【摘要】：目的探討轉(zhuǎn)鐵蛋白受體1(TfR1)對(duì)小鼠海馬神經(jīng)元生長(zhǎng)與分化的影響。方法取胚胎18.5 d小鼠原代海馬神經(jīng)元培養(yǎng),培養(yǎng)7 d后使用TfR1 shRNA p GFP-V-RS干擾質(zhì)粒轉(zhuǎn)染小鼠海馬原代神經(jīng)元使TfR1基因沉默,采用綠色熒光蛋白(GFP)分析及Western blotting技術(shù)檢測(cè)TfR1 shRNA的轉(zhuǎn)染效率;4’6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)及TUNEL法檢測(cè)干擾后海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況,免疫熒光技術(shù)檢測(cè)凋亡后神經(jīng)細(xì)胞骨架的變化及神經(jīng)元突起生長(zhǎng)的形態(tài)特征。結(jié)果 TfR1 shRNA質(zhì)粒能有效使神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)TfR1基因沉默;TfR1基因沉默后,原代海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡率增加,細(xì)胞骨架部分崩解,且神經(jīng)元樹突突起長(zhǎng)度明顯增長(zhǎng)(P0.05)。結(jié)論轉(zhuǎn)鐵蛋白受體1可通過調(diào)控小鼠海馬神經(jīng)元樹突的生長(zhǎng)來影響海馬神經(jīng)元的分化。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of transferrin receptor 1 (TfR1) on the growth and differentiation of hippocampal neurons in mice. Methods the primary hippocampal neurons of mice were cultured at 18.5 days of embryo. After 7 days of culture, the primary hippocampal neurons of mice were transformed with TfR1 shRNA p GFP-V-RS interference plasmid to silence the TfR1 gene. Green fluorescent protein (GFP) analysis and Western blotting technique were used to detect the transfection efficiency of TfR1 shRNA. 4 the apoptosis of hippocampal neurons after interference was detected by (DAPI) and TUNEL, and the changes of neuronal skeleton and the morphological characteristics of neuronal processes after apoptosis were detected by immunofluorescence technique. Results TfR1 shRNA plasmid could effectively silence TfR1 gene in neural cells, and after TfR1 gene silencing, the apoptosis rate of primary hippocampal neurons increased, the cytoskeleton partially disintegrated, and the dendritic process length of neurons increased significantly (P 0.05). Conclusion Transferrin receptor 1 can affect the differentiation of hippocampal neurons by regulating the dendritic growth of hippocampal neurons in mice.
【作者單位】： 漯河醫(yī)學(xué)高等�？茖W(xué)校解剖學(xué)教研室;漯河醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校分子醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：河南省科技廳重點(diǎn)科技攻關(guān)項(xiàng)目(132102310111) 漯河醫(yī)學(xué)高等�？茖W(xué)校基金(2013-S-LMC01)
【分類號(hào)】：R338

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本文編號(hào)：2482067