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狂犬病口服疫苗的誘餌制作及免疫中和抗體檢測

發(fā)布時間:2019-01-07 11:52
【摘要】:狂犬病又名恐水癥,即民間所說的瘋狗病,是由狂犬病病毒引起的以感染中樞神經(jīng)為特征的一種人畜共患的傳染病。狂犬病病毒能感染所有的溫血動物,一經(jīng)感染發(fā)病,幾乎100%死亡,是目前已知的死亡率最高的傳染病之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織調(diào)查,目前全世界每年死于狂犬病的人數(shù)多達55000人,而絕大多數(shù)發(fā)生在發(fā)展中國家,并且主要發(fā)生在不發(fā)達的農(nóng)村和山區(qū)。目前防治狂犬病的最有效的方法是在暴露后進行高免血清封閉以及免疫狂犬病疫苗,人用的狂犬病疫苗基本都是滅活苗,而動物使用的疫苗主要是弱毒苗,也有少量是進口的滅活苗。由于注射疫苗價格較高,注射不方便等缺點給防治和消滅狂犬病帶來了極大的困難。 本課題在以前實驗室研究的口服疫苗基礎(chǔ)之上,根據(jù)國外發(fā)達國家野外投放口服疫苗的經(jīng)驗,依據(jù)犬的生物學(xué)特性,利用廣西現(xiàn)有的經(jīng)濟資源研制了多種狂犬病口服疫苗誘餌。通過口服途徑免疫犬,在第0天、14天、28天、42天、56天和70天采集血液分離血清,用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)和快速免疫熒光抑制實驗(RFFIT)檢測了犬免疫口服疫苗后中和抗體水平,驗證了本實驗室研制的口服疫苗的效果。ELISA檢測結(jié)果顯示通過口服疫苗免疫的犬產(chǎn)生了中和抗體,抗體水平0.5IU/ml,產(chǎn)生了免疫保護作用;通過RFFIT試驗,犬只也檢測到了中和抗體,中和抗體水平0.5IU/ml,兩次免疫組中和抗體水平非常接近0.5IU/ml,跟陽性對照組結(jié)果基本一致,說明口服疫苗對實驗動物具有一定的保護作用。ELISA和RFFIT檢測這兩種方法實驗結(jié)果存在一定的差異,需要進一步的研究。本次實驗結(jié)果也顯示了口服疫苗是有一定的免疫效果的,需要進一步改進提高疫苗質(zhì)量。總之,本實驗證明了狂犬病口服疫苗的可行性,為進一步推廣和應(yīng)用口服疫苗免疫野生動物、流浪犬、家犬打下了一定的基礎(chǔ)。
[Abstract]:Rabies, also known as hydrophobia, is a zoonotic disease caused by rabies virus. Rabies virus can infect all warm-blooded animals. According to the World Health Organization, the number of people who die of rabies every year in the world is as high as 55000, and the vast majority of the deaths occur in developing countries, and mainly in the underdeveloped rural and mountainous areas. At present, the most effective way to prevent and cure rabies is to block the high immune serum after exposure and to immunize rabies vaccine. The rabies vaccine used in human is basically inactivated vaccine, but the vaccine used in animals is mainly attenuated vaccine. There are also a small number of imported inactivated seedlings. Because of the high price and inconvenient injection, it is difficult to prevent and eliminate rabies. On the basis of the oral vaccine previously studied in laboratory, according to the experience of foreign developed countries in field administration of oral vaccine, according to the biological characteristics of dogs, a variety of rabies oral vaccine decoys were developed by using the existing economic resources in Guangxi. Dogs were immunized orally, and blood serum was collected on day 0, day 14, day 28, day 42, day 56 and day 70. (ELISA) and (RFFIT) were used to detect the neutralizing antibody level of canine oral vaccine. The results of ELISA test showed that the dogs immunized with oral vaccine produced neutralizing antibody, and the antibody level was 0.5 IU / ml, which resulted in immune protection. Through the RFFIT test, neutralizing antibodies were also detected in dogs. Neutralizing antibody levels were 0.5 IU / ml. The neutralization antibody level in the two immunization groups was very close to 0.5 IUP / ml, which was basically the same as that in the positive control group. The results show that oral vaccine has certain protective effect on experimental animals. There are some differences between ELISA and RFFIT test results, which need further study. The results also show that oral vaccine is immune to a certain extent, need to further improve the quality of the vaccine. In conclusion, this experiment proved the feasibility of oral rabies vaccine, which laid a foundation for the further promotion and application of oral vaccine against wild animals, stray dogs and domestic dogs.
【學(xué)位授予單位】:廣西大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號】:R392.1

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本文編號:2403631

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