【摘要】：目的克隆人轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)和4個受體基因片段,構(gòu)建酵母表達(dá)載體,為應(yīng)用酵母雙雜交篩選與TGF-β1相互作用的TβRⅡ區(qū)域提供技術(shù)支持。方法提取人血液中RNA,逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)為c DNA,PCR擴(kuò)增TGF-β1和4個受體(TβRⅡ-A、TβRⅡ-B、TβRⅡ-C、TβRⅡ-D)基因片段,雙酶切后,分別插入酵母雙雜交表達(dá)載體p GBKT7和p GADT7;經(jīng)過PCR擴(kuò)增、雙酶切和DNA測序鑒定后,構(gòu)建質(zhì)粒p GBKT7-TGF-β1和p GADT7-TβRⅡ-A、p GADT7-TβRⅡ-B、p GADT7-TβRⅡ-C和p GADT7-TβRⅡ-D。結(jié)果成功擴(kuò)增TGF-β1基因(1 200 bp)和TβRⅡ-A(453bp)、TβRⅡ-B(366 bp)、TβRⅡ-C(276 bp)和TβRⅡ-D(165 bp)基因片段,經(jīng)PCR、雙酶切和DNA測序鑒定插入到酵母雙雜交載體序列正確。結(jié)論成功構(gòu)建p GBKT7-TGF-β1和p GADT7-TβRⅡ-A、p GADT7-TβRⅡ-B、p GADT7-TβRⅡC和p GADT7-TβRⅡ-D酵母雙雜交表達(dá)載體。
[Abstract]:Objective to clone human transforming growth factor 尾 1 (TGF- 尾 1) and four receptor gene fragments, construct yeast expression vector, and provide technical support for screening T 尾 R 鈪，

本文編號：2390102