【摘要】：乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)在肝炎引起的肝癌病變中作為一個多功能調(diào)節(jié)因子起著關鍵的作用.對HBx的功能有非常多的體外研究報導,而由于HBx蛋白難以溶解和穩(wěn)定使得體外的研究報導非常少.我們根據(jù)肝癌患者中最常見的截短突變體,在大腸桿菌包涵體中重組表達了一個保留了第12~127位氨基酸的、N端和C端截斷的突變體HBxΔNΔC,并使用變復性的方法將其復性溶解.分子篩顯示HBxΔNΔC為單體;圓二色譜顯示HBxΔNΔC包含有5%的α-螺旋,30%的β-折疊和65%的其他結構.復性的HBxΔNΔC能從人HepG2細胞中拉下(pull-down)腫瘤抑制因子p53和DDB1蛋白,它還能刺激肝細胞的遷移.腹腔注射1μg/g的HBxΔNΔC能明顯刺激小鼠肝的生長.這些結果顯示HBxΔNΔC具有一定的生物學活性,它可以用來研究體外的HBx結構和分子作用機制.
[Abstract]:Hepatitis B virus X protein (HBx) plays a key role as a multifunctional regulatory factor in Hepatitis induced liver cancer. There are many studies on the function of HBx in vitro, but there are very few in vitro due to the difficulty of dissolving and stabilizing the HBx protein. According to the most common truncated mutants in patients with hepatocellular carcinoma, we expressed a mutant HBx 螖 N 螖 C, which retains the amino acid at position 121127in E. coli inclusion body, and refolded and dissolved it by renaturation. The molecular sieve showed HBx 螖 N 螖 C as monomer, and the circular dichroism showed that HBx 螖 N 螖 C contained 5% 偽 -helix, 30% 尾 -folding and 65% other structures. Renatured HBx 螖 N 螖 C can pull down the tumor suppressor (pull-down) p53 and DDB1 proteins from human HepG2 cells, and it can also stimulate the migration of hepatocytes. Intraperitoneal injection of 1 渭 g / g HBx 螖 N 螖 C significantly stimulated liver growth in mice. These results indicate that HBx 螖 N 螖 C has certain biological activity, which can be used to study the structure and molecular mechanism of HBx in vitro.
【作者單位】： 復旦大學生命科學學院生理學與生物物理學系;復旦大學生殖與發(fā)育研究所;上海工業(yè)菌株工程技術研究中心;
【基金】：supported by grants from Chinese High-tech Research and Development Program(No.2013AA102803B,2014AA021301) Shanghai Science and Technology Commission(No.13DZ2252000) Shanghai Leading Academic Discipline Project(Project number B111) National Talent Training Fund in Basic Research of China
【分類號】：R373.21

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 徐啟豐;雞感染乙型肝炎病毒的實驗研究[J];科學通報;1986年18期

2 徐啟豐;雞能感染乙型肝炎病毒[J];自然雜志;1986年03期

3 孫富林,宋寶云,趙林,李愛華,何祥旺;雞感染乙型肝炎病毒的研究[J];自然雜志;1987年11期

4 尹泳浩;;乙型肝炎病毒在龜體內(nèi)感染[J];國外醫(yī)學.流行病學傳染病學分冊;1990年04期

5 姚偉;“特別審訊”乙型肝炎病毒[J];健康必讀;2004年02期

6 ArbeitskreisBlut,方新華;乙型肝炎病毒[J];The Chinese-German Journal of Clinical Oncology;2001年06期

7 徐小元,斯崇文;乙型肝炎病毒調(diào)控機制的研究進展[J];臨床內(nèi)科雜志;2002年04期

8 倪艷;;細解乙型肝炎病毒[J];肝博士;2006年01期

9 鄭永利;趙連三;;乙型肝炎病毒的生態(tài)學研究進展[J];華西醫(yī)學;2008年03期

10 朱丹丹;邵彬;李建鋒;;淺談我國乙型肝炎病毒的研究現(xiàn)狀及展望[J];科協(xié)論壇(下半月);2008年04期

相關會議論文 前10條

1 任鵬;;乙型肝炎病毒變異研究進展[A];第五次全國中青年檢驗醫(yī)學學術會議論文匯編[C];2006年

2 何芳;唐紅;劉麗;王u&;劉鳳君;周陶友;趙連三;劉聰;;丙型肝炎病毒核心蛋白抑制乙型肝炎病毒轉(zhuǎn)錄與復制的實驗研究[A];第五屆全國肝臟疾病臨床暨中華肝臟病雜志成立十周年學術會議論文匯編[C];2006年

