發(fā)布時(shí)間：2018-11-21 15:21

【摘要】：目的探討磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)在腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNFα)誘導(dǎo)細(xì)胞程序性壞死過程中的調(diào)控作用與機(jī)制。方法利用慢病毒介導(dǎo)的RNA干涉技術(shù)構(gòu)建PI3K催化亞基p110α敲低、RIP1敲低及RIP1與p110α雙敲低的L929細(xì)胞株,Western印跡或RT-PCR驗(yàn)證敲低效果。同時(shí),利用Western印跡檢測(cè)AKT和混合系激酶區(qū)域樣蛋白(MLKL)磷酸化及MLKL多聚化。流式細(xì)胞術(shù)和顯微拍照術(shù)檢測(cè)細(xì)胞死亡。結(jié)果 PI3K和AKT抑制劑及p110α敲低都可降低AKT磷酸化水平,并阻斷TNFα誘導(dǎo)的L929細(xì)胞程序性壞死。敲低RIP1并不抑制TNFα與Z-VAD聯(lián)合誘導(dǎo)的L929細(xì)胞程序性壞死,但這種RIP1非依賴性細(xì)胞程序性壞死能為p110α敲低抑制。此外,p110α敲低可抑制TNFα與Z-VAD聯(lián)合誘導(dǎo)的MLKL活化及其介導(dǎo)的細(xì)胞程序性壞死。結(jié)論 PI3K是調(diào)控細(xì)胞程序性壞死的重要靶點(diǎn),可通過RIP1依賴及非依賴性方式激活,進(jìn)而活化AKT與MLKL,啟動(dòng)TNFα誘導(dǎo)的細(xì)胞程序性壞死。
[Abstract]:Objective to investigate the role and mechanism of phosphatidylinositol 3-kinase (phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K) in the process of programmed necrosis induced by tumor necrosis factor 偽 (tumor necrosis factor alpha,TNF 偽. Methods L929 cell lines with PI3K catalytic subunit p110 偽 knockdown, RIP1 knockdown and RIP1 and p110 偽 double knockout were constructed by lentivirus mediated RNA interference. Western blot or RT-PCR were used to verify the knock down effect. At the same time, AKT and mixed kinase-like protein (MLKL) phosphorylation and MLKL polymerization were detected by Western blotting. Cell death was detected by flow cytometry and microphotography. Results both PI3K and AKT inhibitors and p110 偽 knockout could decrease the level of AKT phosphorylation and block the programmed necrosis of L929 cells induced by TNF 偽. Low RIP1 knockout did not inhibit programmed necrosis of L929 cells induced by TNF 偽 and Z-VAD, but this RIP1 independent cell programmed necrosis could inhibit p110 偽 knockdown. In addition, p110 偽 knockout can inhibit the MLKL activation induced by TNF 偽 and Z-VAD and its mediated cellular programmed necrosis. Conclusion PI3K is an important target to regulate programmed necrosis of cells, which can be activated by RIP1 dependent and independent way, and then activate AKT and MLKL, to initiate TNF 偽 induced programmed necrosis of cells.
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31201041) 國(guó)家重大科技專項(xiàng)重大新藥創(chuàng)制資助項(xiàng)目(2014ZX09304313-003)
【分類號(hào)】：R329.2

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 盧偉成;細(xì)胞的壽命無限嗎?[J];自然雜志;1978年01期

2 鄭麗君;夏文美;童村;;HeLa細(xì)胞的培養(yǎng)與使用[J];醫(yī)藥工業(yè);1983年10期

3 岳奎元;細(xì)胞的社會(huì)關(guān)系[J];生物學(xué)雜志;1987年06期

4 李保興;細(xì)胞大小芻議[J];生物學(xué)通報(bào);1999年08期

5 陳必良,穆潤(rùn)華,馬向東,王德堂,辛?xí)匝?鄭維國(guó),嚴(yán)瑞蘭;特異性反義寡核苷酸對(duì)含HPV16的SiHa細(xì)胞的作用[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2000年03期

