本文關鍵詞：DRG神經元T型鈣通道調節(jié)機制的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：T型鈣通道又稱低電壓激活鈣通道(LVA),其組織分布廣泛,并且在機體生理和病理過程中,如神經放電、疼痛、癌癥等都發(fā)揮重要的作用。因此,研究T型鈣通道調節(jié)機制有重要意義。然而,由于T型鈣通道特異性抑制劑的缺乏,致使T型鈣通道調節(jié)機制研究受限,發(fā)展緩慢。大量研究表明,許多激素和神經遞質都可通過激活G蛋白偶聯受體(GPCRs)來調控T型鈣通道,但具體的調節(jié)機制尚不十分清楚。因此,本研究將圍繞激活GPCRs來探索T型鈣通道的調節(jié)機制。此外,還將研究硫化氫氣體對DRG神經元中T型鈣電流的調節(jié)作用。第一部分G蛋白偶聯受體對DRG神經元T型鈣通道的調節(jié)及分子機制的研究目的:研究激活GPCRs對T型鈣通道的作用并初步探索其調節(jié)的分子機制。包括:(1)μ型阿片受體激動劑DAMGO對DRG神經元中T型鈣電流的調節(jié)作用。(2)GABAB受體激動劑baclofen對DRG神經元中T型鈣電流及過表達在HEK293細胞中CaV3.2電流的調節(jié)作用。(3)研究baclofen調節(jié)T型鈣通道的分子機制。方法:利用全細胞膜片鉗技術進行研究。結果:(1)μ型阿片受體激動劑DAMGO(250 n M)可逆性抑制DRG神經元中T型(LVA)和高電壓激活鈣通道(HVA)鈣電流,抑制率分別為41.8±10.4%(n=3)和65.8±6.7%(n=8)。(2)DAMGO對HVA鈣電流的抑制作用成濃度依賴性(EC50=17.72±6.9 n M),并且G蛋白βγ亞基一定程度上參與了此抑制過程。(3)在一些DRG細胞中,DAMGO并不能夠抑制T型鈣電流。(4)GABAB受體激動劑baclofen可逆性抑制DRG神經元中LVA(T型)和HVA鈣電流,抑制率分別為22.53±2.05%(n=15)、31.90±3.11%(n=27)。并且此抑制作用可被400 ng/ml PTX部分阻斷(P0.001,n=9~11)。(5)GDP-beta-s能夠部分阻斷baclofen對HVA鈣電流的抑制作用(P0.05,n=16),但不能阻斷baclofen對LVA鈣電流的抑制作用(P0.05,n=6)。(6)DTT能夠部分恢復baclofen對LVA(T型)鈣電流的抑制作用(P0.01,n=6),但對baclofen引發(fā)的HVA鈣電流的抑制作用沒有影響(P0.05,n=14)。(7)GABAB受體激動劑baclofen可逆性抑制與GABAB共表達在HEK293細胞中的CaV3.2電流,抑制率為24.73±1.11%(n=12),并且此抑制作用可被1 m M DTT部分洗脫(P0.001,n=7)結論:采用全細胞膜片鉗的方法發(fā)現激活μ型阿片受體和GABAB受體均可抑制T型鈣電流,但多數表達T型鈣通道的DRG神經元并不表達μ受體。GABAB受體對T型鈣通道的調節(jié)是由Gαi/o型G蛋白介導的,并且還涉及氧化還原調節(jié)途徑。第二部分硫化氫對DRG神經元T型鈣通道的調節(jié)作用目的:觀察硫化氫對DRG神經元上T型鈣通道的調節(jié)作用方法:利用全細胞膜片鉗技術進行研究。結果:(1)Na HS在低濃度時能夠選擇性抑制DRG神經元上的T型鈣電流,并且在100μM(n=5)、300μM(n=6)、1 m M(n=6)三個濃度梯度時,對T型鈣電流的抑制率成濃度依賴性。Na HS對HVA鈣電流沒有作用(P0.05,n=11)。(2)Na HS在高濃度時(3 m M,10 m M)增大T型鈣電流。(3)高濃度Na HS對T型鈣電流的增大作用主要是Na+引起,而不是H2S本身的作用。將10 m M Na HS替換成10 m M Na Cl時,后者同樣能夠增大T型鈣電流,雖然10 m M Na Cl的增大作用似乎略小與10 m M Na HS的增大作用(P=0.07,n=5)。結論:本實驗結果表明,H2S能夠抑制DRG神經元上的T型鈣電流,并且在較低濃度范圍內抑制率呈濃度依賴性。高濃度的Na HS對T型鈣電流有增大作用,但并不是通過H2S的作用,而可能是其所含的Na+引起。
【關鍵詞】：T型鈣通道 CaV3.2 μ型阿片受體 GABAB受體 DRG神經元 硫化氫 調節(jié)作用
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R363
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 英文縮寫10-11
• 引言11-12
• 第一部分G蛋白偶聯受體對DRG神經元T型鈣通道的調節(jié)及分子機制的研究12-35
• 前言12-14
• 材料與方法14-18
• 結果18-21
• 附圖21-30
• 討論30-31
• 小結31
• 參考文獻31-35
• 第二部分 硫化氫對DRG神經元T型鈣通道的調節(jié)作用35-47
• 前言35-36
• 材料與方法36-38
• 結果38-40
• 附圖40-44
• 討論44
• 小結44
• 參考文獻44-47
• 結論47-48
• 綜述G蛋白偶聯受體對T型鈣通道調節(jié)機制的研究進展48-56
• 參考文獻53-56
• 致謝56-57
• 個人簡歷57

