hTERT多表位肽致敏mDC誘導(dǎo)CTL對HLA-A24陽性腫瘤細(xì)胞殺傷效應(yīng)的研究
[Abstract]:Aim: to study the immunoreactivity of human telomerase reverse transcriptase (hTERT) multiepitope mixed peptide (MAPs) (MAPs) on HLA-A24 positive tumor cells induced by specific cytotoxic T lymphocyte (CTL) (CTL) after (mDC) uptake by myeloid dendritic cells (MDC). Methods: four branched dendritic tandem hTERT epitope peptide (MAPs) and its single epitope peptides were synthesized. The peripheral blood of healthy volunteers with positive HLA-A24 was isolated and cultured by immunomagnetic beads. T lymphocytes were purified and cultured by nylon hair column method. The specific CTL proliferation was induced by sensitizing mDC with various epitope peptides, and the target cells were HLA-A24 positive tumor cell lines and HLA-A2/24 double negative tumor cell lines, and the target cells were HLA-A24 positive tumor cells and HLA-A2/24 double negative tumor cell lines. The secretion of IL-12 TNF- 偽 in supernatant of medium at different time points was detected by ELISA method, and the specific killing effect of CTL on tumor cells was detected by flow cytometry. Results: four branched MAPs peptides and mixed monoepitope peptides were synthesized from the T lymphocyte epitope I540 (ILAKFLHWL) hV461 (VYGFVRACL) and L766 (LTDLQPYMRQFVAHL) derived from hTERT. MDC (72.59%) was obtained by immunomagnetic bead negative sorting in peripheral blood mononuclear cells (PBMC). The high expression of MHC-I class II molecules (91.08%) and costimulatory molecule CD86 (77.13%) CD83 (92.16%) were obtained in mature mononuclear cells (91.08%) and costimulator CD86 (77.13%) respectively. Sensitizing mDC with synthetic hTERT polyepitope mixed peptide could effectively stimulate the proliferation of CTL and induce the specific killing effect on HLA-A24 positive tumor cell line. The sensitizing effect of MAPs polypeptide was more significant than that of mono-epitope mixed polypeptide (P0.05). Under the same condition, MAPs had no significant killing effect on HLA-A2/24 double-negative tumor cell line. Conclusion: sensitizing mDC with synthetic polypeptide of hTERT multiepitope can effectively induce the production of CTL and can specifically kill HLA-A24 positive tumor cells. It is of great significance in tumor immunotherapy.
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號】:R392
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