【摘要】：血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)定位于血管中膜,是血管壁的重要組成細(xì)胞之一。在生理?xiàng)l件下, VSMCs通過收縮和舒張調(diào)節(jié)血管張力,并分泌和釋放多種血管調(diào)節(jié)因子以維持血管的正常功能。外界環(huán)境的變化可以導(dǎo)致VSMCs表型由收縮型向合成型轉(zhuǎn)化,進(jìn)而由中膜遷移到內(nèi)膜下間隙。VSMCs異常增殖是動(dòng)脈粥樣硬化、血管再狹窄和高血壓等血管性疾病的病理基礎(chǔ)之一。影響VSMCs增殖的因素包括多種細(xì)胞因子、生長因子及血管活性物質(zhì)的刺激。其中血管緊張素(Angiotensin Ⅱ, Angll)誘導(dǎo)的VSMCs增殖是一條十分重要的途徑。AngⅡ與受體結(jié)合后可提高胞內(nèi)活性氧(ROS)的含量并激活多條信號(hào)通路,最終實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的過度增殖。 谷胱苷肽S-轉(zhuǎn)移酶(Glutathione S-Transferases, GST)是體內(nèi)代謝異源物質(zhì)的一種同工酶超家族,包括α、μ、π等7種亞型,其中GSTp是哺乳動(dòng)物體內(nèi)含量最為豐富的一種亞型,不僅可以參與細(xì)胞內(nèi)ROS的清除,還可通過蛋白與蛋白之間的結(jié)合影響胞內(nèi)一系列信號(hào)分子的活性。由于其在腫瘤細(xì)胞中含量豐富,因而之前的研究主要集中與GSTp與癌癥之間的關(guān)系。最近有報(bào)導(dǎo)顯示GST家族中另一成員GSTm可以抑制VSMCs的增殖和氧化應(yīng)激反應(yīng),提示了GSTm可能通過抑制VSMCs增殖而對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化等疾病進(jìn)行調(diào)控。本實(shí)驗(yàn)室之前的研究表明GSTp可以抑制AngⅡ誘導(dǎo)的VSMCs增殖和遷移。本課題的目的在于比較GSTp與GSTm對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)的VSMCs增殖的抑制作用的強(qiáng)弱,并研究GSTp抑制VSMCs增殖的作用機(jī)制。 本實(shí)驗(yàn)使用MTT法檢測過表達(dá)GSTp、GSTm以及GSTp轉(zhuǎn)移酶活性突變體Y7F對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)的VSMCs增殖的抑制作用；流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)一步檢測VSMCs的細(xì)胞周期；蛋白免疫印跡檢測過表達(dá)GSTp、GSTm和Y7F對(duì)STAT3磷酸化水平的影響；RNAi下調(diào)胞內(nèi)GSTp水平并檢測VSMCs的增殖和STAT3磷酸化情況。 經(jīng)過研究我們發(fā)現(xiàn),GSTp對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)的VSMCs增殖具有抑制作用,并可以降低進(jìn)入S期的細(xì)胞數(shù),且這種抑制作用較GSTm更強(qiáng)；通過RNAi下調(diào)胞內(nèi)GSTp水平后,VSMCs增殖能力增強(qiáng)；轉(zhuǎn)染GSTp可以降低AngⅡ誘導(dǎo)的STAT3磷酸化水平；而GSTp轉(zhuǎn)移酶活性缺失突變體Y7F對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)的VSMCs增殖及STAT3磷酸化的抑制作用較GSTp弱；此外三種GST對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)的STAT1、STAT5磷酸化均沒有影響。 由此我們可以得出GSTp對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)的VSMCs過度增殖及STAT3磷酸化的抑制作用優(yōu)于GSTm。其調(diào)控VSMCs過度增殖的機(jī)制是特異性地抑制增殖相關(guān)信號(hào)通路JAK/STAT中STAT3的磷酸化,從而最終抑制的增殖活動(dòng),且這一調(diào)控機(jī)制與GSTp的轉(zhuǎn)移酶活性有關(guān)。這些結(jié)果表明GSTp在維持VSMCs穩(wěn)定性及動(dòng)脈粥樣硬化等心血管疾病的發(fā)生、發(fā)展中起到了非常重要的作用。
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R363

