本文選題：細胞模型 + 動物模型�。� 參考：《北京工業(yè)大學(xué)學(xué)報》2016年10期

【摘要】：為了解決人乳頭瘤病毒16型L1蛋白(HPV16L1)為主要靶點的疫苗缺乏腫瘤模型細胞來驗證疫苗的免疫效果的問題,構(gòu)建了一個細胞模型并可以利用此細胞在實驗動物體內(nèi)形成腫瘤,用于以HPV16L1為主要靶點疫苗的驗證實驗.利用這個模型細胞或腫瘤模型可以在體內(nèi)外檢測疫苗的免疫學(xué)性質(zhì)和保護功效.首先,利用聚合酶鏈式反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)的方法獲得目標(biāo)基因HPV16L1的基因序列并連接到載體質(zhì)粒中,將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞TC-1后在殺稻瘟菌素抗性壓力篩選下獲得穩(wěn)定表達HPV16L1的細胞株.對TC-1和TC-1-HPV16L1兩種細胞的生長增殖和成瘤特性進行比較發(fā)現(xiàn),外源基因的加入對細胞特性沒有影響.通過體外殺傷實驗證實細胞TC-1-HPV16L1能夠被HPV16L1靶點疫苗免疫過的小鼠脾淋巴細胞殺傷.實驗動物被疫苗免疫后,進行攻瘤實驗發(fā)現(xiàn)疫苗只對TC-1-HPV16L1組具有保護作用.綜上,在本研究中成功地構(gòu)建了可以檢測HPV16L1疫苗的抑瘤效果的模型細胞TC-1-HPV16L1,為HPV疫苗的研究提供了一個模型細胞.
[Abstract]:In order to solve the problem that human papillomavirus type 16 L1 protein (HPV16L1) vaccine lacks tumor model cells to verify the immune effect of the vaccine, a cell model was constructed and used to form tumors in experimental animals. It was used in the validation of HPV16 L1 vaccine. This model cell or tumor model can be used to detect the immunological properties and protective effects of the vaccine in vitro and in vivo. Firstly, the gene sequence of target gene HPV16L1 was obtained by polymerase chain reaction (PCR) and ligated into the vector plasmid. After transfection into TC-1 cell line, stable HPV16L1 cell line was obtained under the screening of rice blast resistance pressure. The growth, proliferation and tumorigenic characteristics of TC-1 and TC-1-HPV16L1 cells were compared. It was found that the addition of exogenous gene had no effect on the cell characteristics of TC-1 and TC-1-HPV16L1 cells. It was proved that TC-1-HPV16L1 cells could be killed by murine spleen lymphocytes immunized with HPV16L1 target vaccine in vitro. After immunized with the vaccine, the tumor attack test showed that the vaccine only had protective effect on TC-1-HPV16L1 group. In conclusion, the model cell TC-1-HPV16L1 was successfully constructed in this study, which can detect the inhibitory effect of HPV16L1 vaccine, which provides a model cell for the study of HPV vaccine.
【作者單位】： 北京工業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與生物工程學(xué)院環(huán)境病毒學(xué)北京市重點實驗室;中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所傳染病預(yù)防控制國家重點實驗室;
【基金】：國家“863”計劃資助項目(2012AA02A404)
【分類號】：R737.33;R-332

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本文編號：2076123