本文選題：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 + 軟骨分化�。� 參考：《南京中醫(yī)藥大學(xué)》2011年碩士論文

【摘要】：目的：觀察針?biāo)幗Y(jié)合對體外培養(yǎng)的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及糖胺聚糖含量、Ⅱ型膠原表達的影響,以探討針?biāo)幗Y(jié)合對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化的定向誘導(dǎo)作用和輔助改善作用。 方法：取20只SD大鼠,電針針刺7天,頸總動脈取血制備血清。另取30只4周齡SD大鼠骨髓中分離骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,體外傳代培養(yǎng),取第3代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分為對照組、針刺血清組、丹參注射液組及針?biāo)幗M,通過不同條件誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化。倒置顯微鏡下觀察原代培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞形態(tài)變化,運用MTT法觀察各組對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖的影響,采用阿利新藍法計算各組培養(yǎng)液內(nèi)糖胺聚糖(GAG)含量并比較各組之間分泌GAG的不同,運用免疫組織化學(xué)染色方法檢測各組中軟骨細(xì)胞Ⅱ型膠原表達的影響。 結(jié)果：①剛分離接種的細(xì)胞鏡下呈圓形,大小不一,數(shù)目較多,隨著培養(yǎng)時間的延長,貼壁細(xì)胞聚集生長,呈集落狀態(tài),細(xì)胞形態(tài)為典型梭形細(xì)胞。原代培養(yǎng)約6-7 d左右,細(xì)胞融合成單層,細(xì)胞梭形突起變長,排列有明顯方向性。培養(yǎng)約10d左右,細(xì)胞融合約80%。傳代后生長更加迅速,傳代細(xì)胞呈均一長梭形、多角形、短梭形,緊密排列似旋渦狀。②與對照組相比,丹參注射液及針?biāo)幗Y(jié)合均能夠促進骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖(P0.05),針?biāo)幗M作用更明顯(P0.01)；針刺血清不能促進骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖(P0.05)。③丹參注射液組及針?biāo)幗Y(jié)合組培養(yǎng)液GAG的含量與對照組GAG的含量相比有明顯升高(P0.05),針?biāo)幗M更為明顯(P0.01)；針刺血清則不能提高培養(yǎng)液GAG的含量(P0.05)。④免疫組織化學(xué)染色Ⅱ型膠原陽性表達為棕黃色染色,主要定位于細(xì)胞外基質(zhì),丹參組和針?biāo)幗M均有Ⅱ型膠原表達,針?biāo)幗M比丹參組表達強；針刺組和對照組沒有Ⅱ型膠原表達。結(jié)果表明針?biāo)幗M可以有效的促進Ⅱ型膠原表達,較丹參組效果好,針刺組并不能促進Ⅱ型膠原的表達。 結(jié)論： 復(fù)方丹參注射液和針?biāo)幗Y(jié)合的方法均能夠促進骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖,并能夠誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為軟骨細(xì)胞,針刺血清沒有這種作用,但針?biāo)幗Y(jié)合的方法較單純應(yīng)用復(fù)方丹參注射液在這兩方面的作用更加明顯。
[Abstract]:Objective: to observe the effects of acupuncture and medicine combination on proliferation, glycosaminoglycan content and type 鈪，

本文編號：2078521