【摘要】：背景 自1934年Goldblatt首次通過鉗夾狗的雙側(cè)腎動(dòng)脈引起狗的血壓升高以來，采用鉗夾腎動(dòng)脈制作高血壓模型被越來越多用于心血管疾病的研究，其中最常采用的是兩腎一夾（2K1C）技術(shù)。現(xiàn)已證實(shí)，血管緊張素II（AngII）在2K1C高血壓模型血壓的發(fā)展和維持過程中起重要作用。血管緊張素II受體主要有兩個(gè)亞型：1型（AT1）和2型（AT2），且已證實(shí)AngII主要作用于AT1，產(chǎn)生血管收縮、細(xì)胞增殖等作用。小鼠AT1有兩個(gè)亞型：AT1a和AT1b。研究發(fā)現(xiàn)，AT1a在小鼠血壓的調(diào)節(jié)過程中起主要作用，AT1b為血管壁主要表達(dá)亞型，并且介導(dǎo)AngII誘導(dǎo)的血管收縮反應(yīng)。隨著轉(zhuǎn)基因及基因敲除技術(shù)的發(fā)展，小鼠被越來越多的用于心血管疾病的研究，因此成功制作小鼠腎血管性高血壓模型顯得很有必要。但目前國內(nèi)主要采用大鼠制作該模型，尚未見采用小鼠的報(bào)道，并且高血壓對小鼠AT1亞型表達(dá)的影響目前仍不清楚。 目的 我們首先建立小鼠2K1C腎血管性高血壓動(dòng)物模型，并利用該模型研究高血壓對小鼠AT1亞型表達(dá)的影響，旨在為高血壓的基礎(chǔ)研究及防治提供一些理論依據(jù)。 方法 本實(shí)驗(yàn)研究對象為8周齡至12周齡，體重24g至28g的健康雄性無特定病原體（SPF）級C57BL/6小鼠，由汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。取17只小鼠，隨機(jī)分為假手術(shù)組（Sham，8只）和兩腎一夾組（2K1C，，9只）。2K1C組采用口徑為0.12mm U形銀夾鉗夾右側(cè)腎動(dòng)脈，Sham組除未在右側(cè)腎動(dòng)脈套上U形夾外，其余操作完全相同。手術(shù)當(dāng)天計(jì)為第0天，尾套法測清醒狀態(tài)下小鼠收縮壓，選取第27天收縮壓大于140mmHg的小鼠作為高血壓小鼠。術(shù)后第28天處死小鼠，稱取體重及心臟和雙側(cè)腎臟重量，計(jì)算心臟和雙側(cè)腎臟與體重的比值（mg/g）；采用HE染色法觀察小鼠心臟和腎臟病理改變情況；采用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）和限制性內(nèi)切酶（EcoRI和HapII）技術(shù)分析小鼠心臟、腎臟、腎上腺、下丘腦、垂體、腦干、腹主動(dòng)脈等部位AT1亞型表達(dá)情況；采用血管環(huán)張力檢測系統(tǒng)檢測AngII誘導(dǎo)離體小鼠腹主動(dòng)脈的收縮反應(yīng)性。應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果 1.在實(shí)驗(yàn)過程中，Sham組小鼠收縮壓維持在101.9±14.4mmHg至114.1±17.1mmHg之間，未見升高，而2K1C組小鼠收縮壓呈明顯上升趨勢，最高收縮壓為156.0±17.7mmHg（第23天）。其中第27天，Sham組和2K1C組小鼠收縮壓分別是114.1±17.1mmHg和150.9±11.9mmHg。兩組對比有高度顯著性差異（P 0.01）。 2.術(shù)后第28天，稱取兩組小鼠體重?zé)o明顯差異。與Sham組相比，2K1C組小鼠心臟重量、左側(cè)腎臟重量、心臟與體重之比及左側(cè)腎臟與體重之比均明顯增加，而右側(cè)腎臟重量和右側(cè)腎臟與體重之比均明顯減小。兩組對比有高度顯著性差異（P 0.01）。 3. 2K1C組右側(cè)腎臟體積較Sham組明顯減小。HE染色發(fā)現(xiàn)，2K1C組小鼠心肌細(xì)胞增粗，右側(cè)腎臟部分腎小球和腎小管出現(xiàn)萎縮，左側(cè)腎臟腎小球出現(xiàn)代償性肥大，亦發(fā)現(xiàn)左側(cè)腎臟內(nèi)小動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞排列紊亂，細(xì)胞外基質(zhì)增多。 4.采用RT-PCR和限制性內(nèi)切酶（EcoRI和HapII）技術(shù)分析發(fā)現(xiàn)，在Sham組和2K1C組小鼠的心臟、腎臟、腎上腺、下丘腦、垂體和腦干組織中，均為AT1a亞型表達(dá)占主導(dǎo)地位，兩組間未見明顯差異。但在Sham組小鼠腹主動(dòng)脈中是AT1b亞型表達(dá)占優(yōu)，在2K1C組小鼠的腹主動(dòng)脈中則是AT1a亞型表達(dá)占優(yōu)。 5. 10nM AngII誘導(dǎo)Sham組和2K1C組離體小鼠腹主動(dòng)脈環(huán)的收縮反應(yīng)性分別是49.0±13.8%和25.6±11.2%。兩組對比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P 0.05）。 結(jié)論 1.根據(jù)小鼠收縮壓的升高及心臟和腎臟形態(tài)學(xué)的改變，表明我們利用C57BL/6小鼠成功建立2K1C腎血管性高血壓模型。 2.在2K1C高血壓模型中，AT1a變成腹主動(dòng)脈支配性亞型，并且伴隨對應(yīng)的AngII介導(dǎo)的血管收縮反應(yīng)下降。這表明在高血壓的發(fā)展過程中，AT1a在血管壁可能扮演與AT1b不同的角色。
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【學(xué)位授予單位】：汕頭大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R544.1;R-332

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 孫琪;黃榮桂;鄭興中;梁萌;;一腎一夾腎血管性高血壓動(dòng)物模型的制作[J];臨床軍醫(yī)雜志;2007年06期

2 徐立朋,秦旭平,廖端芳;氯沙坦調(diào)節(jié)兩腎一夾型高血壓大鼠血管重塑及其與細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2的關(guān)系[J];中國動(dòng)脈硬化雜志;2003年01期

本文編號：2430726