【摘要】：目的本研究采用重組酶介導(dǎo)的等溫核酸擴(kuò)增方法(RAA),通過(guò)使用逆轉(zhuǎn)錄酶,建立黃熱病毒的一步法等溫核酸擴(kuò)增(RT-RAA)方法。方法根據(jù)黃熱病毒基因組保守序列設(shè)計(jì)引物和探針,建立并分析RT-RAA的重復(fù)性、特異性、靈敏度;以所建立方法對(duì)黃熱病毒樣本進(jìn)行檢測(cè),同時(shí)以基因測(cè)序進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果黃熱病毒RT-RAA擴(kuò)增,體系中加入40 U的逆轉(zhuǎn)錄酶擴(kuò)增效果最佳。該方法檢測(cè)時(shí)間短(20 min),并且靈敏度高,檢測(cè)下限可達(dá)100 copy,與登革病毒、西尼羅病毒、日本乙型腦炎病毒、基孔肯雅熱病毒等蚊媒病毒無(wú)交叉反應(yīng),具有良好的特異性。結(jié)論構(gòu)建的黃熱病毒RT-RAA方法具有快速、特異以及靈敏的特點(diǎn),適應(yīng)于黃熱病毒的口岸快速檢測(cè)。
[Abstract]:Objective to establish a one step isothermal nucleic acid amplification (RT-RAA) method for yellow fever virus by means of recombinant enzyme mediated isothermal nucleic acid amplification (RAA),). Methods primers and probes were designed according to the conserved sequence of yellow fever virus genome to establish and analyze the repeatability, specificity and sensitivity of RT-RAA. Results the RT-RAA amplification of yellow fever virus was the best when 40 U reverse transcriptase was added into the system. The detection time is short (20 min), sensitivity is high, the detection limit is up to 100copy.There is no cross reaction with dengue virus, West Nile virus, Japanese encephalitis virus, Kikungunya fever virus and other mosquito-borne viruses), so it has good specificity. Conclusion the RT-RAA method of yellow fever virus is rapid, specific and sensitive, which is suitable for rapid detection of yellow fever virus at port.
【作者單位】： 浙江國(guó)際旅行衛(wèi)生保健中心;西藏國(guó)際旅行衛(wèi)生保健中心;江蘇奇天基因生物科技有限公司;
【基金】：國(guó)家質(zhì)檢總局科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014IK062) 浙江出入境檢驗(yàn)檢疫局科技計(jì)劃項(xiàng)目(ZK2014034)
【分類號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 鄧永強(qiáng);秦鄂德;;黃熱病及其病原的研究近況[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));2003年05期

2 姜擁軍,尚紅,康輝,Gregory F.Burton,王亞男;人免疫缺陷病毒Ⅰ型gag、env、rev mRNA檢測(cè)[J];中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2002年05期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

1 陳清國(guó);荊良;陳佳奇;靳海彤;;傳染性疾病病原體快速篩查及國(guó)際郵輪衛(wèi)生檢疫措施體系的建立[J];中國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫雜志;2012年01期

2 莊振榮;;自然疫源性傳染病預(yù)防控制相關(guān)研究[J];口岸衛(wèi)生控制;2011年04期

3 安德榮,呂鳳民,唐建江;新疆和田地區(qū)篩查2例HIV陽(yáng)性報(bào)道[J];臨床輸血與檢驗(yàn);2004年01期

4 俞標(biāo);李向鐸;;天津口岸國(guó)際郵輪疫情防控的探討[J];口岸衛(wèi)生控制;2013年04期

5 郎少偉;;天津口岸國(guó)際郵輪突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)對(duì)探討[J];口岸衛(wèi)生控制;2013年04期

6 任瑞文,郝麗,方美玉,程剛鋒,洪文艷,劉建偉,田小東,林立輝;套式逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)在黃熱病毒快速檢測(cè)中的應(yīng)用[J];中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2005年04期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 侯啟瑞;IGFs、LYZ基因和EAV-HP DNA序列SNPs與京海黃雞經(jīng)濟(jì)性狀的關(guān)聯(lián)分析[D];揚(yáng)州大學(xué);2010年

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 何海洋;黃熱病威脅印度[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(社會(huì)醫(yī)學(xué)分冊(cè));2003年02期

2 黃金水;;黃熱病經(jīng)湛江口岸傳入我國(guó)的可能性探討[J];旅行醫(yī)學(xué)科學(xué);2002年02期

3 胡文龍;唐博恒;任瑞文;李瑞生;沓世遠(yuǎn);馬美茵;楊虹;梁克峰;;黃熱病毒特異性抗原片段的篩選與鑒定[J];中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2013年02期

4 呂沁風(fēng);陳寅;吳忠華;鄭偉;張嚴(yán)峻;李禾;;黃熱病毒逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)方法的建立[J];微生物學(xué)通報(bào);2014年01期

5 侯爵;劉穎;邵一鳴;;黃熱病毒的基因組及其蛋白研究進(jìn)展[J];病毒學(xué)報(bào);2011年04期

6 任瑞文,郝麗,方美玉,程剛鋒,洪文艷,劉建偉,田小東,林立輝;套式逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)在黃熱病毒快速檢測(cè)中的應(yīng)用[J];中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2005年04期

7 劉振江;金寧一;魯會(huì)軍;李國(guó)江;劉昊;岳云強(qiáng);郭歡歡;周紅寧;楊中華;謝輝;;云南省思茅地區(qū)乙型腦炎病毒及黃熱病毒的分子流行病學(xué)監(jiān)測(cè)[J];中國(guó)動(dòng)物檢疫;2011年03期

8 彭文明,鄧永強(qiáng),于曼,范保昌,祝慶余,秦鄂德;黃熱病毒的一步RT-PCR法檢測(cè)[J];微生物學(xué)雜志;2003年04期

9 房仕銳,張應(yīng)鎮(zhèn);世界黃熱病的流行與監(jiān)測(cè)[J];中國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫雜志;1995年05期

10 卜宏磊,牟文斗;黃熱病17D疫苗預(yù)防接種的效果評(píng)價(jià)[J];中國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫雜志;1998年06期

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 桑雪玫;何謂黃熱病[N];中國(guó)老年報(bào);2001年

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本文編號(hào)：2152152