【摘要】：目的①觀察動情期非妊娠及圍植入期真孕和假孕小鼠子宮內(nèi)膜的光鏡結(jié)構(gòu)變化特點;②觀察動情期非妊娠及圍植入期真孕和假孕小鼠子宮內(nèi)膜的超微結(jié)構(gòu)特點;③觀察圍植入期小鼠子宮內(nèi)膜IGFBP-4和IGF-2的表達分布狀況;④探討IGFBP-4和IGF-2在圍植入期真孕小鼠子宮內(nèi)膜表達的關(guān)系。 方法以成年未經(jīng)產(chǎn)雌性昆明種小鼠為研究對象,以動情期雌鼠分別與正常雄鼠和輸精管結(jié)扎雄鼠3:1合籠,次晨查到陰栓記作真(假)孕1 d。分別在1～8 d各將120只真孕和120只假孕小鼠頸椎脫臼處死,剖腹取其子宮并取動情期非妊娠小鼠子宮作對照,4%多聚甲醛固定,分別進行HE染色觀察真孕和假孕小鼠子宮內(nèi)膜的光鏡結(jié)構(gòu)變化;電鏡觀察真孕及假孕3～6 d小鼠子宮內(nèi)膜的超微結(jié)構(gòu)改變;免疫組化SP法檢測子宮內(nèi)膜IGFBP-4和IGF-2的表達;顯微成像系統(tǒng)拍攝圖像并進行計算機圖像分析系統(tǒng)分析免疫組化染色結(jié)果。另取120只假孕4 d小鼠,手術(shù)開腹提取其雙角子宮,一側(cè)注射0.1 mL植物油誘導(dǎo)蛻膜反應(yīng),一側(cè)未作任何處理作為對照,于假孕8 d頸椎脫臼處死小鼠,剖腹取其處理側(cè)子宮,4%多聚甲醛固定,分別進行HE染色觀察小鼠子宮內(nèi)膜光鏡結(jié)構(gòu)變化,免疫組化檢測IGFBP-4和IGF-2蛋白的表達,顯微成像系統(tǒng)拍攝圖像分析免疫組化染色結(jié)果。 結(jié)果①HE染色結(jié)果,真孕1～8 d小鼠子宮內(nèi)膜呈動態(tài)變化趨勢,植入前期(孕1～3 d)固有層腺體增多,腺腔開始變得不規(guī)則,出現(xiàn)少量分泌物,血管增生,基質(zhì)細(xì)胞排列疏松、基質(zhì)水腫;植入期(孕4～5 d)固有層腺體進一步增多,腺腔變得極不規(guī)則,充滿分泌物,血管進一步增生、彎曲并呈螺旋狀分布,基質(zhì)細(xì)胞變得十分肥大,內(nèi)膜進一步增厚;植入后期(孕6～8 d),除具有上述兩期特點外,基質(zhì)細(xì)胞完全增殖分化為蛻膜細(xì)胞,腺體減少。②透射電鏡結(jié)果,真孕3～6 d小鼠子宮內(nèi)膜腺上皮、腔上皮及基質(zhì)細(xì)胞中分布有大量的各類細(xì)胞器,與動情非妊娠小鼠相比要豐富的多,尤其是在植入期,腺上皮、腔上皮及基質(zhì)細(xì)胞中線粒體、高爾基復(fù)合體、粗(滑)面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、分泌顆粒等非常豐富,基質(zhì)細(xì)胞肥大水腫、核大而圓,胞質(zhì)內(nèi)還有豐富的糖原、脂滴及溶酶體;假孕3～6 d小鼠子宮內(nèi)膜的超微結(jié)構(gòu)變化不甚明顯,只在假孕3～4 d出現(xiàn)類似于真孕3～4 d內(nèi)膜的超微結(jié)構(gòu)改變,腺上皮、腔上皮及基質(zhì)細(xì)胞中分布有大量的細(xì)胞器,較動情非妊娠小鼠豐富,假孕5～6 d內(nèi)膜變化幾乎與動情非妊娠小鼠無差別。③免疫組化染色結(jié)果,真孕1～8 d,IGFBP-4在真孕3 d小鼠子宮內(nèi)膜開始表達,陽性產(chǎn)物主要分布于子宮內(nèi)膜腺上皮、腔上皮和基質(zhì)細(xì)胞的胞質(zhì)中,于5～6 d表達最強,7～8 d表達減弱;假孕1～8 d,IGFBP-4在假孕5 d小鼠子宮內(nèi)膜開始表達,主要分布于子宮內(nèi)膜腺上皮和腔上皮細(xì)胞胞質(zhì)中,其表達水平與動情未孕期小鼠相似,但在基質(zhì)細(xì)胞不表達;真孕1～8 d,IGF-2主要表達于子宮內(nèi)膜腺上皮、腔上皮和基質(zhì)細(xì)胞胞質(zhì)中,5～8 d表達最強;假孕1～8 d,IGF-2在假孕3 d小鼠子宮內(nèi)膜開始表達,主要分布于腺上皮、腔上皮及基質(zhì)細(xì)胞胞質(zhì)中,其表達水平與動情未孕期小鼠類似;IGFBP-4與IGF-2在人工蛻膜化小鼠子宮內(nèi)膜均有表達,主要分布于腺上皮細(xì)胞胞質(zhì)中和植物油誘導(dǎo)后的整個蛻膜細(xì)胞胞質(zhì)中。 結(jié)論①真孕及假孕1～8 d小鼠子宮內(nèi)膜形態(tài)學(xué)改變呈動態(tài)變化趨勢,以植入期變化最為明顯;②真孕3～8 d小鼠子宮內(nèi)膜持續(xù)表達IGFBP-4,提示IGFBP-4可能在小鼠胚胎植入中發(fā)揮重要的生理生化作用;③真孕1～8 d小鼠子宮內(nèi)膜廣泛表達IGF-2,提示IGF-2可能在小鼠胚胎植入中發(fā)揮重要的作用;④假孕1～8 d小鼠子宮內(nèi)膜IGFBP-4與IGF-2的表達規(guī)律,提示二者的表達不僅受自體激素的調(diào)控,也和胚胎與子宮內(nèi)膜的刺激與分泌有關(guān);⑤IGFBP-4與IGF-2分別在真孕及人工蛻膜化小鼠子宮內(nèi)膜蛻膜細(xì)胞的表達,提示二者有可能共同參與小鼠胚胎植入及植入后子宮內(nèi)膜的蛻膜化過程。
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【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R321

【參考文獻】

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本文編號：2369059