3 李莉;朱明芬;李剛;盧建溪;陳偉;;一種新的乙型肝炎病毒全基因組克隆技術的建立[A];第五屆全國肝臟疾病臨床暨中華肝臟病雜志成立十周年學術會議論文匯編[C];2006年

4 侯偉;劉克洲;沃健兒;李敏偉;;針對乙型肝炎病毒S基因1O-23 DNAzyme的設計及體外特異切割作用的研究[A];2005年浙江省感染病、肝病學術會議論文匯編[C];2005年

5 皇甫竟坤;董菁;鄧紅;成軍;施雙雙;洪源;任喜民;李莉;;乙型肝炎病毒前S2基因序列異質(zhì)性的研究[A];中華醫(yī)學會第七次全國感染病學術會議論文匯編[C];2001年

6 李丹;林納;陳治新;陳豐霖;王小眾;;乙型肝炎病毒X蛋白與細胞色素C氧化酶Ⅲ特異性結合的研究[A];中華醫(yī)學會第七次全國消化病學術會議論文匯編（下冊）[C];2007年

7 李越;王琦;成軍;倫永志;洪源;林原;;乙型肝炎病毒e抗原肝細胞結合蛋白1在大腸桿菌中的重組表達[A];中華醫(yī)學會全國第九次感染病學學術會議論文匯編[C];2006年

8 包晗;趙錦榮;顏真;;一種新的乙型肝炎病毒基因分型方法的建立[A];2011新型疫苗與抗體創(chuàng)制關鍵技術及質(zhì)量控制研討會論文集[C];2011年

9 董菁;成軍;王勤環(huán);施雙雙;洪源;皇甫競坤;王剛;李莉;斯崇文;;乙型肝炎病毒逆轉(zhuǎn)錄酶區(qū)基因序列準種與變異特點研究[A];中華醫(yī)學會第七次全國感染病學術會議論文匯編[C];2001年

10 張玲玲;;乙型肝炎病毒基因分型[A];2006年貴州省醫(yī)學會消化及內(nèi)鏡學分會學術大會論文匯編[C];2006年

相關重要報紙文章 前1條

1 馮衛(wèi)東;乙型肝炎病毒結構圖繪制成功[N];科技日報;2008年

相關博士學位論文 前10條

1 任盛;乙型肝炎病毒激活的纖連蛋白通過兩種不同的機制促進病毒的維持和復制[D];武漢大學;2016年

2 于士顏;乙型肝炎病毒多聚酶抑制Ⅰ型干擾素誘生機制的研究[D];復旦大學;2011年

3 趙文亮;乙型肝炎病毒基因突變檢測與分析平臺研發(fā)[D];第四軍醫(yī)大學;2014年

4 李伯安;乙型肝炎病毒e抗原相互作用蛋白基因的克隆化及功能的初步研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2004年

5 林旭;乙型肝炎病毒復制性增強的機理研究[D];復旦大學;2001年

6 黃清玲;乙型肝炎病毒全基因水平對HepG2細胞的影響及其機制的初步研究[D];福建醫(yī)科大學;2008年

7 劉偉;潛在生存優(yōu)勢的乙型肝炎病毒突變株的篩選及肝炎病毒重組的研究[D];復旦大學;2010年

8 樂鑫;乙型肝炎病毒（HBV）誘導環(huán)加氧酶2（COX-2）表達的分子機制研究[D];武漢大學;2011年

9 陳金煙;2447nt-489nt乙型肝炎病毒剪接特異性蛋白與肝細胞蛋白相互作用研究[D];福建醫(yī)科大學;2010年

10 焦伯延;乙型肝炎病毒HBx蛋白與肝細胞蛋白的相互作用及對其功能的影響[D];福建醫(yī)科大學;2011年

相關碩士學位論文 前10條

1 魏振宏;質(zhì)粒用于乙型肝炎病毒DNA定量檢測室內(nèi)質(zhì)量控制的效果評價[D];蘭州大學;2016年

2 葉琳;生物信息學方法對乙型肝炎病毒的分型和重組檢測[D];復旦大學;2009年

3 張v，

本文編號：2321620