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流式細(xì)胞術(shù)分析PMA誘導(dǎo)THP-1分化為巨噬細(xì)胞的表型特征

發(fā)布時(shí)間:2018-12-24 10:59
【摘要】:目的用流式細(xì)胞術(shù)明確單獨(dú)使用PMA誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞分化而來(lái)的巨噬細(xì)胞的分化情況。方法首先用PMA刺激THP-1細(xì)胞分化為巨噬細(xì)胞,再分別使用LPS、IFN-γ和IL-6將細(xì)胞誘導(dǎo)為M1型巨噬細(xì)胞,用IL-4、IL-13和IL-6將細(xì)胞誘導(dǎo)為M2型巨噬細(xì)胞。顯微鏡下觀察三種細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變,并用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各細(xì)胞主要CD分子表達(dá)的差異。結(jié)果當(dāng)THP-1分化為巨噬細(xì)胞后變?yōu)橘N壁生長(zhǎng),細(xì)胞形態(tài)呈較規(guī)則的圓形或橢圓形;M1和M2細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,細(xì)胞突起較明顯,細(xì)胞顆粒度較大。巨噬細(xì)胞表面與抗原提呈功能相關(guān)的CD分子的表達(dá)均較低,大部分呈陰性;而M1和M2細(xì)胞表面這些CD分子的表達(dá)均較高。結(jié)論單獨(dú)使用PMA刺激THP-1細(xì)胞所分化而來(lái)的巨噬細(xì)胞抗原提呈能力較弱,基本處于靜息狀態(tài)。
[Abstract]:Objective to determine the differentiation of macrophages induced by PMA alone in THP-1 cells by flow cytometry. Methods PMA was used to stimulate the differentiation of THP-1 cells into macrophages, then LPS,IFN- 緯 and IL-6 were used to induce M 1 macrophages, and IL-4,IL-13 and IL-6 were used to induce M 2 macrophages. The morphological changes of the three kinds of cells were observed under microscope, and the differences of the expression of main CD molecules in the three cells were detected by flow cytometry. Results when THP-1 differentiated into macrophages, it became adherent to the wall, and the shape of the cells was regular round or ellipse, M1 and M2 cells were irregular in shape, the processes of cells were obvious, and the granularity of the cells was larger. The expression of CD molecules related to antigen presentation on macrophages was lower, most of them were negative, while those on M1 and M2 cells were higher. Conclusion the ability of antigen presentation of macrophages induced by PMA alone was weak and remained in a resting state.
【作者單位】: 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院比較醫(yī)學(xué)中心中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所衛(wèi)生部人類疾病比較醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室國(guó)家中醫(yī)藥管理局人類疾病動(dòng)物模型三級(jí)實(shí)驗(yàn)室新發(fā)再發(fā)傳染病動(dòng)物模型研究北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金-青年科學(xué)基金項(xiàng)目(81301437) 科技部重大專項(xiàng)(2014ZX10001001-001-004,2014ZX10001001-002-006)
【分類號(hào)】:R392

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本文編號(hào):2390536

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