慢性高原病大鼠模型HIF-2α及sTfR表達(dá)水平的研究
發(fā)布時(shí)間:2017-03-17 22:01
本文關(guān)鍵詞:慢性高原病大鼠模型HIF-2α及sTfR表達(dá)水平的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:背景:CMS嚴(yán)重危害著高原人群的健康,至今仍未明確其發(fā)病機(jī)制。有研究顯示HIF對(duì)鐵代謝的調(diào)控在CMS發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮著重要作用。缺氧條件下,HIF-2可能通過與TfR基因轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游的HRE結(jié)合調(diào)控TfR的表達(dá)。亦有觀點(diǎn)認(rèn)為調(diào)控鐵代謝的是HIF-1。前期的研究中已表明缺氧顯著改變了鐵的代謝,但是HIF在CMS中對(duì)鐵代謝的調(diào)節(jié)途徑尚未完全闡明。目的:本課題通過檢測(cè)CMS大鼠模型肝臟組織中HIF-2α的mRNA及蛋白水平,血清中sTfR、SF的水平,研究CMS發(fā)病的可能機(jī)制,進(jìn)一步探討HIF-2及鐵代謝相關(guān)指標(biāo)與CMS的相關(guān)性,為CMS患者進(jìn)行臨床干預(yù)提供新的依據(jù)。方法:將50只健康雄性SPF級(jí)SD大鼠,從西安運(yùn)至西寧,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將大鼠隨機(jī)分為6組:低氧7天、15天、30天(CMS)組,常氧7天、15天、30天組。分別于7天、15天、30天后麻醉大鼠,進(jìn)行檢測(cè):1.血常規(guī)檢測(cè)及比濁法測(cè)SF;2.采用qRT-PCR法檢測(cè)肝臟組織HIF-2α的mRNA水平;3.采用IHC法檢測(cè)肝臟組織HIF-2α的蛋白水平;4.采用ELISA法檢測(cè)血清中sTfR的蛋白水平;5.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件,兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),多個(gè)樣本均數(shù)比較采用方差分析。相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。結(jié)果:⑴HIF-2αmRNA表達(dá)水平,低氧30天(CMS)組高于低氧7天組(P0.05),低氧30天(CMS)組明顯高于常氧30天組(P0.01)。⑵HIF-2α蛋白水平,低氧7天組低于低氧15天組及低氧30天(CMS)組(P0.05);低氧30天(CMS)組高于常氧30天組(P0.01)。⑶sTfR蛋白表達(dá)水平,低氧30天(CMS)組高于低氧7天組(P0.05),低氧三組均高于各自常氧對(duì)照組(P0.01)。⑷HIF-2α蛋白表達(dá)水平與sTfR表達(dá)水平無(wú)相關(guān)性。結(jié)論:低氧條件下HIF-2α與sTfR隨缺氧時(shí)間的增加,其表達(dá)逐漸增加,且在CMS中維持高表達(dá),可能與紅系過度增生及對(duì)鐵的需求增高有關(guān)。HIF-2α與sTfR表達(dá)水平無(wú)相關(guān)性,可能系sTfR受多種調(diào)節(jié)因素相互作用的結(jié)果。
【關(guān)鍵詞】:慢性高原病 缺氧誘導(dǎo)因子-2α 可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 血清鐵蛋白
【學(xué)位授予單位】:青海大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R594.3;R-332
【目錄】:
- 摘要4-5
- Abstract5-9
- 主要符號(hào)對(duì)照表9-11
- 第1章 引言11-14
- 第2章 材料與方法14-23
- 2.1 材料14-16
- 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物14
- 2.1.2 主要試劑14
- 2.1.3 主要儀器設(shè)備14-15
- 2.1.4 主要分析軟件15-16
- 2.2 方法16-23
- 2.2.1 技術(shù)路線16
- 2.2.2 引物設(shè)計(jì)與合成16-17
- 2.2.3 大鼠分組及CMS模型制備17
- 2.2.4 取材17
- 2.2.5 qRT-PCR法檢測(cè)大鼠肝臟組織mRNA水平17-20
- 2.2.6 IHC檢測(cè)大鼠肝臟組織HIF-2α的蛋白水平20-21
- 2.2.7 ELISA法檢測(cè)血清sTfR的含量21-22
- 2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法22-23
- 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-34
- 3.1 第一部分:大鼠一般資料23-25
- 3.2 第二部分:大鼠肝臟組織HIF-2α mRNA水平25-29
- 3.2.1 大鼠肝臟組織總RNA提取25-26
- 3.2.2 HIF-2α mRNA水平測(cè)定結(jié)果26-29
- 3.3 第三部分:大鼠肝臟組織HIF-2α蛋白水平29-32
- 3.4 第四部分:大鼠血清sTfR蛋白水平32-33
- 3.5 第五部分:指標(biāo)間的相關(guān)性分析33-34
- 第4章 討論34-40
- 第5章 結(jié)論40-41
- 參考文獻(xiàn)41-44
- 致謝44-45
- 附錄A 文獻(xiàn)綜述45-54
- 參考文獻(xiàn)51-54
- 附錄B 數(shù)據(jù)資料54-65
- 作者簡(jiǎn)介65
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條
1 任sズ
本文編號(hào):253479
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