【摘要】：目的： 1.觀察不同發(fā)育階段大鼠外周血和主要臟器包括心、肝,肺、大腦、腎臟中內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)數(shù)量的變化。 2.探討不同發(fā)育階段大鼠外周血和主要臟器包括心、肝,肺、大腦、腎臟中EPCs功能的變化。 3.明確在不同發(fā)育階段大鼠外周血和主要臟器包括心、肝,肺、大腦、腎臟中EPCs可能存在的差異和功能變化及衰老程度,為探索EPCs可能與年齡相關(guān)性疾病的發(fā)生和發(fā)展的關(guān)系及為EPCs的臨床應(yīng)用尋找更理想的種子細(xì)胞奠定基礎(chǔ)。 方法： 1.選取育齡Wistar大鼠6只(4只雌性,2只雄性),做近交系培養(yǎng),于三代以后在子系中繼續(xù)挑選種鼠做近親繁殖,并在發(fā)育過程中根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求分批挑選健康大鼠按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分組飼養(yǎng),到達(dá)預(yù)定時(shí)間后按實(shí)驗(yàn)方案取材檢測；選取0.5月齡、2月齡、8月齡及18月齡Wistar雄性大鼠各10只,2%戊巴比妥納麻醉后,腹主動(dòng)脈取血(EDTA.K2抗凝),同時(shí)取主要臟器包括心、肝,肺、大腦、腎臟的同部位等重各組織制備成單細(xì)胞懸液,以CD34-FITC和CD133-PE雙染標(biāo)記后用流式細(xì)胞術(shù)檢測血及組織懸液中EPCs數(shù)目；另取各組大鼠心、肝,肺、大腦、腎臟的相同部位各組織制備成病理臘塊,戳取每個(gè)組織的相同部位制備成組織芯片,免疫組化法檢測組織中CD34和CD133染色陽性EPCs; 2.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Elisa法)檢測各組大鼠血漿中VEGF和NOS水平,檢測大鼠心、肝,肺、大腦、腎臟的相同部位等重組織中β-半乳糖苷酶的含量。 結(jié)果： 1.2月齡和8月齡大鼠循環(huán)血及大鼠心、肝,肺、大腦、腎臟EPCs流式檢測數(shù)量明顯高于0.5月齡組(P0.05)；2月齡和8月齡組相比無明顯差異(P0.05)；18月齡組與2月齡和8月齡組比較則明顯減少(P0.05)；0.5月齡組與18月齡組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。 2.2月齡和8月齡大鼠外周血及大鼠心、肝,肺、大腦、腎臟EPCs免疫組化染色陽性表達(dá)明顯高于0.5月齡組(P0.05)；2月齡和8月齡組相比無明顯差異(P0.05)；18月齡組與2月齡和8月齡組比較則明顯減少(P0.05)；0.5月齡組與18月齡組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。 3.血漿中VEGF水平及NOS的水平在老年大鼠明顯減弱,2月齡和8月齡比較變化不明顯(P0.05),0.5月齡最高；大鼠心、肝、肺、腦、腎臟的相同部位各組織中β-半乳糖苷酶的水平逐漸增高。 結(jié)論： 1.流式細(xì)胞術(shù)檢測：隨著大鼠的生長發(fā)育,外周血中EPCs數(shù)量呈規(guī)律性變化,乳鼠組和老年組較少,而青、中年組較多； 2.免疫組化檢測顯示：隨著大鼠的生長發(fā)育,主要臟器包括心、肝、肺、大腦、腎中EPCs數(shù)量呈規(guī)律性變化,0.5月齡組和18月齡組較少,而2、8月齡組較多；大鼠體內(nèi)EPCs數(shù)目的變化可能與生長發(fā)育階段有密切的關(guān)系； 3.血漿中VEGF和NOS水平逐漸減弱反應(yīng)內(nèi)皮祖細(xì)胞的功能逐漸減弱,大鼠心、肝,肺、大腦、腎臟的相同部位各組織中β-半乳糖苷酶的水平逐漸增強(qiáng)反應(yīng)內(nèi)皮祖細(xì)胞在機(jī)體不同發(fā)育階段不斷衰老。 4.0.5月齡組與18月齡組大鼠外周血及主要臟器內(nèi)皮祖細(xì)胞的數(shù)量雖然相近,但18月齡組功能卻明顯衰退。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R363

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本文編號(hào)：2420801