【摘要】：目的:探討干擾素-α(IFN-α)是否通過誘導(dǎo)干擾素誘導(dǎo)蛋白16(IFI16)表達抑制人腦血管外膜成纖維細胞(HBVAFs)增殖與促進細胞凋亡。方法:應(yīng)用轉(zhuǎn)染針對IFI16基因的小干擾RNA(siRNA)和/或IFN-α瞬時干預(yù)體外培養(yǎng)的HBVAFs。通過蛋白免疫印跡(Western blot)法和Real-time PCR法測定細胞中IFI16、P53、P21蛋白和mRNA表達水平的變化。用MTT法檢測細胞活力,流式細胞術(shù)測定細胞周期及凋亡。結(jié)果:與未干預(yù)組比較,IFN-α(2 000~5 000 kU/L)干預(yù)HBVAFs后,IFI16蛋白表達水平明顯上調(diào),但不同濃度IFN-α組之間無統(tǒng)計學(xué)差異。使用2 000 kU/L IFN-α可誘導(dǎo)HBVAFs中P53及P21蛋白和mRNA表達水平上調(diào),同時抑制細胞增殖與促進細胞凋亡。但在轉(zhuǎn)染了IFI16 siRNA的HBVAFs中IFN-α的上述作用受到了抑制。結(jié)論:IFN-α抑制HBVAFs增殖與促進其凋亡的作用可能部分與其誘導(dǎo)IFI16表達有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to investigate whether interferon- 偽 (IFN- 偽) induces the expression of interferon-inducible protein 16 (IFI16) to inhibit the proliferation of human cerebrovascular adventitia fibroblasts (HBVAFs) and promote apoptosis. Methods: small interfering RNA (siRNA) transfected with IFI16 gene and / or IFN- 偽 were used to interfere with HBVAFs. in vitro. The expression of IFI16,P53,P21 protein and mRNA were detected by Western blot (Western blot) and Real-time PCR. MTT assay was used to detect cell viability, and flow cytometry was used to detect cell cycle and apoptosis. Results: compared with the control group, the expression of IFI16 protein increased significantly after IFN- 偽 (2 000 ~ 5 000 kU/L) intervention in HBVAFs, but there was no significant difference between the different concentration of IFN- 偽 groups. The expression of p53 and P21 protein and mRNA in HBVAFs was up-regulated by 2 000 kU/L IFN- 偽, and the proliferation of cells was inhibited and apoptosis was promoted at the same time. However, the above effects of IFN- 偽 in HBVAFs transfected with IFI16 siRNA were inhibited. Conclusion: the inhibitory effect of IFN- 偽 on the proliferation and apoptosis of HBVAFs may be partly related to its induction of IFI16 expression.
【作者單位】： 貴州省人民醫(yī)院心內(nèi)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(No.81260030)
【分類號】：R363

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本文編號：2263820