本文選題：人腫瘤壞死因子α + 單克隆抗體��； 參考：《微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展》2016年06期

【摘要】：目的建立及驗(yàn)證用于全人源化抗人TNF-α(Tumor necrosis factor-α)單克隆抗體(簡稱抗人TNF-α單抗)鑒別的毛細(xì)管區(qū)帶電泳(Capillary zone electrophoresis,CZE)方法。方法采用DB-1毛細(xì)管,以樣品檢測分離度、遷移時(shí)間、電流及峰形為判斷標(biāo)準(zhǔn),篩選CZE過程中的各種參數(shù)(緩沖液p H、ε-氨基乙酸濃度、乙酸鈉濃度、羥丙基纖維素濃度、樣品稀釋劑、進(jìn)樣時(shí)間及運(yùn)行電壓等),建立CZE方法,并對方法的專屬性、精密度、中間精密度進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果建立的CZE方法參數(shù)條件為:緩沖液p H為5.0,EACA濃度為300 mmol/L,乙酸鈉濃度為20 mmol/L,HPMC質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05%,用50 mmol/L Tris稀釋樣品,進(jìn)樣時(shí)間為15 s,運(yùn)行電壓為20 k V。樣品制備重復(fù)性主峰遷移時(shí)間RSD為0.459%,中間精密度RSD為1.145%。結(jié)論 CZE方法分離度高、專屬性強(qiáng)、重復(fù)性和精密度好、簡單快速,可作為全人源化抗人TNF-α單抗的鑒別方法。
[Abstract]:Objective to establish and verify a capillary zone electrophoresistics (CZE) method for the identification of total human necrosis factor- 偽 monoclonal antibodies (McAbs) against human TNF- 偽. Methods DB-1 capillary tube was used to screen the parameters (buffer pH, 蔚 -aminoacetic acid concentration, sodium acetate concentration, hydroxypropyl cellulose concentration) in the CZE process according to the criteria of sample separation, migration time, current and peak shape. Sample diluent, sample injection time and operation voltage), establish CZE method, and verify the specificity, precision and intermediate precision of the method. Results the parameters of CZE method were as follows: buffer pH = 5.0 渭 mol / L, sodium acetate concentration = 20 mmol / L, mass fraction of HPMC = 0.05. The sample was diluted with 50 mmol / L Tris, the injection time was 15 s, and the operating voltage was 20 kV. The reproducibility of the main peak migration time was 0.459, and the intermediate precision RSD was 1.145. Conclusion the CZE method has the advantages of high separation degree, strong specificity, good repeatability and precision, simple and rapid, and can be used as the identification method of total humanized anti human TNF- 偽 monoclonal antibody.
【作者單位】： 湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬襄陽醫(yī)院超聲科;武漢生物制品研究所有限責(zé)任公司抗體研究室;
【基金】：國家科技重大專項(xiàng)課題資助項(xiàng)目(2011ZX09506-005)
【分類號】：R392

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