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 馮剛;李亞強(qiáng);安曉智;左學(xué)騫;于洋;;維生素C聯(lián)合順鉑與單藥順鉑對(duì)Hela細(xì)胞生長狀況影響的比較[J];吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào);2011年04期

2 丁祿榮;郭強(qiáng);孟祥麗;趙玉佳;王佳良;;空心蓮子草抗病毒及作用機(jī)制研究進(jìn)展[J];牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年03期

3 黃宏思;韋星;黃衍強(qiáng);韋連登;;白英乙醇提取物對(duì)人卵巢癌HO8910細(xì)胞體外生長的抑制作用[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2011年07期

4 任曉霞;王顯;龐興學(xué);趙懷兵;許玉韻;;水蛭素對(duì)體外培養(yǎng)的兔血管內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞生長的影響[J];醫(yī)學(xué)綜述;2011年10期

5 唐文;;靈芝三萜類成分抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ活性的研究[J];上海應(yīng)用技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2011年02期

6 王春;許燦新;郭紫芬;李君牧;羅迪賢;廖端芳;李凱;;無或低血清條件下高壓培養(yǎng)促進(jìn)平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞生長[J];中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志;2011年02期

7 肖寧;艾文兵;劉彥廷;馮定坤;;整合素拮抗劑IS201對(duì)GL15膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J];山東醫(yī)藥;2011年28期

8 賈科;吳慶琛;張成;;重樓總皂苷對(duì)胃癌細(xì)胞株MGC-803生長的抑制作用[J];中國生化藥物雜志;2011年04期

9 陳亞紅;田豐收;馮莉莉;陳輝;;酶催化分光光度法測定鹽酸甲氧氯普胺[J];理化檢驗(yàn)(化學(xué)分冊);2011年05期

10 馮建英;邵建國;;中藥抑制消化道惡性腫瘤端粒酶活性作用研究進(jìn)展[J];上海中醫(yī)藥雜志;2011年07期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 李擒龍;晏偉;成勝權(quán);王文勇;張志培;王麗;張靜;王文亮;;RNAi技術(shù)對(duì)APMCF1基因表達(dá)的抑制作用及其對(duì)HepG2細(xì)胞的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

2 陳紅風(fēng);尹劍云;;復(fù)方仙蓉顆粒對(duì)MCF10AT細(xì)胞增殖的影響[A];2011年中醫(yī)外科學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2011年

3 李建華;黃建榮;盧佳怡;樊雪萍;許繼德;;胰島素樣生長因子-I對(duì)白介素-1誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞凋亡的抑制作用[A];中國生理學(xué)會(huì)第21屆全國代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2002年

4 劉學(xué)榮;武發(fā)菊;安芳蘭;董文教;宋玉霞;董金杰;陳苗苗;牟克斌;黃銀君;;不同濃度的乳酸對(duì)BHK-21細(xì)胞生長代謝的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)生物制品學(xué)分會(huì)中國微生物學(xué)會(huì)獸醫(yī)微生物學(xué)專業(yè)委員會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)（第三屆中國獸藥大會(huì)學(xué)術(shù)論壇）論文集[C];2010年

5 賀慶芝;廖端芳;;Daxx及相關(guān)蛋白在介導(dǎo)ox-LDL誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞凋亡中的作用[A];湖南省生理科學(xué)會(huì)2006年度學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要匯編[C];2007年

6 田建廣;韓興海;程大勝;王光毅;朱世輝;夏照帆;;TGF—β1對(duì)小鼠表皮細(xì)胞生長動(dòng)力學(xué)影響的研究[A];第八屆全國燒傷外科學(xué)年會(huì)論文匯編[C];2007年