6 Paul Nurse ,王福彭;細(xì)胞及其增殖、調(diào)控機(jī)制的發(fā)現(xiàn)歷程[J];世界科學(xué);2002年04期

7 Frederick Cahn;王全勝;;培養(yǎng)基動(dòng)物細(xì)胞用微孔載體及其生物材料[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).生物醫(yī)學(xué)工程分冊(cè);1990年06期

8 樂志培，，王仁云;細(xì)胞第二代謝體系[J];生命的化學(xué)(中國(guó)生物化學(xué)會(huì)通訊);1994年01期

9 楊頻,薛紹武;細(xì)胞無機(jī)化學(xué)研究中需要關(guān)注的幾個(gè)方面[J];化學(xué)進(jìn)展;2004年04期

10 陶慧敏;王文文;關(guān)燕清;;細(xì)胞程序式死亡途徑的新進(jìn)展[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;2008年05期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 劉令九;趙小琳;岳立廣;徐艷玲;李淑焱;侯麗娟;隋紅;姜崴;謝寶生;李勇;劉兵;李海濱;;細(xì)胞工廠培養(yǎng)人胚肺二倍體細(xì)胞制備凍干甲型肝炎減毒活疫苗[A];2011中國(guó)生物制品年會(huì)暨第十一次全國(guó)生物制品學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

2 宋征;;應(yīng)用Bhas42細(xì)胞試驗(yàn)檢測(cè)22個(gè)腫瘤促長(zhǎng)基因標(biāo)志物[A];2013年（第三屆）中國(guó)藥物毒理學(xué)年會(huì)暨藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)研究論壇論文摘要[C];2013年

3 谷彬;張輝;喻澤蘭;;依地福新對(duì)Jurkat細(xì)胞生長(zhǎng)抑制機(jī)制的研究[A];2009醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十一屆全國(guó)腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

4 武冬梅;李秀娥;葛莉亞;袁星;;雙酚-A對(duì)MCF-7細(xì)胞伏安行為的影響[A];第五屆全國(guó)環(huán)境化學(xué)大會(huì)摘要集[C];2009年

5 李曉飛;呂超;吳小榮;韓慶玲;王杰;易宗春;;鉛和鋁離子對(duì)K562細(xì)胞紅系分化的影響[A];全國(guó)生化/工業(yè)與衛(wèi)生毒理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2010年

6 宋為民;郭波;;復(fù)方甘草酸苷對(duì)HaCaT細(xì)胞表達(dá)AQP3的影響[A];2011全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

7 劉魯明;錢華;陳震;林勝友;黃挺;;參麥注射液對(duì)腫瘤細(xì)胞環(huán)核甘酸的影響[A];全國(guó)中醫(yī)藥科研與教學(xué)改革研討會(huì)論文集[C];2000年

8 張雪玲;糜漫天;李等松;韋娜;張乾勇;楊志祥;;Lovastatin對(duì)HL-60細(xì)胞HMG-CoA還原酶mRNA表達(dá)及細(xì)胞增殖功能的影響[A];中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)特殊營(yíng)養(yǎng)第五屆學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2002年

9 房佰俊;廖聯(lián)明;楊少光;史明霞;趙春華;;胎兒骨髓源原始干細(xì)胞分離純化及其生物學(xué)特性的初步研究[A];第九屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2003年

10 李曉軍;朱傳東;汪萍;賈麗;陳芳芳;夏欣一;陳龍邦;;人Id3基因在A549細(xì)胞中的表達(dá)及對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)功能的研究[A];第六屆全國(guó)免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2008年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者 吳春燕 通訊員 寧習(xí)源 吳劍鵬;人類情緒可影響干細(xì)胞生長(zhǎng)[N];光明日?qǐng)?bào);2014年

2 馮衛(wèi)東;老化干細(xì)胞可轉(zhuǎn)變成年輕干細(xì)胞[N];科技日?qǐng)?bào);2012年

3 常麗君;科學(xué)家闡明核內(nèi)周期運(yùn)作機(jī)制[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

