發(fā)布時(shí)間：2018-06-21 23:18

  本文選題：骨膜細(xì)胞 + 成骨分化�。� 參考：《汕頭大學(xué)》2011年碩士論文

【摘要】：【目的】 觀察骨膜細(xì)胞經(jīng)成骨因子BMP7誘導(dǎo)后的細(xì)胞生物學(xué)特征,鑒定骨膜細(xì)胞經(jīng)BMP7體外誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞的基因表達(dá)和細(xì)胞功能。 【方法】 取材于成人脛骨骨膜,常規(guī)體外培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,分別加入BMP7加成骨輔助劑和單純成骨輔助劑進(jìn)行培養(yǎng)。CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性,第5天、第10天、第15天和第20天分別采用RealTime-PCR檢測(cè)骨鈣素基因表達(dá),ELISA法檢測(cè)上清液ALP、骨鈣素及骨橋蛋白的水平,甲苯胺藍(lán)染色檢測(cè)糖胺聚糖及RealTime-PCR檢測(cè)Ⅱ型膠原基因,比色法檢測(cè)細(xì)胞ALP活性,ALP染色法檢測(cè)ALP、Von Kossa染色法檢測(cè)鈣結(jié)節(jié)。 【結(jié)果】 1、兩組骨鈣素基因表達(dá)及上清液ALP、骨鈣素、骨橋蛋白的含量均增高,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 2、兩組細(xì)胞的ALP和鈣結(jié)節(jié)染色陽性率增高,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 3.、甲苯胺藍(lán)染色陽性率及Ⅱ型膠原基因表達(dá)表現(xiàn)為先高后低,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 【結(jié)論】 1、骨膜細(xì)胞在BMP7誘導(dǎo)下體外大量增殖、分化成骨,經(jīng)過基因和細(xì)胞功能檢測(cè)證實(shí)其具有明顯的成骨特異基因表達(dá),并具有合成、分泌成骨特異蛋白的功能。 2、BMP7體外誘導(dǎo)骨膜細(xì)胞成骨分化過程中,除直接分化成骨外,還存在部分細(xì)胞先經(jīng)軟骨細(xì)胞形成再鈣化成骨的現(xiàn)象。 3、經(jīng)骨膜細(xì)胞-BMP7途徑在體外可獲取大量具備典型生物學(xué)特征的成骨細(xì)胞,并可用于組織工程的體外構(gòu)骨及臨床應(yīng)用。
[Abstract]:[objective] to observe the biological characteristics of periosteal cells induced by osteogenic factor BMP7. To identify the gene expression and cell function of osteoblasts induced by BMP7. [methods] the periosteum of adult tibia was cultured in vitro. The experiment was divided into experimental group and control group. BMP7 plus bone assistant and osteoblast adjuvant were added respectively to culture. CCK-8 method was used to detect cell proliferation activity. On the 15th and 20th days, the levels of ALP, osteocalcin and osteopontin in supernatant were detected by RealTime-PCR, glycosaminoglycan by toluidine blue staining and collagen 鈪，

本文編號(hào)：2050464