【摘要】：利用Gly m Bd 28K天然蛋白免疫BALB/c雌性小鼠,取小鼠脾臟細(xì)胞與雜交瘤細(xì)胞融合,篩選出2株能穩(wěn)定分泌抗Gly m Bd 28K單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株1E3和2F4。體內(nèi)誘生腹水法大量制備單克隆抗體,經(jīng)純化后,得到2株均為Ig G1型的單克隆抗體m Ab1E3和m Ab2F4。間接ELISA方法測(cè)得m Ab1E3的效價(jià)達(dá)到1∶4.10×10~5,對(duì)Gly m Bd 28K蛋白的半數(shù)抑制率(IC_(50))為23.99μg·L~(-1),與花生蛋白、核桃蛋白等的交叉反應(yīng)率均低于0.1%。該單克隆抗體的制備為Gly m Bd 28K致敏蛋白的檢測(cè)以及抗原表位的鑒定奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:BALB/c female mice were immunized with Gly m Bd 28K natural protein. Two hybridoma cell lines, 1E3 and 2F4, which could stably secrete monoclonal antibody against Gly m Bd 28K, were selected from spleen cells of mice and hybridoma cells fused with hybridoma cells. After purification, two monoclonal antibodies m Ab1E3 and mAb2F4 were obtained. The titer of m Ab1E3 by indirect ELISA method was 1: 4.10 脳 10 ~ 5, the IC50 of Gly m Bd 28K protein was 23.99 渭 g / L ~ (-1), and the cross reaction rate with peanut protein and walnut protein was lower than 0.1%. The preparation of this monoclonal antibody laid a foundation for the detection of Gly m Bd 28K sensitized protein and the identification of antigenic epitopes.
【作者單位】： 河南工業(yè)大學(xué)糧油食品學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31301409) 河南工業(yè)大學(xué)自然科學(xué)基礎(chǔ)研究培育計(jì)劃(2014JCYJ01)
【分類號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2185310