4 本版編輯邋杜華斌 邰舉 毛文波 顧鋼 陳超 何屹 毛黎;2007年世界科技發(fā)展回顧(六)[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

5 通訊員 李靜;廈大教授發(fā)現(xiàn)細(xì)胞防癌“玄機(jī)”[N];廈門日?qǐng)?bào);2009年

6 永誠(chéng);美發(fā)現(xiàn)控制細(xì)胞生長(zhǎng)的蛋白質(zhì)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2000年

7 記者 張孟軍;加找到刺激干細(xì)胞生長(zhǎng)分子[N];科技日?qǐng)?bào);2001年

8 張?zhí)锟?干細(xì)胞研究精彩紛呈[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2011年

9 邵薇/編譯;T細(xì)胞的非凡能力[N];北京科技報(bào);2003年

10 經(jīng)天;控制細(xì)胞生長(zhǎng)的蛋白質(zhì)[N];中藥事業(yè)報(bào);2000年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 蔣淵;缺氧肝癌細(xì)胞中HIF-1和NF-κB的相互作用及其分子機(jī)制的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 張廣;肝星狀細(xì)胞在肝癌細(xì)胞惡性行為中的作用及機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2015年

3 付托;活性氧族在CHO細(xì)胞補(bǔ)料批次培養(yǎng)中的作用、機(jī)制及調(diào)控研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2016年

4 楊小超;陽(yáng)離子配體修飾的納米金用于細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)和微囊自組裝研究[D];重慶大學(xué);2010年

5 葉玲玲;基于生物素誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)的HEK293細(xì)胞多基因代謝工程改造[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2011年

6 梁國(guó)斌;產(chǎn)朊假絲酵母生產(chǎn)谷胱甘肽過程控制與優(yōu)化[D];江南大學(xué);2008年

7 楊海虹;鈣池操縱性鈣內(nèi)流在人肺腺癌A549細(xì)胞中的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

8 常玉娟;基于Nrf2/ARE通路辛開苦降方胃康寧對(duì)人胃粘膜上皮細(xì)胞SOD2、GSTP1相關(guān)調(diào)控機(jī)制的研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2015年

9 楊麗君;人Fcα/μR的表達(dá)與功能的初步研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

10 李曼;DRC3f及eRF3b在肝病發(fā)生發(fā)展中作用機(jī)制的初步研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 柯自立;硫酸鎂對(duì)6-羥基多巴胺損傷的SH-SY5Y細(xì)胞的保護(hù)作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 李婷婷;細(xì)胞穿透肽VP22對(duì)抑癌蛋白PTEN體外抗腫瘤作用影響的研究[D];川北醫(yī)學(xué)院;2015年

3 王靜;環(huán)氧化物酶抑制劑NS-398聯(lián)合奧沙利鉑對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞增殖和凋亡的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

4 鄭祿祿;番茄紅素對(duì)轉(zhuǎn)染SOD1-G93A的PC12細(xì)胞線粒體的保護(hù)作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

5 宋晨源;氯化銨對(duì)人正常肝細(xì)胞系changliver中二氫乳清酸脫氫酶表達(dá)的影響[D];鄭州大學(xué);2015年

6 張莉;白藜蘆醇體外抑制腸道病毒71型的作用機(jī)制研究[D];蘇州大學(xué);2015年

7 高華武;富硒芪云抗腫瘤作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2015年

8 宋加奎;丹參對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞化療敏感性的影響[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2015年

9 許雅鑫;尼古丁對(duì)NCI-H1975和NCI-H460細(xì)胞促進(jìn)增殖作用及對(duì)PI3K/Akt通路的影響研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

10 高娜;加減駐景方含藥血清對(duì)二氯化鈷誘導(dǎo)后ARPE-19細(xì)胞表達(dá)VEGF及HIF-1α的影響[D];青海大學(xué);2015年

本文編號(hào)：2347366