【相似文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 高菁華,湯浩;鈣通道的分類和幾種主要鈣通道的功能[J];日本醫(yī)學介紹;2005年05期

2 Schramm M;趙運斌;郝慶恩;;藥物對鈣通道功能的調節(jié)[J];國外醫(yī)學(分子生物學分冊);1987年03期

3 苗芳;;L型鈣通道的新配體[J];國外醫(yī)學.藥學分冊;1991年02期

4 劉中華;鈣通道與疼痛[J];中國臨床康復;2002年12期

5 張志國;張慶柱;;T型鈣通道及其作用藥物研究進展[J];中國藥理學通報;2007年02期

6 李詠生;喻研;葉篤筠;;鈣池操縱的鈣通道的調控機制[J];醫(yī)學分子生物學雜志;2007年01期

7 文先杰;李張軍;方志源;曾因明;;T型鈣通道與疼痛[J];國際麻醉學與復蘇雜志;2007年05期

8 高尚邦;李臣鴻;;鈣釋放激活鈣通道研究進展[J];現代生物醫(yī)學進展;2009年02期

9 鄭永芳;鈣通道生理[J];生理科學;1986年05期

10 胡家桂;;鈣通道阻滯的分類[J];湖北醫(yī)藥導報;1987年06期

中國重要會議論文全文數據庫 前10條

1 杜正清;弓娜;覃春麗;;二氧化硫衍生物對大鼠背根神經元鈣通道不同亞型的影響[A];第十一次中國生物物理學術大會暨第九屆全國會員代表大會摘要集[C];2009年

2 趙美瞇;郝麗英;;鈣調蛋白激酶在L型鈣通道“run-down”現象發(fā)生及恢復過程中的作用[A];全國第十一屆生化與分子藥理學學術會議論文集[C];2009年

3 郝麗英;;細胞內因子介導的鈣通道調節(jié)新機制[A];中國藥理學會第九次全國會員代表大會暨全國藥理學術會議論文集[C];2007年

4 郝麗英;;鈣調蛋白在鈣通道鈣依賴性易化與失活機制中的作用[A];全國第十一屆生化與分子藥理學學術會議論文集[C];2009年

5 王世強;E.G.Lakatta;程和平;;細胞膜單個L型鈣通道與ryanodine受體間的鈣信號轉導[A];第九次全國生物物理大會學術會議論文摘要集[C];2002年

6 開麗;王中峰;施玉j;胡德耀;劉良明;;阿片受體拮抗劑通過調控血管平滑肌鈣通道增加休克大鼠動脈血壓[A];中國生理學會第21屆全國代表大會暨學術會議論文摘要匯編[C];2002年

7 梁華敏;唐明;劉長金;駱紅艷;宋元龍;胡新武;席姣婭;高琳琳;聶斌;李素蘭;賴玲玲;Juergen HESCHELER;;不同發(fā)育階段M-膽堿能受體對小白鼠胚胎心肌細胞L型鈣通道的調節(jié)[A];中南地區(qū)第六屆生理學學術會議論文摘要匯編[C];2004年

