【摘要】：采用RT-PCR技術(shù)從中國(guó)野生豬苓菌核(Polyporus umbellatus)中克隆得到一個(gè)Ⅱ型核糖體失活蛋白(typeⅡribosome inactivating protein,RIP)A鏈基因,該基因c DNA包含的完整開(kāi)放閱讀框?yàn)?73 bp,編碼的氨基酸為290個(gè),分子質(zhì)量為32.33 k Da,理論等電點(diǎn)為5.58。氨基酸序列分析表明,該基因編碼的蛋白具有RICIN超家族蛋白的保守結(jié)構(gòu)域。氨基酸序列多重比對(duì)及系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)結(jié)果顯示,豬苓RIP與硬柄小皮傘(Marasmius oreades)親緣關(guān)系最近。實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析表明,這個(gè)基因在不同的菌核部位都有表達(dá),且在蜜環(huán)菌侵染的菌核部位表達(dá)顯著上調(diào),提示該基因可能參與了豬苓響應(yīng)生物脅迫過(guò)程。此外,利用基因重組技術(shù)構(gòu)建p ET15b-Pu RIP原核表達(dá)載體,獲得了高質(zhì)量的His-Pu RIP融合蛋白,為多克隆抗體的制備提供材料基礎(chǔ),為研究基因功能奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:A type 鈪，

本文編號(hào)：2184704