發(fā)布時間：2018-10-11 15:30

【摘要】：目的研究從凍存SD大鼠脂肪組織中分離培養(yǎng)脂肪干細胞(ADSC)的可行性。方法取健康SD大鼠股溝處脂肪組織,用100 m L/L二甲基亞砜聯(lián)合900 m L/L胎牛血清(FBS)作為凍存劑,凍存于液氮中。3個月后復(fù)蘇凍存的脂肪組織,進行ADSC的分離培養(yǎng),觀察細胞的生長狀況及形態(tài)特征。取第3代細胞,CCK-8法繪制其生長曲線,免疫熒光技術(shù)檢測CD29、CD45、CD90的表達;分別用成脂、成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液進行誘導(dǎo)分化,油紅O、茜素紅染色鑒定細胞分化情況。結(jié)果從凍存SD大鼠脂肪組織中分離得到的ADSC形態(tài)為長梭形纖維樣,具有較好的增殖能力,生長曲線為典型的"S"型;免疫熒光技術(shù)證實細胞強表達CD29、CD90,CD45陰性;分離的細胞經(jīng)成脂誘導(dǎo)后油紅O染色為陽性,經(jīng)成骨誘導(dǎo)后茜素紅染色為陽性。結(jié)論從凍存SD大鼠脂肪組織中能夠分離出ADSC。
[Abstract]:Objective to study the feasibility of isolation and culture of adipose stem cell (ADSC) from adipose tissue of cryopreserved SD rats. Methods Adipose tissue in the groin of healthy SD rats was frozen with 100ml / L dimethyl sulfoxide (DMSO) combined with 900ml / L fetal bovine serum (FBS) as cryopreservation agent and frozen in liquid nitrogen. After 3 months of resuscitation, ADSC was isolated and cultured. The growth and morphological characteristics of the cells were observed. The growth curve of the cells was plotted by CCK-8 method, the expression of CD29,CD45,CD90 was detected by immunofluorescence, the differentiation was induced by fat-forming and osteogenic medium, and the differentiation of cells was identified by oil red Oand alizarin red staining. Results the morphology of ADSC isolated from the adipose tissue of cryopreserved SD rats was long fusiform, with a good proliferative ability and a typical "S" type of growth curve, and the strong expression of CD29,CD90,CD45 in the cells was confirmed by immunofluorescence technique. Oil red O staining was positive after adipogenic induction and alizarin red staining was positive after osteogenesis induction. Conclusion ADSC. can be isolated from adipose tissue of cryopreserved SD rats.
【作者單位】： 中國人民解放軍武漢總醫(yī)院醫(yī)學(xué)實驗科;
【分類號】：R329.2

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本文編號：2264560