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TGF-β1和TGF-βⅡ型受體酵母表達載體構建

發(fā)布時間:2018-12-23 18:38
【摘要】:目的克隆人轉化生長因子β1(TGF-β1)和4個受體基因片段,構建酵母表達載體,為應用酵母雙雜交篩選與TGF-β1相互作用的TβRⅡ區(qū)域提供技術支持。方法提取人血液中RNA,逆轉錄轉為c DNA,PCR擴增TGF-β1和4個受體(TβRⅡ-A、TβRⅡ-B、TβRⅡ-C、TβRⅡ-D)基因片段,雙酶切后,分別插入酵母雙雜交表達載體p GBKT7和p GADT7;經過PCR擴增、雙酶切和DNA測序鑒定后,構建質粒p GBKT7-TGF-β1和p GADT7-TβRⅡ-A、p GADT7-TβRⅡ-B、p GADT7-TβRⅡ-C和p GADT7-TβRⅡ-D。結果成功擴增TGF-β1基因(1 200 bp)和TβRⅡ-A(453bp)、TβRⅡ-B(366 bp)、TβRⅡ-C(276 bp)和TβRⅡ-D(165 bp)基因片段,經PCR、雙酶切和DNA測序鑒定插入到酵母雙雜交載體序列正確。結論成功構建p GBKT7-TGF-β1和p GADT7-TβRⅡ-A、p GADT7-TβRⅡ-B、p GADT7-TβRⅡC和p GADT7-TβRⅡ-D酵母雙雜交表達載體。
[Abstract]:Objective to clone human transforming growth factor 尾 1 (TGF- 尾 1) and four receptor gene fragments, construct yeast expression vector, and provide technical support for screening T 尾 R 鈪,

本文編號:2390102

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