7 宋宇彤;趙旭;王秉治;;雄性小鼠生殖細(xì)胞Cdc2與P~(70)S6K相關(guān)性的研究[A];第七屆全國酶學(xué)學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2004年

8 何冬梅;張洹;劉革修;鄒飛雁;;Bcl-2短發(fā)夾樣RNA對(duì)HL-60細(xì)胞生長的抑制作用[A];第10屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2005年

9 于小倩;彭雙清;方厚華;;金屬硫蛋白MT-Ⅰ/Ⅱ缺失對(duì)小鼠大腦皮層神經(jīng)元生長發(fā)育的影響[A];中國科學(xué)技術(shù)協(xié)會(huì)第十屆年會(huì)21分會(huì)場論文匯編[C];2008年

10 劉古山;劉滬麗;;細(xì)胞增殖灰色模型的建立[A];第三屆全國控制與決策系統(tǒng)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];1991年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 永誠;美發(fā)現(xiàn)控制細(xì)胞生長的蛋白質(zhì)[N];中國醫(yī)藥報(bào);2000年

2 經(jīng)天;控制細(xì)胞生長的蛋白質(zhì)[N];中藥事業(yè)報(bào);2000年

3 蔣建平 編譯;英專家用人類干細(xì)胞生長出心臟瓣膜[N];中國醫(yī)藥報(bào);2007年

4 孫金花;替卡格雷：血小板抑制作用更強(qiáng)更安全[N];中國醫(yī)藥報(bào);2011年

5 本報(bào)記者 符王潤;生長因子化妝品利器[N];廣東科技報(bào);2011年

6 陳勇;搭建細(xì)胞生長“腳手架”[N];中國醫(yī)藥報(bào);2005年

7 張中橋;中藥能抑制白血病細(xì)胞生長[N];健康報(bào);2007年

8 格林期貨 李冬梅;短暫喘息之后 油價(jià)繼續(xù)狂奔[N];中國證券報(bào);2006年

9 康 旭 冼沛中 許慶文;復(fù)方苦參注射液促使大腸癌細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2006年

10 ;俄專家認(rèn)為抗氧化劑對(duì)癲癇有抑制作用[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2001年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 袁健;手性釕配合物Λ-WH0402的抗腫瘤活性及其作用機(jī)制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2010年

2 樊煒亮;兩個(gè)細(xì)胞自噬基因Barkor與Keap1的鑒定和功能分析[D];浙江大學(xué);2011年

3 熊世鋼;人卵巢癌細(xì)胞株COC1 COC2的建立及自分泌TGF-β促生長和對(duì)腫瘤免疫的影響[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1993年

4 劉聰慧;水蛭提取液對(duì)體外培養(yǎng)恒河猴視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞生長的影響[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2008年

5 王倩;他汀類藥物對(duì)SD乳鼠心肌成纖維細(xì)胞增殖的抑制作用和凋亡的誘導(dǎo)作用及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年

6 何艷華;生理濃度糖皮質(zhì)激素對(duì)內(nèi)毒素誘導(dǎo)的心肌炎癥的抑制作用及機(jī)制研究[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2011年

7 崔堂兵;銀杏黃酮和內(nèi)酯在銀杏細(xì)胞培養(yǎng)中積累的調(diào)控及其藥理研究[D];華南理工大學(xué);2002年

8 吳軍;阿爾茨海默病發(fā)病機(jī)理、診斷及治療的實(shí)驗(yàn)研究[D];華中科技大學(xué);2011年

9 李欣;哇巴因特異性調(diào)節(jié)細(xì)胞生長與Na~+/K~+-ATP酶表達(dá)的關(guān)系[D];華中科技大學(xué);2009年

10 胡玉琳;脫氧核酶及鎖核酸核酶對(duì)HepG2.2.15細(xì)胞HBsAg、HBeAg表達(dá)抑制作用的研究[D];吉林大學(xué);2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 高e，

本文編號(hào)：2539436