【摘要】：目的:體外培養(yǎng)大鼠胚胎中腦腹側(cè)來源神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs),觀察其生長(zhǎng)及誘導(dǎo)分化培養(yǎng)特點(diǎn)。方法:取孕12.5~14.5 d的SD大鼠,采用機(jī)械分離法獲取中腦腹側(cè)組織,剪碎并吹打成單細(xì)胞懸液后,以2×10~5個(gè)細(xì)胞/ml的密度接種到無血清NSCs培養(yǎng)基中以神經(jīng)球法培養(yǎng)。培養(yǎng)神經(jīng)球5~7 d后,按原密度進(jìn)行傳代培養(yǎng),并取第三代培養(yǎng)的神經(jīng)球用含10%胎牛血清(FBS)分化培養(yǎng)液分化培養(yǎng),分化培養(yǎng)7 d后行免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定。結(jié)果:神經(jīng)球呈巢蛋白(nestin)陽性,誘導(dǎo)分化后的細(xì)胞作分別呈微管蛋白(βIII-Tubulin)、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)陽性。結(jié)論:經(jīng)神經(jīng)球法培養(yǎng)得到的大鼠胚胎中腦腹側(cè)來源神經(jīng)干細(xì)胞可自我增值,并可誘導(dǎo)分化成神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞。
[Abstract]:Aim: to observe the growth and differentiation characteristics of neural stem cells derived from ventral mesencephalon of rat by (NSCs), culture in vitro. Methods: the ventral mesencephalic tissue was obtained from 12.5d 14.5 day pregnant SD rats. After being cut and blown into single cell suspension, 2 脳 10 ~ 5 cells / ml density was inoculated into serum-free NSCs medium and cultured with neurosphere method. The neurospheres were cultured for 5 ~ 7 days and cultured according to the original density. The third generation of neurons were cultured in the medium containing 10% fetal bovine serum (FBS). After 7 days of differentiation, the neurons were identified by immunocytochemistry. Results: the neuronal cells showed nestin (nestin) positive, the differentiated cells showed tubulin (尾 III-Tubulin) and glial fibrillary acidic protein (GFAP) (GFAP). Conclusion: neural stem cells derived from the ventral midbrain of rat embryos cultured by the method of neurosphere can increase their value and differentiate into neurons and glial cells.
【作者單位】： 昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科;昆明醫(yī)科大學(xué)分子臨床醫(yī)學(xué)研究院暨云南省干細(xì)胞和再生醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81360197,81241126) 云南省教育廳科學(xué)研究基金項(xiàng)目(2013C227) 云南省科技廳-昆明醫(yī)學(xué)院聯(lián)合專項(xiàng)(2014FB041)
【分類號(hào)】：R329.2

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本文編號(hào)：2288966