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抗埃博拉病毒核蛋白抗體的制備與雙抗夾心ELISA檢測方法的建立

發(fā)布時間:2019-10-11 20:33
【摘要】:目的:制備抗埃博拉病毒核蛋白(EBOV NP)單克隆抗體和多克隆抗體,建立針對EBOV NP的ELISA檢測方法。方法:以重組EBOV NP免疫動物并制備多克隆抗體和單克隆抗體。在此基礎(chǔ)上,通過優(yōu)化抗體濃度、包被液等條件建立檢測EBOV NP的雙抗夾心ELISA方法。結(jié)果:制備出了兔多克隆抗體,篩選出2株可分泌單克隆抗體的鼠源雜交瘤細(xì)胞株。Western blot實驗結(jié)果表明兔多抗與鼠單抗的結(jié)合區(qū)域均為N端1~35氨基酸。通過優(yōu)化,建立了針對EBOV NP的雙抗夾心ELISA檢測方法。其線性范圍是31.2~1 000 ng/ml,最低檢測限為2.6 ng/ml。結(jié)論:制備出了抗EBOV核蛋白的高特異性多克隆抗體和單克隆抗體,建立了定量檢測EBOV核蛋白的方法。
【作者單位】: 天津國際生物醫(yī)藥聯(lián)合研究院;南開大學(xué)藥學(xué)院;
【基金】:天津市科技計劃項目(13ZCZDSY04200,13ZCZDSY03800)資助項目
【分類號】:R392

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1 記者 項錚;國際合作加快抗埃博拉病毒疫苗研發(fā)[N];科技日報;2014年

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本文編號:2547653

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