本文關(guān)鍵詞：表達(dá)鼠源GLP-2嗜酸乳桿菌的構(gòu)建及其對(duì)IBD模型小鼠的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：IBD(Inflammatory bowel disease)是炎性腸病的簡(jiǎn)稱,主要包括潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative Colitis,UC)和克羅恩病(Crohn's Disease,CD)。能夠明確IBD的發(fā)生發(fā)展機(jī)制才能有效緩解、治療IBD。遺憾的是,目前為止的已有研究都沒有明確IBD的具體發(fā)病機(jī)制。但是根據(jù)臨床實(shí)踐中觀察總結(jié)的病理表現(xiàn)、檢測(cè)到的各種病理因素來推斷,IBD的發(fā)病機(jī)制可能與環(huán)境、遺傳、免疫三方面有關(guān)。IBD病程的發(fā)展伴隨腸道炎癥的加劇,會(huì)出現(xiàn)腸上皮細(xì)胞凋亡,腸粘膜通透性增加,腸上皮屏障功能減弱,同時(shí)腸道內(nèi)菌群比例失衡,致病菌增殖轉(zhuǎn)移等現(xiàn)象,嚴(yán)重時(shí)甚至可能導(dǎo)致粘膜出血、潰瘍、糜爛,最終引發(fā)癌變。益生菌可以調(diào)節(jié)病理?xiàng)l件下腸道菌群的比例,由此對(duì)維護(hù)腸內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)有積極作用,而且對(duì)病毒和細(xì)菌誘導(dǎo)的腸道感染、抗生素誘導(dǎo)的腹瀉與免疫病變有不同療效。嗜酸乳桿菌是一種常見的腸道益生菌,它可以通過調(diào)節(jié)腸道菌群比例來維護(hù)微生態(tài)環(huán)境,抑制各種有害菌,減少了體內(nèi)毒素的生成,同時(shí)分泌抗生素類物質(zhì)對(duì)致病微生物產(chǎn)生拮抗作用。因此,嗜酸乳桿菌通過維護(hù)整個(gè)胃腸道的微生態(tài)平衡,增強(qiáng)腸道屏障功能,調(diào)節(jié)相關(guān)免疫反應(yīng),來維護(hù)腸道內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài),在一定程度上達(dá)到了治療IBD的作用。胰高血糖素樣肽2(GLP-2)作為一種腸道營養(yǎng)因子,可以促進(jìn)腸粘膜增殖、抑制其凋亡,從而改善腸道屏障功能,有利于腸道的吸收功能。因此,GLP-2通過刺激隱窩細(xì)胞的增殖,間接抑制黏膜上皮細(xì)胞的凋亡,增強(qiáng)腸道上皮屏障功能和促進(jìn)腸道生長,減輕了結(jié)腸損傷的嚴(yán)重程度,從而有效抑制IBD的病情發(fā)展。本研究根據(jù)GLP-2與嗜酸乳桿菌對(duì)IBD的治療作用,通過嗜酸乳桿菌表達(dá)外源目的蛋白GLP-2。將GLP-2與嗜酸乳桿菌信號(hào)肽重組連接在pMG36e質(zhì)粒上,通過電轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)入感受態(tài)嗜酸乳桿菌中,構(gòu)成重組嗜酸乳桿菌。結(jié)果表明,重組pMG36e質(zhì)粒中擴(kuò)增GLP-2基因與基因庫公布的一致,并且通過Western blot檢測(cè)到重組嗜酸乳桿菌上清液中有GLP-2蛋白表達(dá),然后將成功構(gòu)建的重組嗜酸乳桿菌應(yīng)用到IBD小鼠模型中,通過各個(gè)生理指標(biāo)的檢測(cè),表明重組嗜酸乳桿菌相比嗜酸乳桿菌對(duì)IBD的治療效果顯著增強(qiáng),因?yàn)橹亟M嗜酸乳桿菌能表達(dá)GLP-2蛋白,從而增強(qiáng)療效。重組嗜酸乳桿菌的成功構(gòu)建為后續(xù)研究重組益生菌應(yīng)用于臨床治療IBD奠定了基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：炎性腸病 胰高血糖素樣肽-2 重組嗜酸乳桿菌 治療
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R574;R-332
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 前言9-10
• 第一篇 文獻(xiàn)綜述10-14
• 第二篇 研究?jī)?nèi)容14-47
• 第一章 表達(dá)鼠源GLP-2 嗜酸乳桿菌的構(gòu)建及鑒定14-23
• 1.1 材料14
• 1.2 方法14-17
• 1.3 結(jié)果17-20
• 1.4 討論20-22
• 1.5 小結(jié)22-23
• 第二章 重組質(zhì)粒signal-GLP2 pMG36e在嗜酸乳桿菌中的表達(dá)檢測(cè)23-30
• 2.1 材料23
• 2.2 方法23-28
• 2.3 結(jié)果28-29
• 2.4 討論29
• 2.5 小結(jié)29-30
• 第三章 小鼠炎癥性腸病（IBD）動(dòng)物模型的建立30-34
• 3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物30
• 3.2 實(shí)驗(yàn)試劑及配制30
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法30-31
• 3.4 結(jié)果31-32
• 3.5 討論32-33
• 3.6 小結(jié)33-34
• 第四章 重組嗜酸乳桿菌對(duì)小鼠IBD模型的影響34-47
• 4.1 試劑及試劑配制34
• 4.2 動(dòng)物分組34-35
• 4.3 TNBS誘導(dǎo)35
• 4.4 制作病理切片35
• 4.5 檢測(cè)MPO活性35-36
• 4.6 檢測(cè)炎性因子36-37
• 4.7 結(jié)果37-45
• 4.8 討論45-46
• 4.9 小結(jié)46-47
• 結(jié)論47-48
• 參考文獻(xiàn)48-55
• 縮寫55-56
• 作者簡(jiǎn)介56-57
• 致謝57

【共引文獻(xiàn)】

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中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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  本文關(guān)鍵詞：表達(dá)鼠源GLP-2嗜酸乳桿菌的構(gòu)建及其對(duì)IBD模型小鼠的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：251573