【摘要】：乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)在肝炎引起的肝癌病變中作為一個(gè)多功能調(diào)節(jié)因子起著關(guān)鍵的作用.對(duì)HBx的功能有非常多的體外研究報(bào)導(dǎo),而由于HBx蛋白難以溶解和穩(wěn)定使得體外的研究報(bào)導(dǎo)非常少.我們根據(jù)肝癌患者中最常見(jiàn)的截短突變體,在大腸桿菌包涵體中重組表達(dá)了一個(gè)保留了第12~127位氨基酸的、N端和C端截?cái)嗟耐蛔凅wHBxΔNΔC,并使用變復(fù)性的方法將其復(fù)性溶解.分子篩顯示HBxΔNΔC為單體;圓二色譜顯示HBxΔNΔC包含有5%的α-螺旋,30%的β-折疊和65%的其他結(jié)構(gòu).復(fù)性的HBxΔNΔC能從人HepG2細(xì)胞中拉下(pull-down)腫瘤抑制因子p53和DDB1蛋白,它還能刺激肝細(xì)胞的遷移.腹腔注射1μg/g的HBxΔNΔC能明顯刺激小鼠肝的生長(zhǎng).這些結(jié)果顯示HBxΔNΔC具有一定的生物學(xué)活性,它可以用來(lái)研究體外的HBx結(jié)構(gòu)和分子作用機(jī)制.
[Abstract]:Hepatitis B virus X protein (HBx) plays a key role as a multifunctional regulatory factor in Hepatitis induced liver cancer. There are many studies on the function of HBx in vitro, but there are very few in vitro due to the difficulty of dissolving and stabilizing the HBx protein. According to the most common truncated mutants in patients with hepatocellular carcinoma, we expressed a mutant HBx 螖 N 螖 C, which retains the amino acid at position 121127in E. coli inclusion body, and refolded and dissolved it by renaturation. The molecular sieve showed HBx 螖 N 螖 C as monomer, and the circular dichroism showed that HBx 螖 N 螖 C contained 5% 偽 -helix, 30% 尾 -folding and 65% other structures. Renatured HBx 螖 N 螖 C can pull down the tumor suppressor (pull-down) p53 and DDB1 proteins from human HepG2 cells, and it can also stimulate the migration of hepatocytes. Intraperitoneal injection of 1 渭 g / g HBx 螖 N 螖 C significantly stimulated liver growth in mice. These results indicate that HBx 螖 N 螖 C has certain biological activity, which can be used to study the structure and molecular mechanism of HBx in vitro.
【作者單位】： 復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院生理學(xué)與生物物理學(xué)系;復(fù)旦大學(xué)生殖與發(fā)育研究所;上海工業(yè)菌株工程技術(shù)研究中心;
【基金】：supported by grants from Chinese High-tech Research and Development Program(No.2013AA102803B,2014AA021301) Shanghai Science and Technology Commission(No.13DZ2252000) Shanghai Leading Academic Discipline Project(Project number B111) National Talent Training Fund in Basic Research of China
【分類(lèi)號(hào)】：R373.21

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