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慢性高原病大鼠模型HIF-2α及sTfR表達水平的研究

發(fā)布時間:2017-03-17 22:01

  本文關(guān)鍵詞:慢性高原病大鼠模型HIF-2α及sTfR表達水平的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:背景:CMS嚴(yán)重危害著高原人群的健康,至今仍未明確其發(fā)病機制。有研究顯示HIF對鐵代謝的調(diào)控在CMS發(fā)病機制中發(fā)揮著重要作用。缺氧條件下,HIF-2可能通過與TfR基因轉(zhuǎn)錄起始位點上游的HRE結(jié)合調(diào)控TfR的表達。亦有觀點認為調(diào)控鐵代謝的是HIF-1。前期的研究中已表明缺氧顯著改變了鐵的代謝,但是HIF在CMS中對鐵代謝的調(diào)節(jié)途徑尚未完全闡明。目的:本課題通過檢測CMS大鼠模型肝臟組織中HIF-2α的mRNA及蛋白水平,血清中sTfR、SF的水平,研究CMS發(fā)病的可能機制,進一步探討HIF-2及鐵代謝相關(guān)指標(biāo)與CMS的相關(guān)性,為CMS患者進行臨床干預(yù)提供新的依據(jù)。方法:將50只健康雄性SPF級SD大鼠,從西安運至西寧,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后進行實驗。將大鼠隨機分為6組:低氧7天、15天、30天(CMS)組,常氧7天、15天、30天組。分別于7天、15天、30天后麻醉大鼠,進行檢測:1.血常規(guī)檢測及比濁法測SF;2.采用qRT-PCR法檢測肝臟組織HIF-2α的mRNA水平;3.采用IHC法檢測肝臟組織HIF-2α的蛋白水平;4.采用ELISA法檢測血清中sTfR的蛋白水平;5.實驗數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件,兩組間比較采用獨立樣本t檢驗,多個樣本均數(shù)比較采用方差分析。相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)。結(jié)果:⑴HIF-2αmRNA表達水平,低氧30天(CMS)組高于低氧7天組(P0.05),低氧30天(CMS)組明顯高于常氧30天組(P0.01)。⑵HIF-2α蛋白水平,低氧7天組低于低氧15天組及低氧30天(CMS)組(P0.05);低氧30天(CMS)組高于常氧30天組(P0.01)。⑶sTfR蛋白表達水平,低氧30天(CMS)組高于低氧7天組(P0.05),低氧三組均高于各自常氧對照組(P0.01)。⑷HIF-2α蛋白表達水平與sTfR表達水平無相關(guān)性。結(jié)論:低氧條件下HIF-2α與sTfR隨缺氧時間的增加,其表達逐漸增加,且在CMS中維持高表達,可能與紅系過度增生及對鐵的需求增高有關(guān)。HIF-2α與sTfR表達水平無相關(guān)性,可能系sTfR受多種調(diào)節(jié)因素相互作用的結(jié)果。
【關(guān)鍵詞】:慢性高原病 缺氧誘導(dǎo)因子-2α 可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 血清鐵蛋白
【學(xué)位授予單位】:青海大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R594.3;R-332
【目錄】:
  • 摘要4-5
  • Abstract5-9
  • 主要符號對照表9-11
  • 第1章 引言11-14
  • 第2章 材料與方法14-23
  • 2.1 材料14-16
  • 2.1.1 實驗動物14
  • 2.1.2 主要試劑14
  • 2.1.3 主要儀器設(shè)備14-15
  • 2.1.4 主要分析軟件15-16
  • 2.2 方法16-23
  • 2.2.1 技術(shù)路線16
  • 2.2.2 引物設(shè)計與合成16-17
  • 2.2.3 大鼠分組及CMS模型制備17
  • 2.2.4 取材17
  • 2.2.5 qRT-PCR法檢測大鼠肝臟組織mRNA水平17-20
  • 2.2.6 IHC檢測大鼠肝臟組織HIF-2α的蛋白水平20-21
  • 2.2.7 ELISA法檢測血清sTfR的含量21-22
  • 2.2.8 統(tǒng)計學(xué)方法22-23
  • 第3章 實驗結(jié)果23-34
  • 3.1 第一部分:大鼠一般資料23-25
  • 3.2 第二部分:大鼠肝臟組織HIF-2α mRNA水平25-29
  • 3.2.1 大鼠肝臟組織總RNA提取25-26
  • 3.2.2 HIF-2α mRNA水平測定結(jié)果26-29
  • 3.3 第三部分:大鼠肝臟組織HIF-2α蛋白水平29-32
  • 3.4 第四部分:大鼠血清sTfR蛋白水平32-33
  • 3.5 第五部分:指標(biāo)間的相關(guān)性分析33-34
  • 第4章 討論34-40
  • 第5章 結(jié)論40-41
  • 參考文獻41-44
  • 致謝44-45
  • 附錄A 文獻綜述45-54
  • 參考文獻51-54
  • 附錄B 數(shù)據(jù)資料54-65
  • 作者簡介65

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 任sズ

本文編號:253479


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