8 祝捷;羅和生;夏虹;;L-型鈣通道α1亞單位的表達及其電流變化在腹瀉型腸易激綜合征模型大鼠結腸中的研究[A];第九次全國消化系統疾病學術會議專題報告論文集[C];2009年

9 于德潔;鮑光宏;林琳;鄭永芳;;非選擇性陽離子通道和L型鈣通道是ECV304內皮細胞Ca~(2+)內流的途徑[A];中國生理學會第21屆全國代表大會暨學術會議論文摘要匯編[C];2002年

10 廖艷萍;湯長發(fā);;鈣通道以及不同運動對線粒體鈣轉運的影響[A];湖南省生理科學會2008年度學術年會論文摘要匯編[C];2008年

中國重要報紙全文數據庫 前1條

1 張潔;鈣離子通道與心臟病[N];醫(yī)藥經濟報;2007年

中國博士學位論文全文數據庫 前10條

1 黃偉鋒;急性淋巴細胞性白血病細胞株中T-型鈣通道和鈉通道的達與功能[D];福建醫(yī)科大學;2015年

2 黃展勤;碘化N－正丁基氟哌啶醇對大鼠心室肌細胞膜L型鈣通道和細胞內游離鈣離子的影響[D];汕頭大學;2005年

3 簡葵歡;一氧化氮對培養(yǎng)大鼠海馬神經元L型鈣通道的調控及其機制[D];第一軍醫(yī)大學;2005年

4 趙清;血管平滑肌L型鈣通道抑制參與重癥休克血管低反應性的發(fā)生[D];第一軍醫(yī)大學;2006年

5 韓冬云;鈣調蛋白對豚鼠心室肌細胞Cav1.2鈣通道的劑量依賴性和鈣依賴性作用[D];中國醫(yī)科大學;2007年

6 侯風青;L-型鈣通道開通劑對缺血性神經元死亡的保護作用及其機制[D];南方醫(yī)科大學;2008年

7 段曉琴;氟作用下OB鈣穩(wěn)態(tài)變化機制探討及L型鈣通道角色研究[D];吉林大學;2015年

8 鄧建平;T型鈣通道在膀胱起搏細胞（ICCs）興奮調控中的作用及機制初探[D];第三軍醫(yī)大學;2013年

9 徐慧;磷酸酶PP2A和PP2B作用于L型鈣通道Cav1.2蛋白C-末端的靶點研究[D];吉林大學;2011年

10 何加強;SHRsp大鼠內臟阻力血管平滑肌鈣通道動力學特征及其調節(jié)[D];中國協和醫(yī)科大學;1996年

中國碩士學位論文全文數據庫 前10條

1 黃沙;DRG神經元T型鈣通道調節(jié)機制的研究[D];河北醫(yī)科大學;2015年

2 朱周鳳;乙酰膽堿調節(jié)大鼠臍血管張力中鉀、鈣通道的參與及其機制研究[D];蘇州大學;2015年

3 趙苗;大鼠海馬L-型鈣通道相互作用蛋白在短暫性前腦缺血后的改變[D];南方醫(yī)科大學;2007年

4 楊惠超;辛伐他汀對心肌肥大鈣通道表達的影響及其機制研究[D];南通大學;2008年

5 黃東陽;P物質對T型鈣通道的調節(jié)以及T型鈣通道在疼痛中的作用[D];河北醫(yī)科大學;2013年

6 毛曉芳;雌激素調控大鼠心肌細胞L型鈣通道表達的作用及其機制[D];華中科技大學;2012年

7 周曉;槲皮素對血管平滑肌細胞電壓依賴型鈣通道的影響[D];泰山醫(yī)學院;2009年

8 李芳萍;成骨細胞中肌動蛋白對cAMP調節(jié)的L-型鈣通道的作用及其分子機制[D];復旦大學;2010年

9 熊明建;雌激素對L型鈣通道調控的研究[D];重慶醫(yī)科大學;2014年

10 蒙滋滋;MicroRNA-101、L型鈣通道β_2亞基及鈉鈣交換體在風濕性心臟病心房顫動中的相關作用研究[D];廣西醫(yī)科大學;2014年

  本文關鍵詞：DRG神經元T型鈣通道調節(jié)機制的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：260111