【摘要】：目的：研究骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分泌因子對實(shí)驗(yàn)性Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的影響,并初步探討其抗Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的作用機(jī)制,為臨床應(yīng)用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)提供理論依據(jù)。 方法：體內(nèi)試驗(yàn)①采用全骨髓貼壁法分離和純化大鼠BMSCs,傳至第3代后收集細(xì)胞融合至80%-90%時(shí)上清液獲取干細(xì)胞分泌因子。②以卵白蛋白為變應(yīng)原致敏大鼠,制備大鼠含IgE的抗卵蛋白血清。③制備大鼠同種被動(dòng)皮膚過敏(passive cutaneous anaphylaxls, PCA)動(dòng)物模型,用分光光度比色法測量藍(lán)斑的OD值,觀察干細(xì)胞分泌因子對大鼠PCA的影響。④抗卵蛋白血清被動(dòng)致敏大鼠腸系膜肥大細(xì)胞,觀察干細(xì)胞分泌因子對親同種細(xì)胞抗體介導(dǎo)的肥大細(xì)胞脫顆粒的影響。⑤利用組胺所致小鼠耳廓皮膚毛細(xì)血管通透性增高,采用分光光度比色法測定藍(lán)斑OD值,觀察干細(xì)胞分泌因子對組胺所致小鼠耳廓毛細(xì)血管通透性的作用。體外實(shí)驗(yàn)①采用全骨髓貼壁法分離和純化大鼠BMSCs,收集第3-4代細(xì)胞達(dá)到80%-90%融合時(shí)的上清液獲取干細(xì)胞分泌因子。離心去沉淀后-20℃凍存?zhèn)溆谩＂诜蛛x培養(yǎng)大鼠腹腔肥大細(xì)胞(Rat peritoneal mast cell, RPMC)。③分別以大鼠抗卵蛋白血清特異性被動(dòng)致敏腹腔肥大細(xì)胞和用Compound48/80非特異性致敏肥大細(xì)胞。④添加干細(xì)胞分泌因子和酮替芬干預(yù)后,采用專性底物a-N-苯甲酰-DL-精氨酸-p-硝基苯胺(BAPNA),運(yùn)用分光光度比色法測定大鼠腹腔肥大細(xì)胞釋放類胰蛋白酶的影響；甲苯胺藍(lán)染色法觀察肥大細(xì)胞脫顆粒的影響。 結(jié)果：整體條件下,①干細(xì)胞分泌因子和酮替芬對大鼠PCA均有明顯抑制作用,與模型組相比有差異顯著性(P0.01)；②干細(xì)胞分泌因子和酮替芬可抑制親同種細(xì)胞抗體介導(dǎo)的肥大細(xì)胞脫顆粒,與模型組相比有差異顯著性(P0.01)；③干細(xì)胞分泌因子和酮替芬可以抑制組胺所致小鼠耳廓毛細(xì)血管通透性增高的作用,與模型組比較均有顯著性差異(P0.01)；但干細(xì)胞分泌因子的抑制作用均不如酮替芬組(P0.05)。體外實(shí)驗(yàn)可見：干細(xì)胞分泌因子、酮替芬對特異性和非特異性誘發(fā)肥大細(xì)胞脫顆粒和釋放類胰蛋白酶均具有抑制作用,與模型對照組相比差異有顯著性意義(P0.01)；但干細(xì)胞分泌因子抑制的效果均不如酮替芬組(P0.05)。 結(jié)論：干細(xì)胞分泌因子具有抗Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的作用。其作用機(jī)制與穩(wěn)定肥大細(xì)胞膜,抑制肥大細(xì)胞脫顆粒,減少顆粒體中的活性介質(zhì)釋放有關(guān)。
[Abstract]:Objective: to study the effect of bone marrow mesenchymal stem cell secretory factor on experimental type 鈪，

本文編號：2292743