本文選題：豬生長激素 + 單克隆抗體��； 參考：《延邊大學(xué)》2011年碩士論文

【摘要】：豬生長激素是垂體分泌的多肽激素,與生長發(fā)育和繁殖功能有關(guān),大量研究證明,豬生長激素能顯著提高豬生長速度、瘦肉率和飼料報(bào)酬,對豬的生產(chǎn)、育種和飼料的調(diào)配產(chǎn)生重大的影響。本實(shí)驗(yàn)室對豬生長激素的研究是針對抗原表位的研究。本研究主要結(jié)果如下： 1.用實(shí)驗(yàn)室制備的雜交瘤細(xì)胞,注射到液體石蠟免疫一周后的經(jīng)產(chǎn)BALB/c小鼠,腹水采用辛酸-飽和硫酸法進(jìn)行粗提,再經(jīng)層析系統(tǒng)純化蛋白,最后用SDS-聚丙烯酞胺凝膠電泳檢測其純度,間接ELISA測定其OD490值,雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清效價(jià)為1：1600,制得的小鼠腹水效價(jià)為1：1.6×104 2.用豬生長激素單克隆抗體作為靶蛋白,對噬菌體隨機(jī)12肽庫進(jìn)行了四輪淘洗,噬菌體克隆回收率從1.1×10-8增加到1.0×10-2,目標(biāo)噬菌體克隆得到了有效富集。隨機(jī)挑取47個(gè)藍(lán)色噬菌斑擴(kuò)增后,經(jīng)間接ELISA檢測,發(fā)現(xiàn)有9個(gè)噬菌斑克隆與單克隆抗體有較強(qiáng)的特異性結(jié)合,將該9個(gè)陽性克隆提取ssDNA進(jìn)行序列測定及比對分析,結(jié)果中有7個(gè)陽性克隆的外源肽序列完全一致,與氨基酸序列進(jìn)行比對,得到同源序列NxxxTSx。這些模擬表位對豬生長激素表位研究具有一定的參考價(jià)值。為進(jìn)一步分析豬生長激素的結(jié)構(gòu)與功能的研究奠定基礎(chǔ),
[Abstract]:Porcine growth hormone is a polypeptide hormone secreted by the pituitary gland, which is related to growth, development and reproductive function. A large number of studies have proved that pig growth hormone can significantly improve the growth rate, lean meat rate and feed reward of pigs. Breeding and forage blending have a significant impact. The study of porcine growth hormone in our laboratory is aimed at antigen epitopes. The main results of this study are as follows: 1. The hybridoma cells prepared in the laboratory were injected into liquid paraffin to immunize BALB / r / c mice one week later. Ascites were extracted by octanoic acid-saturated sulfuric acid method, and the protein was purified by chromatography system. The purity was detected by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, the OD490 value was determined by indirect Elisa, the titer of supernatant of hybridoma cell culture was 1: 1600, and the titer of mouse ascites was 1: 1.6 脳 104.2. Using porcine growth hormone monoclonal antibody as the target protein, the phage random 12 peptide library was washed for four rounds. The phage clone recovery increased from 1.1 脳 10 ~ (-8) to 1.0 脳 10 ~ (-2), and the target phage clone was effectively enriched. After random amplification of 47 blue plaque, the results of indirect Elisa showed that 9 clones of plaque had strong specific binding with monoclonal antibody, and the 9 positive clones were extracted from ssDNA for sequence analysis and comparative analysis. Results the sequence of exogenous peptide of 7 positive clones was identical with amino acid sequence, and the homologous sequence NxxxTSxwas obtained. These mimic epitopes have some reference value for the study of porcine growth hormone epitopes. It lays a foundation for further study on the structure and function of porcine growth hormone.
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R392

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 余傳信;噬菌體展示技術(shù)及其應(yīng)用[J];國外醫(yī)學(xué).臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊;2003年04期

2 孔金超;鄭鑫;蘭海楠;閆峰;王珊珊;方南洙;;噬菌體展示技術(shù)及其在抗原表位方面的應(yīng)用[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2010年17期

3 劉新生;王永錄;;質(zhì)譜技術(shù)在抗原表位研究中的應(yīng)用[J];江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2010年05期

4 林天龍,陳強(qiáng),龔暉,劉曉東,俞伏松,楊金先,董傳甫;歐洲鰻免疫球蛋白單克隆抗體的制備與特性[J];水產(chǎn)學(xué)報(bào);2001年06期

5 周芬;王恬;張莉莉;丁月云;;豬生長激素的應(yīng)用及存在問題[J];飼料研究;2007年11期

6 李文清,王紅革,羅進(jìn)賢,岑英華;豬生長激素cDNA在芽孢桿菌中的表達(dá)[J];生物化學(xué)雜志;1993年04期

7 李鳳,孟亞鵬,劉燕飛,譚俊杰,付若彬,劉世貴,龍章富;豬生長激素基因的原核表達(dá)及其抗體制備[J];中國獸醫(yī)科技;2005年01期

8 王艷華;張德林;殷宏;付寶權(quán);;抗原表位預(yù)測方法的研究進(jìn)展[J];中國獸醫(yī)科學(xué);2009年10期

9 張美晶;王亮;李媛;董慧;姜海芳;陳超;曹培麗;郭丹;辛九慶;;豬肺炎支原體P97 C末端蛋白單克隆抗體的制備及其抗原表位分析[J];中國獸醫(yī)科學(xué);2010年02期

10 趙明軍,諶南輝,王萍,曲悅;噬菌體展示三肽囊素模擬肽的研究[J];中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2005年04期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前9條

1 肖昌;應(yīng)用隨機(jī)肽庫鑒定豬瘟病毒E2蛋白抗原表位[D];中國人民解放軍軍需大學(xué);2002年

2 于秋麗;羊促乳素單克隆抗體的制備和鑒定[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2008年

3 王小娥;利用噬菌體展示技術(shù)鑒定vvIBDV抗原表位及多表位模擬蛋白表達(dá)[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

4 趙磊;抗口蹄疫病毒單克隆抗體的制備和抗原模擬表位的篩選[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

5 于丹;雞傳染性支氣管炎病毒N蛋白單克隆抗體制備及抗原表位鑒定[D];延邊大學(xué);2009年

6 江燕;識別構(gòu)象型抗原表位抗狂犬病NP單抗研究[D];西南大學(xué);2010年

7 謝紅玲;豬細(xì)小病毒單克隆抗體的研制及其抗原表位的篩選[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2010年

8 佟丹丹;金黃色葡萄球菌IsdB免疫優(yōu)勢片段單抗制備及抗原表位初步分析[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2010年

9 姜海芳;牛邊緣無漿體主要表面蛋白5（MSP5）單克隆抗體的制備及抗原表位的鑒定[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2010年

，

本文編號：2085155