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人胎盤來源間充質干細胞的生物學性能及體外生物相容性

發(fā)布時間:2018-09-17 16:19
【摘要】:背景:目前作為骨組織工程的種子細胞主要是骨髓間充質干細胞,但其在骨髓中的含量極低,只有0.001%-0.01%,同時分離純化難度大。目的:探討人胎盤來源間充質干細胞的生物學性能及與三維多孔羥基磷灰石陶瓷支架的生物相容性。方法:人胎盤來源間充質干細胞進行形態(tài)學觀察和流式細胞儀鑒定;將人胎盤來源間充質干細胞經成骨、成脂、成軟骨誘導分化培養(yǎng)3周,進行茜素紅S、油紅O、甲苯胺藍染色,鑒定其多向分化潛能。將人胎盤來源間充質干細胞接種于三維多孔羥基磷灰石陶瓷支架,通過DAPI染色、掃描電鏡觀察人胎盤來源間充質干細胞在支架表面的黏附情況。結果與結論:(1)人胎盤來源間充質干細胞呈長梭形,大小均勻一致;(2)人胎盤來源間充質干細胞高表達CD29,CD90等干細胞表面標志,不表達CD45,CD106等造血細胞表面標志;(3)誘導培養(yǎng)3周后,茜素紅S染色可以看到紅色的礦化結節(jié),油紅O染色觀察到紅色的脂滴,甲苯胺藍染色可以看到軟骨細胞染成藍色;(4)DAPI染色、掃描電鏡均觀察到人胎盤來源間充質干細胞在支架表面能很好地黏附,可以作為組織工程良好的種子細胞。
[Abstract]:Background: bone marrow mesenchymal stem cells are the main seed cells in bone tissue engineering at present, but their content in bone marrow is very low, only 0.001-0.01, and it is difficult to isolate and purify. Aim: to investigate the biological properties of human placenta derived mesenchymal stem cells and their biocompatibility with three dimensional porous hydroxyapatite ceramic scaffolds. Methods: the mesenchymal stem cells derived from human placenta were observed by morphological observation and identified by flow cytometry, the mesenchymal stem cells from human placenta were cultured for 3 weeks after osteogenesis, lipogenesis and cartilage formation, and then stained with alizarin red S, oil red Oand toluidine blue. Its multidirectional differentiation potential was identified. Human placenta derived mesenchymal stem cells were inoculated into three dimensional porous hydroxyapatite ceramic scaffolds. The adhesion of human placenta derived mesenchymal stem cells on the scaffold surface was observed by DAPI staining. Results and conclusions: (1) the mesenchymal stem cells from human placenta were spindle-shaped and uniform in size; (2) human placenta derived mesenchymal stem cells expressed high expression of CD29,CD90 and other stem cell surface markers, but did not express CD45,CD106 and other hematopoietic cell surface markers; (3) after 3 weeks of induction, the mesenchymal stem cells were cultured for 3 weeks. Alizarin red S staining can see red mineralized nodules, oil red O staining can see red lipid droplets, toluidine blue staining can see chondrocytes blue; (4) DAPI staining, It was observed by SEM that mesenchymal stem cells from human placenta could adhere well on the surface of scaffold and could be used as seed cells for tissue engineering.
【作者單位】: 西南醫(yī)科大學;四川省人民醫(yī)院;
【基金】:四川省科技廳項目(2016TD0008,2014JY0187)~~
【分類號】:R329.2

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