[D];湖南大學(xué);2014年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 鄔君君;對(duì)蝦白斑綜合癥病毒（WSSV）進(jìn)入宿主細(xì)胞的方式及增殖情況[D];國(guó)家海洋局第三海洋研究所;2013年

2 李臻;經(jīng)導(dǎo)管動(dòng)脈注射SPIO-NS/doxorubicin/PVA治療兔移植性VX2肝腫瘤療效研究[D];中南大學(xué);2013年

3 胡子英;擬南芥VLN1和VLN5的時(shí)空表達(dá)及參與響應(yīng)非生物脅迫機(jī)理的初步研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

4 肖軒昂;不同形貌的磁—介孔二氧化硅納米粒子的細(xì)胞內(nèi)吞及內(nèi)吞機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2014年

5 程之明;臍血單個(gè)核細(xì)胞分化為樹(shù)突狀細(xì)胞的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2014年

6 趙昕;高時(shí)空分辨單顆粒光譜顯微成像[D];湖南師范大學(xué);2014年

7 王玲;雙親性嵌段共聚物膜與剛/柔性納米顆粒相互作用機(jī)制的分子動(dòng)力學(xué)研究[D];蘇州大學(xué);2014年

8 張海珍;納米粒子與磷脂膜相互作用中的協(xié)同效應(yīng)研究[D];蘇州大學(xué);2014年

9 武慶炎;形變引起的生物膜微觀結(jié)構(gòu)變化的分子動(dòng)力學(xué)模擬研究[D];浙江師范大學(xué);2014年

10 任科;膜蛋白Flotillin-1與細(xì)胞膜朊蛋白PrP~C內(nèi)吞相關(guān)性研究[D];中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;2013年

  本文關(guān)鍵詞：人巨細(xì)胞病毒利用干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白促進(jìn)病毒組裝中心形成，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：260653