本文選題：樹突狀細(xì)胞 + 記憶性T細(xì)胞��； 參考：《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2016年12期

【摘要】：目的探討Wnt通路在記憶性T細(xì)胞(TM)增殖活化中發(fā)揮的調(diào)控作用。方法建立同種異體(BALB/c-C57BL/6)小鼠皮膚移植模型,采用免疫磁珠方法分選培養(yǎng)C57BL/6小鼠未成熟樹突狀細(xì)胞(imDC)、成熟樹突狀細(xì)胞(mDC)和TM,流式細(xì)胞術(shù)鑒定。在96孔板或TranswellTM中用imDC和負(fù)載BALB/c小鼠抗原的mDC與TM進(jìn)行混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)。氚標(biāo)記的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)檢測(cè)TM的增殖情況。ELISA檢測(cè)培養(yǎng)上清中白細(xì)胞介素2(IL-2)、IL-10、γ干擾素(IFN-γ)的水平。實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)imDC和mDC中Wnt基因的表達(dá)情況。雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)MLR中TM的β聯(lián)蛋白/T細(xì)胞因子(β-catenin/TCF)信號(hào)通路轉(zhuǎn)錄活性。結(jié)果與對(duì)照組相比,在96孔板中負(fù)載BALB/c小鼠抗原的mDC顯著誘導(dǎo)TM的增殖,上調(diào)IL-2和IFN-γ,下調(diào)IL-10的表達(dá)。mDC中Wnt3a和Wnt5a的mRNA表達(dá)水平顯著高于imDC。mDC與TM共培養(yǎng)可顯著增強(qiáng)TM的β-catenin/TCF信號(hào)通路轉(zhuǎn)錄活性。而在TranswellTM中培養(yǎng)的細(xì)胞基本未見細(xì)胞增殖。結(jié)論負(fù)載供者抗原的受者小鼠mDC可通過直接接觸的方式有效激活受者效應(yīng)型TM的增殖,Wnt通路的β-catenin/TCF轉(zhuǎn)錄激活可能是介導(dǎo)TM活化增殖的重要信號(hào)通路。
[Abstract]:Objective to investigate the regulatory role of Wnt pathway in the proliferation and activation of memory T cells (TM). Methods the skin allograft model of allogenic (BALB/c-C57BL/6) mice was established, the immature dendritic cells (imDC), mature dendritic cells (mDC) and TM, flow cytometry (FCM) were identified by immunomagnetic beads, and 96 orifice plates or Trans were used. Mixed lymphocyte reaction (MLR) with mDC and TM with imDC and BALB/c mouse antigen in wellTM. Tritium labeled thymidine (3H-TdR) detection of the proliferation of TM,.ELISA detection of the level of interleukin 2 (IL-2), IL-10, interferon gamma (IFN- gamma) in the supernatant. The transcriptional activity of TM's beta couplet /T cytokine (beta -catenin/TCF) signaling pathway in MLR was detected by the luciferase reporter gene. Results compared with the control group, the mDC significantly induced the proliferation of TM in 96 Kong Banzhong loaded BALB/c mice antigen, up regulation of IL-2 and IFN- gamma, and the expression level of Wnt3a and purified IL-10 was significantly higher than that in the.MDC. Co culture with TM significantly enhanced the transcriptional activity of TM's beta -catenin/TCF signaling pathway. But the cells cultured in TranswellTM had no cell proliferation. Conclusion the mDC of the recipient mouse loaded with the donor antigen can effectively activate the proliferation of the receptor effector TM by direct contact, and the transcription activation of the beta -catenin/TCF in the Wnt pathway may be the mediating TM. An important signaling pathway to activate proliferation.
【作者單位】： 貴州省人民醫(yī)院科教處循證醫(yī)學(xué)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31360222) 貴州省科技聯(lián)合基金(LH[2014]7034)
【分類號(hào)】：R392

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本文編號(hào)：2109951